类风湿关节炎患者3项联合检测分析
2022-11-17
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检验医学与临床2011年11月第8卷第21期 Lab Med Clin,November 2011,Vo1.8,No.2l ・论 著・ 类风湿关节炎患者3项联合检测分析 石青峰,马 韵△,杨 峻,何永玲(广西壮族自治区桂林医学院附属医院检验科 541001) 【摘要】 目的 分析类风湿关节炎(RA)患者类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)、抗核抗体 (ANA)检测结果,探讨这些指标在RA诊断中的临床应用价值。方法 RF检测采用胶乳凝集法,抗CCP抗体检测 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、ANA检测采用间接免疫荧光法。结果 128例RA患者中,RF阳性率75 ,抗 CCP抗体阳性率72.7 ,ANA阳性率达79.7 。联合检测RF、抗CCP抗体、ANA 3项指标可将RA诊断的敏感 性提高到95.3%。抗CCP抗体检测结果与RF检测结果呈正相关。RA患者中ANA≥l:320阳性时的荧光模式 主要是核均质型。结论 对RA患者进行RF、抗CCP抗体、ANA联合检测,可以明显提高RA诊断的灵敏度,并 且能提示患者血清中存在的自身抗体,从而为RA的诊断和疗效观察提供重要的参考指标。 【关键词】类风湿关节炎; 类风湿因子; 抗环瓜氨酸肽抗体; 抗核抗体 DoI:10.3969/J.issn.1672-9455.2011.21.01l 文献标志码:A 文章编号:l672-9455(2011)21-2581-02 Analysis of three indicators on detection in patients with rheumatoid arthritis SHI Qing.feng,MA Yun ,YANG J un,HE Yong ling(Department of Clinical Laboratory,Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Guangxi 541001,China) [Abstract]Objective To explore the clinical significance of anti—cyclic citrullinated peptide(CCP)antibody, rheumatoid factor(RF)and ANA in diagnosis of rheumatoid arthritis(RA).Methods RF was measured by 1atex ag— gregation method.Anti—CCP antibody was measured by EI ISA.ANA was measured by indirect immunofluorescence. Results Among the 128 samples,positive rate of RF,anti—CCP and ANA was 75 ,72.7 and 79.7 ,respective一 1 v.The sensitivity rate was 95.3 with the combined detection of RF,anti—CCP and ANA.Anti CCP showed a sig nificant positive correlation with RF.Among the samples of positive ANA with high titer(≥1:320),ANA patterns were mainly Homogeneous—Nucleolar.Conclusion The combined determination of RF,anti—CCP and ANA can not only significantly improve the sensitivity of diagnosis RA,but also can discover the multiple antibodies.It can provide important information for diagnosis and treatment of RA. [Key words] rheumatoid arthritis; rheumatoid factor; anti—CCP antibody; ANA 类风湿关节炎(RA)是常见的慢性、系统性自身免疫性疾 标准品的相对单位数和其吸光度为横、纵坐标作标准曲线,据此 病。