卵巢癌患者PD-L1的表达研究

一１８５４一　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇ￣，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２０１０，Ｖｏｌ　！　『０．！！　文章编号：１００７—４２８７（２０１０）１１—１８５４—０３　卵巢癌患者ＰＤ．Ｌ１的表达研究　于晓伟　，李春红　，张松灵　，张晓霞　，何津　，张丽宏　，崔满华　（１．吉林大学第一医院妇产科，吉林长春１３００２１；２．吉林大学基础医学院病理教研室，吉林长春１３００２１；　３．吉林大学第二医院妇产科，吉林长春１３００４１）　ＰＤ，Ｌ１、ＰＤ—Ｌ２是新发现的Ｂ７家族共刺激分子　过氧化酶，室温１５　ｍｉｎ；（５）ＰＢＳ洗５　ｍｉｎ，洗３次；（６）　配体，二者具有共同的受体ＰＤ．１，并通过与受体ＰＤ一　１结合抑制Ｔ细胞的增殖和过度活化，在细胞免疫　应答过程中起负调控作用，同时通过影响细胞因子　加封闭液（试剂Ｂ）室温封闭１５　ｍｉｎ；（７）滴加一抗，　４ｃｃ过夜；（８）ＰＢｓ洗５　ｍｉｎ，洗３次；（９）滴加生物素标　记的抗鼠／兔ＩｇＧ的第二抗体（试剂ｃ），室温１５　ｒａｉｎ；　的分泌对体液免疫也发挥了调控作用。ＰＤ—Ｌ１、ＰＤ—　Ｌ２／ＰＤ．１路径在机体自身免疫耐受和肿瘤细胞逃逸　机体免疫监控过程中都发挥着重要作用。目前研究　发现许多肿瘤表达ＰＤ．Ｌ１。ＰＤ—Ｌ１在肿瘤细胞上的　表达削弱其免疫原性，影响其产生特异性Ｔ细胞应　答，抑制肿瘤免疫应答的产生。肿瘤细胞表达的ＰＤ．　（１０）ＰＢＳ洗５　ｍｉｎ，洗３次；（１１）滴加辣根过氧化酶标　记的链霉菌抗生物素蛋白（试剂Ｄ）室温１５　ｍｉｎ；　（１２）ＰＢＳ洗５　ｒａｉｎ，洗３次；（１３）滴加显色剂ＤＡＢ，光　镜下观察，显色适当后用水终止；（１４）Ｍａｙｅｒ苏木素　复染细胞核，水洗；（１５）弱氨水返蓝，水洗；（１６）脱　水、透明、中性树胶封片。　１．２．３结果判定阳性结果：细胞胞浆或（和）胞膜　ｕ能通过诱导特异性Ｔ细胞的凋亡而使肿瘤细胞　发生免疫逃逸。　１材料与方法　１．１材料　呈棕黄色颗粒。在局部阳性染色区域内评估ＰＤ．Ｌｌ　＋癌细胞占所有癌细胞的比例。　１．３统计分析　实验组：卵巢癌症患者４ＪＤ例，来源于２００５年３　月一２００７年１Ｏ月期间在吉林大学第一医院妇产科　的住院手术患者，年龄４５—７０岁，平均年龄（５８．３±　１３．７）岁。卵巢癌患者术前均未行放疗、化疗。所有　病例均经手术病理确诊为浆液性上皮性卵巢癌。　对照组：子宫肌瘤患者经病理证实的正常卵巢　组织１０例，来源于同期在吉林大学第一医院妇产科　行子宫切除术及附件切除术的患者，年龄４５—６０　岁，平均年龄（５０．３±４．２１）岁。　正态数据采用Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ　Ｅｘｅｅｌ　２００３的统计学工　具进行统计学处理，结果以牙±　表示，经方差齐性　检验后，组问比较采用ｔ检验。所有数据均用　ＳＰＳＳ１０．０　ｆｏｒ　ｗｉｎｄｏｗｓ软件包处理。　２结果　ＰＤ．Ｌ１主要表达在卵巢癌上皮细胞的胞浆内或　（和）胞膜上（见图１：ａ＿ｂ）；而正常卵巢组织不表达　ＰＤ—Ｌ１。在４０Ｏ×显微镜下分析ＰＤ—Ｌ１表达情况。在　局部阳性染色区域内评估ＰＤ．Ｌ１＋癌细胞占所有癌　细胞的比例。每４００×视野至少２００个癌细胞。癌　细胞中ＰＤ．ＬＩ＋癌细胞的平均比例５１．２±１１．Ｏ％，　范围１２．１．８０．１％。　３讨论　卵巢癌组织及正常卵巢组织标本固定于１０％　的福尔马林固定液中，经取材、脱水、透明、浸蜡、包　埋后，切片。切片厚为４　ｍ，烤干后备用。　１．２免疫组织化学法　１．２．１　主要试剂及试剂盒　兔抗多克隆抗体　ＰＤ．Ｌ１，浓缩型，购自于Ｓａｎｔｉａ公司，工作液为１：１００；　通用型ｓＰ试剂盒，及ＤＡＢ显色试剂盒购于福　州迈新公司　在免疫应答的过程中，除了通过ＡＰＣ递呈ＭＨＣ　处理过的抗原给抗原特异Ｔ细胞以提供第一信号　外，还需共刺激分子作为辅助信号的协同作用，达到　生理阈值后才能使Ｔ细胞活化，产生正常的应答反　应。目前己知的共刺激分子分为３个家族，即免疫　球蛋白超家族、ＴＮＦ家族和细胞因子家族。其中免　疫球蛋白超家族是唯一能从ＡＰＣ单向传递信号到Ｔ　细胞的共刺激分子。ＰＤ—ＬＩ、ＰＤ．Ｌ２是新发现的Ｂ７　家族共刺激分子配体，二者具有共同的受体ＰＤ—ｌ，并　１．２．２具体步骤（１）石蜡切片常规脱蜡至水洗；　（２）柠檬酸盐９５℃热修复５　ｍｉｎ后，室温冷却；（３）　ＰＢＳ洗５　ｍｉｎ，洗３次；（４）阻断剂（试剂Ａ）去内源性　＊通讯作者　国实验诊断学２０１０年１１月第１４卷第１１　（ａ）卵巢癌上皮ＰＤ．