阿司匹林的质量标准

阿司匹林的质量标准

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姓名：王义西 班级：药学（3）班 学号： 指导老师：李乐 日期：2013年9月3日

乙酰水杨酸抗炎药物的分析

王义西

石河子大学药学院小学期药学第三组第三实验组 摘要

阿司匹林，化学名为2-( 乙酰氧基) 苯甲酸，作为主要的解热镇痛抗炎药收载于《中国药典》 (2010

年版)二部，临床上主要用于治疗感冒发烧, 牙痛、肌肉痛及神经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及类风湿病等, 是风湿、类风湿关节炎治疗的常用药物。本品主要的副作用是引起幽门痉挛及刺激胃黏膜的胃肠道反应, 长期服用导致胃肠出血。随着现代药学技术的发展，目前已有片剂、肠溶片、肠溶胶囊、泡腾片和栓剂等多种剂型，以阿司匹林为主药的复方制剂也层出不穷，形成了阿司匹林含量测定方法的各异性。随着科学技术的进步，各种仪器设备、新方法也应用到了阿司匹林的鉴别、杂质检查、含量测定中，本文对其作一综述。

关键词: 阿司匹林 鉴别 杂质检查 含量测定 HPLC 紫外分光光度法 TLC

阿司匹林临床上主要用于治疗感冒发烧, 牙痛、肌肉痛及神经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及类

风湿病等, 是风湿、类风湿关节炎治疗的常用药物。本文主要对阿司匹林做一综合论述，通过对阿司匹林的性状、鉴别、杂质检查、含量测定四个方面对乙酰水杨酸进行药物分析。

1 实验部分 1.1仪器与试剂

仪器：紫外分光光度计（Cintra404,GBC）、电子天平（AB135-S，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司METTLER TOLEDO）、微孔滤膜（尺寸25mm，孔径0.8μ，上海半岛实业有限公司净入器材厂）高效液相色谱仪、紫外检测器、自动进样器、色谱数据处理机、U V 一26 0 分光光度计、HPLC 色谱柱、 超纯

水器、展开槽、水浴锅、研钵、移液管（1、2、5、10ml）、吸耳球、容量瓶（25、50、100ml）、烧杯（10、100、500ml）、胶头吸管、直尺

试剂：复方乙酰水杨酸片（25mg/片）：阿司匹林贮备液溶液（1.5368mg/ml）、无水乙醇、氯仿、丙酮、冰醋酸、甲醇、95%乙醇、酚酞指示液、碳酸钠试液，稀盐酸、稀硫酸、三氯化铁试液、乙醚、硫酸铁铵试液（新制）、蒸馏水

1.2 性状

阿司匹林为白色结晶或结晶性粉末；遇湿气即缓缓水解。在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶，在氢氧化钠或碳酸钠中溶解，但同时分解。

酸性：阿司匹林分子结构中具有邻为取代苯甲酸结构，故具有酸性。 水解性：本类药物分子结构中具有酯键，可发生水解。

吸收光谱特性：本类药物中有苯环和特征取代基，均具有紫外和红外特征光谱。 1.3 鉴别试验

1.3.1 与三氯化铁反应

取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。

1.3.2 薄层色谱鉴别

样品溶液的制备

复方乙酰水杨酸片 取复方乙酰水杨酸片1片，研细，加氯仿15mI，振摇溶解，滤过，滤液作为样品溶液。

空白溶液的制备

复方乙酰水杨酸片 取片剂辅料(按生产厂家提供的一片处方量称取)加氯仿15mI，振摇后滤过，滤液作为空白溶液。

乙酰水杨酸对照品溶液的制备

复方乙酰水杨酸片 称取水杨酸对照品适量，加氯仿制成每1ml中含水杨酸1．0mg的单一对照品溶液。

制法：复方乙酰水杨酸片 照薄层色谱法 精密量取乙酰水杨酸标准品溶液、乙酰水杨酸对照品溶液各5 ul，点于

同一硅胶薄层板上，以氯仿一乙醚一丙酮一冰醋酸(27：18：1：2)为展开剂，展距为10cm，展开后，晾干，置紫外灯(254nm)下检视。样品溶液所显的1个斑点的位置与颜色分别与相应的对照品溶液所显的斑点一致，均显暗黄色。乙酰水杨酸Rf一0．85。