对RA的诊断主要以临床表现、X线片检查及类风湿因子 求出血清中抗CCP抗体的浓度,结果以抗 CCP抗体大于或等于 (RF)检测及1987年美国风湿病协会修订的分类诊断标准为 5 U/mI 为阳性,抗CCP抗体小于5 U/mI 为阴性。 依据lll,而RF检测的敏感性及特异性均较差。2000年国外首 1.2.2 RF检测 采用胶乳凝集法检测RF,使用上海捷门生 次报道用酶联免疫吸附试验(E1 IsA)检测抗环瓜氨酸肽抗体 物技术合作公司生产的RF试剂盒检测,严格按试剂盒说明书 (抗CCP抗体),对RA的诊断具有很高的特异性和敏感 操作。以出现乳胶颗粒凝集判为阳性。 性 。]。RA作为自身免疫性疾病,患者体内可能存在多种自 1.2.3 ANA检测 采用间接免疫荧光法检测ANA,使用德 身抗体,而这些自身性抗体也成为自身免疫诊断的重要依 国欧蒙公司生产的ANA试剂盒,严格按试剂盒说明书操作。 据 ]。这些自身性抗体种类比较多,最常见的如抗核抗体 将患者血清以l:i00、1:320、1:1 000稀释后滴加于包被有 (ANA)、RF等。本文通过对128例RA患者的ANA、RF、抗 人喉癌上皮细胞的膜条上。血清中的特异性抗体与固相上细 CCP抗体等结果进行综合分析,以探讨这些指标在RA患者诊 胞中的抗原结合,再滴加荧光素标记的抗人抗体,与已经结合 断中的临床应用价值。 的抗体反应,若血清中有特异性的抗体,呈现特异性的荧光。 1资料与方法 使用欧蒙EUROStar1I型荧光显微镜观察,记录荧光强度与荧 1.1 一般资料RA患者128例,为2010年3月至2011年3 光模式。血清稀释度大于或等于1:i00出现特异性荧光为 月在本院住院的RA患者,其中男4O例,女88例,年龄9~8O ANA弱阳性,血清稀释度大于或等于1:320出现特异性荧光 岁,平均45.6岁。均符合l987年美国风湿病学会RA的诊断 为ANA阳性。 标准。 1.3统计学方法采用SPSS13.0软件进行统计分析。计数 1.2检测方法抽取RA患者清晨空腹静脉血,分离血清,2 资料比较采用Y。检验,P%0.05为差异有统计学意义。两变 ~8℃保存,1周内检测完抗CCP抗体、RF因子、ANA。 量间的相关性分析采用Kendall S Taub相关分析。计量资料 1.2.1抗CCP抗体检测采用EI 1SA检测抗CCP抗体,使用 采用中位数表示,两组均数比较采用Wilcoxm检验。 德国欧蒙公司生产的抗CCP抗体试剂盒,严格按试剂盒说明书 2结 果 操作。血清做l:101稀释,450 nm比色,分别以试剂盒内5个 2.1 RA患者的基本指标 】28例RA患者中男4O例 通讯作者,E mail:yunandama@hotmail.corn。 检验医学与临床2011年11月第8卷第21期 I ab Med Clin,November 2011,Vo1.8,No.21 (31.2 ),女88例(68.8 )。RF阳性96例(75.0 );抗CCP 抗体阳性93例(72.7%);ANA≥1:100阳性102例 (79.7 ),ANA≥1:320阳性32例(25.0 )。 2.2 ANA的荧光模式分布情况 ANA阳性标本的荧光模式 有多种,不同的荧光模式可单独出现,也有两种甚至3种荧光 模式同时出现的情况,具体的荧光模式出现情况见表1。 表1 128例RA患者ANA阳性荧光模式分布情况[ ( )] 2.3 RA患者血清中RF、抗CCP抗体、ANA的关系RA患 性率相比差异无统计学意义。抗CCP抗体检测结果与RF检 测结果呈正相关性,相关系数为0.496,而与ANA检测结果无 相关性。RF阳性率与ANA阳性率相比差异无统计学意义, RF与ANA检测结果无相关性。采用McNrmar.)( 检验,x 一 0.803,P 0.456;采用Kendall S Taub相关分析,cO一0.067, P一0.448 者血清中RF、抗CCP抗体、ANA的关系见表2、3。采用Me Nrmar Y 检验两种指标阳性率之间差异,P<0.05判断为差 异有统计学意义,用Kendall S Taub相关分析两种实验结果间 的关系,P(0.05判断为二者之间呈显著相关。由表2、3可 见,在RA患者中,抗CCP抗体阳性率与RA阳性率、ANA阳 表2 RA患者抗CCP抗体与RF、ANA检测结果的比较 表3 RA患者RF与ANA检测结果的比较 本文对RA患者的RF、抗CCP抗体、ANA进行了综合分析。 本组资料显示,128例RA患者中,RF阳性率75.0 ,抗 CCP抗体阳性率72.7 ,与其他文献报道相近 。]