Ｌ１低表达（×４ＯＯ）　（ｂ）卵巢癌上皮ＰＤ—Ｌ１高表达（Ｘ　４ＯＯ）　图１卵巢癌上皮细胞ＰＤ－Ｌ１的表达　通过与受体ＰＤ一１结合抑制Ｔ细胞的增殖和过度活　化，在细胞免疫应答过程中起负调控作用，同时通过　影响细胞因子的分泌对体液免疫也发挥了调控作　用。ＰＤ—ＬＩ、ＰＤ—Ｌ２／ＰＤ．１路径在机体自身免疫耐受和　的肿瘤患者预后不好，例如肾癌、卵巢癌、膀胱癌，胃　癌、乳腺癌和胰腺癌，此外这些研究提示肿瘤细胞高　表达ＰＤ．Ｌ１的患者临床分期晚，转移早。　本研究中所有被检测的卵巢癌患者肿瘤细胞的　肿瘤细胞逃逸机体免疫监控过程中都发挥着重要作　用。　胞浆或（和）胞膜均表达ＰＤ—Ｌ１，癌细胞中ＰＤ．Ｌ１　癌　细胞的平均比例５１．２±１１．０％，范围１２．１—８０．１％。　肿瘤表达的抗原能够被宿主的Ｔ细胞识别，但　是肿瘤的清除却很少。这一失败的原因部分归于肿　瘤微环境的免疫抑制的存在。例如肿瘤细胞分泌各　种免疫抑制分子例如ＴＧＦ．Ｉ３和可溶性ＭＨＣＩ类链相　关分子［１，２］表达免疫抑制性分子Ｆａｓ配体ｌ　，诱导Ｔ　细胞表达ＣＴＬＡ一４　４　Ｊ。　目前研究认为肿瘤细胞表达ＰＤ—Ｌ１通过下列方面削　弱机体对肿瘤的免疫应答：（１）ＰＤ．Ｌ１在肿瘤细胞上　的表达削弱其免疫原性，影响其产生特异性Ｔ细胞　应答，抑制肿瘤免疫应答的产生。（２）肿瘤细胞表达　的ＰＤ．Ｌ１能通过诱导特异性ＣＴＬ的凋亡而使肿瘤细　胞发生免疫逃逸＿１　。（３）肿瘤组织中的巨噬细胞分　泌的ＩＬ一１０以及肿瘤细胞产生的ＶＥＧＦ均可上调ＤＣ　表面ＰＤ—Ｌ１的表达，直接影响其激发Ｔ细胞产生抗　肿瘤免疫应答的能力。　近年来发现免疫抑制性受体ＰＤ．１在肿瘤的免　疫逃逸中发挥重要作用。ＰＤ．１表达在活性Ｔ细胞　及Ｂ细胞上，通过募集酪氨酸磷酸酶ＳＨＰ一２来抑制　它们的活性。Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＤＣ、巨噬细胞、间充质　干细胞等表达ＰＤ．Ｌ１［５』。在非淋巴组织有广泛表达，　与其他肿瘤相比，卵巢癌ＰＤ—Ｌ１表达要高于其　他恶性肿瘤，例如肺癌（５０％），食道癌（４４％），胃癌　胸腺组织高表达ＰＤ—Ｌ１，心脏、脾、肾、肝、肺、皮肤、　肌肉也有不同程度的中等表达。此外有报道胎盘也　表达ＰＤ—ＬＩ。　（４２％），。肾癌（３７％）等，说明ＰＤ—Ｌ１可能在卵巢癌的　抑制宿主免疫反应中发挥重要作用。Ｊｕｎｚｏ研究发　现接近５０％卵巢癌患者表达ＰＤ—Ｉ２，与肺癌和食道　癌相近。他还同时分析了ＰＤ—Ｌｓ与卵巢癌患者预后　的关系，发现高表达ＰＤ—Ｌ１的患者与低表达或不表　达ＰＤ—Ｌ１的患者相比预后差，而且ＰＤ—Ｌ１的表达与　表达在抗原提呈细胞上的ＰＤ—Ｌｓ通过作用于Ｔ　细胞上的ＰＤ一１，诱导Ｔ细胞无能或凋亡，因ＪｔＬ￣，Ｆ周　组织表达ＰＤ—Ｌｓ直接抑制自身反应性淋巴细胞。近　来研究发现许多肿瘤表达ＰＤ—Ｌ１，包括乳腺癌、肺癌、　临床病理分期和肿瘤的病理类型无相关性，和其他　的预后指标例如淋巴结转移及残余病灶等相比ＰＤ—　Ｌｌ的表达是独立的预后指标。在肾癌食道癌及胃　癌研究中发现ＰＤ—Ｌ１的表达也是独立的预后指　标ｌｌ７＿　］。但也有相反报道在肺癌中ＰＤ—Ｉｓ表达与预　后的无相关性ｌ２ｏ３。　结肠癌、卵巢癌、黑色素瘤、膀胱癌、肝癌、胃癌、神经　胶质瘤、甲状腺癌等均有报道ｌ６　。此外ＰＤ一１在　肿瘤浸润淋巴细胞上调，这可能诱导免疫抑制ｌ　］。　ＰＤ—Ｌ１表达于卵巢癌上皮内，而非问质和浸润ＣＤ８　Ｔ细胞，提示ＰＤ．Ｌ１抑制肿瘤内ＣＤ８　Ｔ细胞的移　动［１５ｊ。值得注意的是近来研究还发现，表达ＰＤ—Ｌｌ　在有关肿瘤细胞表达ＰＤ．Ｌｓ抑制ＣＤ８＋Ｔ细胞　一１８５６一　Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２０１０，Ｖｏｌ　ｌ４，Ｎｏ．１１　功能的研究中，Ｊｕｎ￣ｏ发现卵巢癌上皮内ＣＤ８　ＴＩＬ可　５０９４．　以预测患者的预后。卵巢癌ＰＤ．Ｌ１的表达与卵巢癌　上皮内ＣＤ８　ＴＩＬ的计数呈负相关，而ＰＤ—Ｌ２的表达　１１１　Ｊ　Ｎａｋａｎｉｓｈｉ　Ｊ，Ｗａｄａ　Ｙ，Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｏｖｅｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｂ７－Ｈ１　（ＰＤ—Ｌ１）　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ａｓｓｃｉｏａｔｅｓ　ｗｉｔｈ　ｔｍｏｒ　ｇｕｒａｄｅ　ａｎｄ　ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ　与卵巢癌上皮内ＣＤ８　ＴＩＬ的计数无关。　