1.4 杂质检查

比色法 乙酰水杨酸中游离水杨酸的检查

取本品0.1g，加乙醇1ml溶解后，加冷水适量使成50ml立即溶液1ml（取1mol/L盐酸液1ml加稀硫酸铁铵2ml后，再加适量使成100ml摇匀，30秒钟内）。如颜色与对照液（精密称取水杨酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀）精密量取1ml，加乙醇1ml，水48ml与上述新制的硫酸铁铵溶液1ml，摇匀比较。不得更深（0.1%）。 1.5 含量测定

药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.209~0.231g。

精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g），置分液漏斗中，加水15ml，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20,10,10,10ml），提取氯仿液用同一份水10ml洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L氢氧化钠液滴定，即得（每1ml 0.1mol/L氢氧化钠液相当于18.02mg的C9H8O4）。

按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 g/片=（T·V·f/W称样量）×平均片重

1.5.2高效液相法测定阿司匹林含量

色谱条件：ODS为填充剂，

流动相：甲醇-冰醋酸-水（8:4:1） 检测波长：276nm

理论塔板数不低于3000

流速:0.8ml/min

柱温: 室温

测定方法：精密称取2.1864g药品，置50ml容量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，在40-50摄氏度的水浴中充分振摇使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品贮备液，再量取贮备液5ml，置100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用微孔过滤膜过滤，进样，记录色谱图。

取阿司匹林对照品，精密称取10mg。置于100ml容量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，同法测定。

标示量=（Cr*Ax/Ar*D*W）/(W*标示量）*100%

1.5.3 紫外分光光度法

平行称量样品101.0mg、101.8mg、106.0mg，分别用无水乙醇溶解，定容至50ml容量瓶中即得。设定好参数后，转换进入计算模式。先进行空白调零，分别对3个不同浓度的样品溶液进行3次平行检测。

标示量=A*D*W*1000/E*100*W*B*100%

2 结果与讨论 2.1 鉴别

2.1.1 阿司匹林与三氯化铁试液在加热条件下反应生成紫堇色。

2.1.2 阿司匹林与碳酸钠试液加热水解，得水杨酸钠及醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，产生醋酸的臭气。 2.1.3 薄层色谱

阿司匹林标准品：Rf=5.1/7.3≈0.699 阿司匹林供试品：Rf=5.0/7.3≈0.685 两者的Rf值基本接近，由此可得供试品中含有阿司匹林。 2.2 杂质检查

2.2.1 比色法 如图所示:

左: 标准品 右: 供试品 2.3 含量测定 2.3.1 两步滴定法

g/片=（T·V·f/W称样量）×平均片重=(18.02mg/ml×22.1ml×1/0.9162g)×0.5039g=0.219g/片

（图见附件1）

标示量=（Cr×Ax/Ar×D×W）/(W×标示量）×100%

=10×1565247×0.5039/100××0.2 =(782623.5 /826330.66)×100% ≈95.0%

计算得平均制剂规格范围为格。

本品不合格可样品未完全溶解；可能有样品分解。

3 结论 3.1鉴别实验

3.1.1 与三氯化铁反应 本方案设计加热使阿司匹林水解成水杨酸，水杨酸在中性或弱酸性条件下加热与三氯化铁试液反应，酚羟基与三价铁结合生成紫堇色铁配合物。实验结果出现了如上陈述的紫堇色。说明供试品中含有阿司匹林。

3.1.2 水解反应 本方案利用的是阿司匹林的水解反应，但在实验操作后只出现了气泡和醋酸的臭气，并未析出白色沉淀。分析实验失败的原因有以下四点：①实验室准备的稀硫酸经PH试纸测试为深红色，表明并不是符合实验使用的稀硫酸，浓度较高；②所取用的药片中阿司匹林含量较少，加热水解后产生的水杨酸就会相应的更少；③水解不充分致使生成的水杨酸很少，无法产生明显可见的白色沉淀。

3.1.3 薄层色谱法 TLC法为鉴别阿司匹林方法中最优先选择的鉴别方法，本实验结果标准品与供试品试液的Rf值极其相近，说明供试品中含有阿司匹林。 3.2 杂质检查

3.2.1 比色法 阿司匹林的杂质检查采用了较常用和主观的比色法，由上图所示，左（标准品）颜色比右（供试品）颜色深，供试品颜色不得比标准品颜色更深，说明供试品中的杂质限量符合药典规定，为合格品。 3.3 含量测定

3.3.1 水解后剩余量滴定法 水解后剩余量滴定法利用阿司匹林酯键在碱性环境下易水解的特性，加入估量

标示量B%=3.09%。药典规定

编号 1 2 3

浓度

（平均值）A 标示量B 95%-105%，所以该药品不合

（mg/ml） 2.016 2.026 2.114

0.6526 0.6832 0.725

2.94% 3.07% 3.26%

能的原因：①在制备样品时，②样品制备后没有立即测量，

的氢氧化钠滴定液，加热水解酯键后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠滴定液。实验结果计算所得阿司匹林的平均片重为0.219g，而使用的药片的规格为0.2g，说明所测定的阿司匹林的含量合格。