。RA患者 自身抗体出现率也较高,ANA滴度大于或等于1:100阳性率 达79.7 。 采用间接免疫荧光法检测ANA,不仅可以检测ANA的 阳性滴度,同时能观察ANA阳性的荧光模式。间接免疫荧光 法测定ANA是对总的ANA筛查,阳性率较高但特异性不强。 2.4 RA患者联合检测RF、抗CCP抗体及ANA的诊断价值 单项检测RF敏感96例(75.0 ),单项检测抗CCP敏感93 例(72.7 ),单项检测ANA敏感102例(79.7 ),联合检测 RF和抗CCP抗体敏感107例(83.6%),联合检测RF、抗CCP ANA靶抗原分布由传统的细胞核抗原扩展到现在的整个细 胞,包括细胞核、细胞骨架、胞浆、细胞分裂周期相关蛋白等, ANA可与不同来源的细胞核起反应,无器官特异性和种属特 异性¨l 。本研究表明,RA患者中出现ANA滴度大于或等于 1:100的弱阳性荧光的比例较高,达79.7 ,出现ANA滴度 大于或等于1:320的强阳性荧光的比例为25.0 。在RA患 者的ANA阳性标本中,可出现单独一种荧光模式,也有两种、 甚至3种荧光模式同时出现的情况。ANA滴度大于或等于 1:100阳性的RA患者中,各类荧光模式阳性率从高到低依次 为胞浆颗粒型(43.0 )、核颗粒型(27.5 )、核均质型 (24.8 )、核仁型(4.0 )及着丝点型(0.7 )。而在ANA滴 度大于或等于1:320的RA患者中,各类荧光模式阳性率从高 抗体和ANA敏感122例(95.3 )。 3讨 论 RA是临床常见的一种致畸性自身免疫性疾病,其特征性 的临床表现为多个受累的周围性关节疼痛、肿胀、功能下降,病 变呈持续、反复发作的过程。目前RF检测结合临床表现是诊 断RA的最常用方法。RF指针对免疫球蛋白IgG Fc段的自 身抗体,常和IgG形成免疫复合物,RF除了在RA中出现阳性 外,在系统性红斑狼疮、原发性干燥综合征等其他自身免疫性 疾病也可出现,甚至少数健康人也可出现,因而并不具备诊断 的特异性l_5]。近年来国内外大量研究证明,抗聚丝蛋白抗体、 抗核周因子和抗角质蛋白抗体对RA诊断具有较高的敏感性 到低依次为核均质型(46.8 )、胞浆颗粒型(29.8 )、核颗粒型 (21.3 )、核仁型(2.1 )。胞浆颗粒型ANA阳性荧光表明主 要是针对胞浆成分出现的ANA,而核颗粒型、核均质型、核仁型 ANA阳性荧光主要是针对细胞核成分出现的ANA,可以推测 RA患者血清中总的ANA对细胞核成分的比例比针对胞浆成 和特异性_6]。这些抗体识别的靶抗原是人类表皮细胞胞浆内 的聚丝蛋白(Filaggrin)。之后的研究发现,瓜氨酸是这些抗体 识别Filaggrin表位的主要组成成分。根据该主要表位合成的 CCP抗体枪测已应用于临床诊断。文献[7 9]报道抗CCP抗 体与RF相比,具有高度的特异性和较好的敏感性,可用于RA 的 期诊断。RA患者还可出现针对其他自身成分的自身抗 体,为了解RA患者体内自身抗体与RF、抗CCP抗体的关系, 分的比例高,特别是当ANA结果为强阳性时。 本资料表明,在RA患者中,抗CCP抗体阳性率与RA阳 性率、ANA阳性率相比差异无统计学意义。抗CCP抗体检测 结果与RF检测结果呈正相关,相关系数为0.496,而与ANA 检测结果无相关性。RF阳性率与ANA阳(下转第2584页) 检验医学与临床2011年11月第8卷第21期 I ab Med Clin,Novembe 无生育要求的输卵管脓肿患者行输卵管切除术,其余病例行脓 肿切开引流术,并用大量生理盐水冲洗盆腔,然后行盆腔粘连 松解术,术中l2例取脓液培养,指导用药,术后平均2 d体温 恢复正常,术后无一例盆腔残留脓肿等并发症。 3讨 论 , Dl: ! !: 炎最直观、最精确的方法,在诊断的同时行脓肿切开引流或切 除术,并予大量生理盐水灌洗,放置甲硝唑,能破坏腹腔厌氧环 境,增加药物与炎症部位的接触时间和面积,有效控制感染,术 后留置腹腔引流也有利于脓液引流及炎症消退,且细菌培养和 药敏试验结果可合理有效地选用抗生素。本组资料中有8例 盆腔脓肿在药物保守治疗数周疗效欠佳后才行手术,术中可见 盆腔粘连、包裹致密而增加手术难度。妇科急腹症往往起病 近年来,腹腔镜诊断治疗异位妊娠的价值已得到广泛认 可,随着腹腔镜技术水平的不断提高,腹腔镜越来越广泛用于 妇科急腹症,拓宽了手术适应证,国内已有腹腔镜手术治疗宫 急、发展快,必须紧急处理,但有时诊断和鉴别诊断较困难,腹 腔镜探查术则可早期明确诊断,并同时进行手术治疗。随着手 角妊娠、异位妊娠破裂失血性休克的成功报道。