肿瘤表达ＰＤ—Ｌｌ诱导肿瘤免疫逃逸，导致肿瘤　生长，提示ＰＤ．１／ＰＤ—Ｌ１途径可以作为肿瘤免疫治　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｕｒｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃａｎｃｅｒｓ［Ｊ　Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ　ｌｍｍｕｎｏｌ　ｌｍｍｕｎｏｔｈｅｒ，　２００７，５６（８）：１１７３．　１１２　ＪＮｏｎｆｉ　Ｔ，Ｓｈｏ　Ｍ，Ａｋａｈｏｒｉ　Ｔ，Ｈａｍａｄａ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ　ａｎｄ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｐｏｔｅｎｔｉｌ　ｏｆａ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｄｅａｔｈ－－１　ｌｉｇａｎｄ／ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ－－　疗的新靶点。实际上已有各种动物实验研究发现阻　ｄｅａｔｈ一１　ｐａｔｈｗａｙｉｎ　ｈｕｎ￣ｎ　ａｐａｎｃｒｅａｔｉｃ　ｃａｎｅｅｒ［Ｊ］．ＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００７，　断ＰＤ．１或ＰＤ．Ｌ１，可以有效地清除肿瘤。　参考文献：　【１］Ｇｍｈ　Ｖ，Ｗｕ　Ｊ，Ｙｅｅ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｔｕｍｏｕｒ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ＭＩＣ　ｌｉｇａｎｄｓ　ｉｍ　ｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＮＫＧ２Ｄ　ａｎｄ　Ｔ—ｃｅｌｌ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００２，４１９　（６９０８）：７３４．　【２ｊＰａｒｄｏｌｌ　ＤＭ．Ｓｐｉｎｎｉｎｇ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　ｉｎｔｏ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａ．　ｐｙ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｉｍｍｕｎｏ１．２００２（４）：２２７．　１３ｊＩａｎｇ　Ｋ，Ｅｎｔｓｅｈｌａｄｅｎ　Ｆ，Ｗｅｉｄｔ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｔｍｎｏｒ　ｉｍｍｕｎｅ　ｅｓｃａｐｅ　ｍｅｃｈａ—　ｎｉｓｔｍ：ｉｍｐａｃｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ　ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｍｍｔｍｏｌ　Ｉｍ．　ｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００６，５５（７）：７４９　［４］Ｃｏｌｌｉｎｓ　Ｍ，Ｌｉｎｇ　Ｖ，Ｃａｒｒｅｎｏ　ＢＭ．Ｔｈｅ　Ｂ７　ｆａｎｆｉｌｙ　ｏｆ　ｉｒｍｎｕｎｅ—ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｌｉｇ—　ａｎｄｓ［Ｊ］　Ｇｅｎｏｍｅ　Ｂｉｏｌ，２００５；６（６）：２２３．　［５］Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｔ，Ａｋｉｂａ　Ｈ，１ｗａｉ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｄｅａｔｈ　１　ｌｉｇａｎｄｓ　ｂｙｍｌｌｒｉｎｅＴ　ｑｅＨｓａｎｄＡＰＣ［Ｊ］．ＪＩｍｍｍＭ，２００２，１６９（１０）：５５３８．　［６１Ｄｏｎｇ　Ｈ，Ｓｔｒｏｍｅ　ＳＥ，ｓａｌ０ｍ＿ｄｌ】ＤＲ，ｅｔ　１ａ．Ｔｕｍｏｒ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　Ｂ７一Ｈ１　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　Ｔ－ｃｅｌｌ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｅｖａｓｉｏｎ［Ｊ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．　