3.3.2 HPLC法 HPLC法测定阿司匹林含量的色谱图见附件一，将原来高浓度的试液稀释了10倍和100倍再进针后，色谱图较之前更理想，面积%的值高达100%，说明所测供试品中杂质含量减少，相应阿司匹林的含量较高。数据处理的结果百分标示量约为95%，则表明供试品的阿司匹林含量合格。

由于制剂的含量限度较宽，因而对于制剂的含量测定方法应以专一性为主，可更好地测定制剂的成分，以便更好的控制质量，而HPLC法可以满足所有的要求。故我组采用了专一性与精确度都较好的HPLC法测定阿司匹林的含量。

3.3.3 紫外分光光度法 利用紫外分光光度法进行阿司匹林的含量测定，计算得平均标示量B%=3.09%。

药典规定制剂规格范围为95%-105%，所以该药品不合格，说明实验失败，分析失败的原因有：①在制备样品时，未完全溶解；②样品制备后没有立即测量，可能有样品分解；③过滤不充分，仍有杂质残存，影响测定④仪器操作不当。 实验心得：

通过本次试验，使我更加深刻的了解了药物分析的全部过程，对一个药物质量的评定，首先通过鉴别，再通过杂质检查，最后含量测定，每一步都特别关键。

我们组实验的完成靠的是我们大家的一起动手，一起思考，团结在一起。实验过程中也遇到了很多的问题，这时候就需要我们冷静的思考，哪里出现了问题，是药品不对还是方法不对，如果一个方法分析三次而且做了三次，还是有很大的问题，我们会选择另一个方案，并且努力去分析上次实验的错误点。在紫外分光光度法含量测定实验中，我们小组就遇到了很大的麻烦，连着做了四次，吸光度一直都在1以上，出现相同的错误。最大原因就是前面没有认真思考，只是盲目的在做。后来询问了老师，也分析出了原因。

在做高效液相色谱分析法前，因为我们小组了解到前面小组做很多次都是失败，于是在做此HPLC法之前我们就去了解别的小组失败的原因，他们的溶剂试剂，流动性成分及比例。等全部了解完之后，再开始动手，结果一次性成功了，我们出的峰（见附件一）很理想，第一个样品的峰可能由于杂质太多，出的峰也比较多。后来我们给样品稀释，分别稀释10倍和100倍。使杂质浓度减少，出的峰更是理想。

实验中需要我们严谨的态度，发现问题要耐心分析。感受实验的过程，让自己通过一次实验真正有所收获。

参考文献

[1] 朱景申.药物分析//国家执业药师资格考试应试指南[M].西安:中国医药科技出版社,2000.163-167. [2] 何英梅,贺军权.小剂量阿司匹林肠溶片含量测定商榷[J].中国药事,2005,19(2):110-111. [3] 国家药典委员会.中国药典[S].二部.北京:化学工业出版社,2005.283-284

附件一

阿司匹林HPLC色谱图

标准品HPLC:

样品HLPC：

峰# 峰# 保留时间 2.618 面积 面积% 分离度 拖尾因子 理论塔板# 1 100 0 0.695 800.063 保留时间 0.356 1.425 2.62 3.535 面积 面积% 分离度 拖尾因子 理论塔板# 1 2 3 4 5 6 7 8 9 3.959 4.399 4.85 5.506 7.587 9392 3094 1565247 36425 21806 13781 24576 11850 103398 0.5248 0.1729 87.465 2.0354 1.2185 0.7701 1.3733 0.6622 0.5778 面积 0 2.158 2.55 0.861 0.186 0 0 0.159 1.455 面积% 1.726 0 0.753 0 0 0 0 0 1.026 分离度 17.802 76.307 1350.516 59.056 33.957 0 10.673 89.675 3204.758 拖尾因子 理论塔板# 稀释

稀释10倍后样品HPLC 峰 # 保留时间 100倍后HPLC

1 2 峰# 2.083 2.657 保留时间 2.218 2.525 2.793 8829 0.8658 1010909 99.1342 面积 面积% 0 2.24 分离度 0 1258.832 样品0.975 1470.222 拖尾因子 理论塔板# 1 2 3 9318 1.0333 1309 0.1451 891066 98.8215 0 0.687 0.571 0 1458.901 0 234.372 0.978 1617.386