急腹症腹腔 镜手术的实施和成功率已成为衡量腹腔镜手术水平的指标之 一术医生腹腔镜技术熟练程度不断提高和设备的改进,在有充分 备血并有转开腹手术的条件下随着手术医生腹腔镜技术水平 的不断提高和设备的改进,妇科急腹症实施腹腔镜手术快速、 ,腹腔镜对异位妊娠的诊断治疗价值已得到广泛公认 ],且 随着腹腔镜技术的不断提高,腹腔镜越来越广泛地应用于妇科 急腹症,如宫角妊娠、异位妊娠破裂失血性休克,国内已有许多 腹腔镜手术成功的报道[。 ]。对于异位妊娠失血性休克的患 者,在血源充足的情况下,采取快速全身麻醉,快速进腹,并采 用1 cm直径大号吸管,快速吸净盆腔积血,暴露病变部位,迅 速止血,切除病变部位。对于有生育要求的异位妊娠患者,采 取输卵管切开取胚,局部注射MTx,保守性手术成功率为 92.8%。但对保守性手术成功的患者,其输卵管的通畅性及对 再生育的影响还有待于进一步跟踪随访。对于宫角妊娠,因术 安全且有效,可作为一种常规手术加以推广。 参考文献 E1]王欣彦,张忠福.特殊部位异位妊娠88例临床分析[J]. 中华妇产科杂志,2001,36(9):563—564. E2]钱海虹,程忠平.妇科急症腹腔镜手术360例临床分析 LJ].腹腔镜外科杂志,2008,13(5):440 441. E3]刘衍华.妇科急症腹腔镜手术126例临床分析[J].中国 现代医生,2010,48(20):116,121. 中出血多,手术难度大,一般采取传统开腹手术,行部分子宫切 除术或次全子宫切除术,则尝试采取腹腔镜手术,术中为了减 少出血量,先行患侧子宫动脉上行支、卵巢子宫动脉交通支阻 [4]李燕.妇科急症腹腔镜手术46例临床分析[J].吉林医 学,2010,31(18):2788. 断,再行宫角切开取胚,局部注射MTX,本组4例宫角妊娠采 取此种手术方式均获成功。开展此种手术方式,手术前必须充 分备血,且具备转开腹手术的条件,并且手术医生应有熟练的 腹腔镜手术操作技术。急性盆腔炎并发盆腔脓肿以往是腹部 E5]洪瑾,郭欢,朱艺,等.腹腔镜联合甲氨蝶呤保守性治疗输 卵管妊娠286例[J].中国微创外科杂志,2009,9(2):185一 ]86. 手术的禁忌证,被认为可使炎症扩散以及伤口愈合不良,但近 年来已成为腹腔镜手术的适应证。腹腔镜是诊断急、慢性盆腔 (上接第2582页) (收稿FI期:201I-06 I6) body in patients with recent onset rheumatoid arthritis 性率相比差异无统计学意义,RF检测结果与ANA检测结果 fJ].Arthritis Rheum,2000,43(8):1831-1835. 无相关性。联合检测RF和抗CCP抗体,RA诊断的敏感性提 高至83.6 ,联合检测RF、抗CCP抗体、ANA 3项指标,RA [4]许羚雁,黄宪章,庄俊华.类风湿性关节炎的免疫学检测 方法进展I-J].国际检验医学杂志,2008,29(1):5l一53. [5]崔琢,李季青.抗CCP抗体检测在类风湿性关节炎诊断 中的价值[J].实用医学杂志,2010,26(3):482 483. [6]赵金霞,果占国.风湿免疫性疾病相关抗原的研究进展 诊断的敏感性提高到95.3 。因此从提高诊断效率方面考 虑,本文认为采用RF、抗CCP抗体、ANA 3项指标联合检测 RA效果最好。 综上所述,对RA患者进行RF、抗CCP抗体、ANA联合 检测,不仅可以明显提高RA诊断的灵敏度,并且能明确提示 患者血清中存在自身抗体,从而为RA的诊断和疗效观察提供 晕要的参考指标,为最终达到有效控制病情发展,改善患者生 活质量的目的。 参考文献 [J].中华检验医学杂志,2006,29(8):757—760. [7]周彬,朱静,刘建,等.抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风湿关 节炎中的诊断及预后意义探讨[J].中华风湿病杂志, 2004,8(6):360—362. [8]富炳罡.抗CCP抗体和RF联合检测对类风湿关节炎诊 断的价值[J].中国实验诊断学,2010,14(6):910 911. [9]胡学芳,魏华,朱爱萍,等.抗环瓜氨酸肽抗体检测在类风 湿关节炎诊断中的临床意义[J].中华检验医学杂志, 2003,26(8):484—487. [10]易明忠,张济,余萍.抗CCP抗体、抗sa抗体、RF检测对 类风湿性关节炎的诊断价值FJ].实用预防医学,2009,16 (4):12l2—1214. [11]陆晓东,成海龙,潘红宁,等.系统性红斑狼疮和类风湿性 关节炎患者ANA、ENA多肽谱及抗ds—DNA抗体联合 检测的意义[If].L【l东医药,2009,49(20):80—81. (收稿日期:2o11—06—11)