２００２，８（８）：７９３．　［７］Ｈａｍａｎｉｓｈｉ　Ｊ，Ｍａｎｄａｉ　Ｍ，１ｗａｓａｋｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　１　ｌｉｇａｎｄ　１　ａｎｄ　ｔｍｕｏｒ－ｉｉｆｎｌｔｒａｔｉｎｇ　ＣＤ８＋Ｔ　ｌｙｍｐｈｏｅｙｔｅｓ　ａｒｅ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｈｕ．　ｍａｎ　ｏｖａｒｉｎａ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ３．Ｐｒｏｅ．Ｎａｔ１．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２００７，１０４（９）：３３６０．　［８］Ｓ￣ｏｍｅ　ＳＥ，Ｄｏｎｇ　Ｈ，Ｔａｍｕｒａ　Ｈ，ｅｔａ１．．Ｂ７一Ｈ１　ｂｌｃｏｋａｄｅ　ａｕｇｍｅｎｔｓ　ａｄｏｐｔｉｖｅ　Ｔ－ｃｅｌｌ　ｉｍｍａｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｆｏｒｓ　ｑｕａｍｏｎｓ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００３，　６３（１９）：６５０１．　【９］ｌｍｕａｎＢＡ，Ｓｅｂｏ　ＴＪ，ＦｒｉｇｏｌａＸ，ｅｔａｌ，ＰＤ—ＬＩ（Ｂ７－Ｈ１）ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｙ　ｕｒｏｌｈｅ—　ｌｉｌａ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｌａｄｄｅ　ｒａｎｄ　ＢＣＧ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ｇｒａｎｕｌｏｍａｔａ：ａｓｓｏ—ｃｉａｔｉｎｏｓ　ｗｉｈｔ　ｌｃｏａｌｉｚｅｄ　ｓｔａｇｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ，２００７，１０９（８）：１４９９．　［１０］Ｋｏｎｉｓｈｉ　Ｊ，Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｋ，Ａｚｕｍａ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｂ７．Ｈ１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｎ　ｎｏｎｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｎｏｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｔｕｍｏｒ－ｉｉｆｎｈｒａｔｉｎ￣ｙｍｐｈｏ—　ｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ＰＤ－１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃｌｉｎ［Ｊ　３．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００４，１０（１５）：　１３（７）：２１５１．　１１３ｊＴｈｏｍｐｓｏｎ　ＲＨ，Ｇｉｌｌｅｔｔ　ＭＤ，Ｃｈｅｖｉｌｌｅ　ＪＣ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ　Ｂ７一ＨＩ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ：ｉｎｄｉｃａｔｏｒ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ａｇｇｒｅｓｓｉｖｅｎｅｓｓ　ａｎｄ　ｐｏ—　ｔｅｎｔｉｌａ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｔａｒｇｅｔｌ　Ｊ］．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ１．Ａｃａｄ．ｓｃｉ．ＵＳＡ．２００４，１０１　（４９）：１７１７４．　１　１４Ｊ　Ｗｕ　Ｃ，Ｚｈｕ　Ｙ，Ｊｉａｎｇ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．１ｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｌｃｏａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｍ一　、　ｒｇａｍｍｅｄ　ｄｅａｔｈ一１ｌｉｇａｎｄ一１（ＰＤ—Ｌ１）ｉｎｇａｓｔｒｉｅ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ，２００６，１０８（１）：１９．　１１５　ＪＲａｍａｎｉｓｈｉ　Ｊ，Ｍａｎｄａｌ　Ｍ，１ｗａｓａｋｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｃｅｌｌ　ｄｅａｔｈ　１　ｌｉｇ・　ａｎｄ　１　ａｎｄｔ　ｕｍｏｒ－ｉｔ￣ｌｔｒａｔｉｎｇ　ＣＤ８　Ｔ　ｌ　ｈ０ｃｙ￡ｅｓ　ａ　ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｐｒｃｏ．Ｎａｔ１．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，２ＯＯ７，１０４（９）：　３３６ｏ．　１１６　ＪＨｉｒｎａｏ　Ｆ，Ｋａｎｅｋｏ　Ｋ，Ｔａｍｕｒａ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｂｌｃｏｋａｄｅ　ｏｆ　ＩＦ／一Ｈｌ　ａｎｄ　ＰＤ一１　ｂｖ　ｍｏｎｏｃｌｎｏａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ［Ｊ］．Ｃａｎ—　ｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００５，６５（３）：１０８９．　１１７　ＪＴｈｏｍｐｓｏｎ　ＲＨ，Ｋｕｎｔｚ　ＳＭ，Ｌｅｉｂｏｖｉｃｈ　ＢＣ，ｅｔ　ａ１．Ｔｕｍｏｒ　Ｂ７．Ｈｌ　ｉｓ　ｓａｓｏｃｉａｔ—　ｄｅ　ｗｉｔｈ　ｐｏｏｒ　ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ　ｉｎ　ｒｅｎａｌ　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｌｏｎｇ—ｔｅｒｍ　ｆｏｌｌｏｗ—ｕｐ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００６，６６（７）：３３８１．　［１８￣Ｏｈｉｇａｓｈｉ　Ｙ，Ｓｈｏ　Ｍ，Ｙａｍａｄａ　Ｙ，ｅｔ　１ａ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｃｅ　ｏｆｐｍｇｒａｒｍｎｅｄ　ｄｅａｔｈ・１　ｌｉｇａｎｄ一１　ａｎｄ　ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ　ｄｅａｔｈ一１　ｌｉｇａｎｄ一２　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００５，１１（８）：２９４７．　１　１９　Ｊ　Ｗｕ　Ｃ，Ｚｈｕ　Ｙ，Ｊｉａｎｇ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．１ｍｍｕｎｏｈｉｓｔｃｏｈｅｍｉｅａｌ　ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｍ—　ｇｒａｍｍｅｄ　ｄｅａｔｈ一１　ｌｉｇａｎｄ一１（ＰＤ－Ｌ１）ｉｎ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｃｅ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｉｓｔｃｏｈｅｍ．２００６；１０８（１）：１９．　［２０ｊＫｏｎｉｓｈｉ　Ｊ，Ｙａｍａｚａｋｉ　Ｋ，Ａｚｕｍａ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．１ｔ７．Ｈｌ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｎ　ｎｏｎ—ｓｒｎａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｔｍｕｏｒ－ｉｉｆｎｌｔｒａｔｉｎｇ　ｌｙｍｐｈｏ－　ｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ＰＤ一１　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００４，１０（１５）：　５０９４．　（收稿日期：２００９—０８—２０ｌ