Glypican-3蛋白在人乳腺癌中的表达及临床意义

维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年５月第４５卷第３期　・论著・　Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３蛋自在人乳腺癌中的表达及临床意义　杨莉涛陈启明黄耀　（深圳市第四人民医院普外科，深圳５１８０３３）　［摘要】目的检测乳腺癌患者Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达及其与临床、病理关系，探讨Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３乳腺癌临床、病理的关系，评价　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３在乳腺癌发生发展中的作用。方法采用ＲＴ－ＰＣＲ检测５２例乳腺癌组织及相应癌旁正常组织中Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　ｍＲＮＡ的表达水平。结果（１）Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３ｍＲＮＡ在全部正常组织中表达，而在乳腺癌组织中存在较高的表达缺失率（６７．３％）　（Ｐ＜０．０５）；（２）淋巴结转移阳性者癌组织中Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　ｍＲＮＡ表达缺失率（８９．５％）明显高于淋巴结转移阴性者（４｜０．０％）（Ｐ＜０．　０５）；（３）Ｃｌｙｐｉｃａｎ一３　ｍＲＮＡ表达缺失率与乳腺癌分期有关，越晚病例Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达缺失率越高（Ｐ＜ｏ．０５）；（４）Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３　ｍＲＮＡ表达缺失与肿瘤组织学类型、肿瘤分化程度未见显著相关（Ｐ＞０．０５）。结论Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３转录表达缺失可能参与调控乳　腺癌的发生、发展过程，并进而影响其生物学特点及预后。　［关键词】乳腺癌；Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　【中图分类号】Ｒ７３７．９；Ｑ７５４　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７３—９７ｏ１（２ｏｏ７）０３—０５－ｏ３　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３是一种膜性（ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ）硫酸乙酰肝素糖蛋白　（ｈｅｐａｒａｎ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ，ＨＳＰＧ），其结构特殊，影响多种生物　效应分子，对组织、器官的发生、发展起关键的调节作用。自１９９５　年被人们发现以来，Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３一直倍受研究者们的关注，发现　其与肺癌、卵巢癌、肝癌等多种肿瘤的发生、发展及预后关系密　切【Ｊ．２１。有关其在人乳腺癌组织标本中的转录表达以及与临床、病　理关系的研究报道甚少，为此我们就５２例乳腺癌与远癌正常组　４℃，７　２００ｇ离心５ｍｉｎ，弃上清真空干燥后，沉淀溶解于２０　Ｌ　无ＲＮａｓｅ的水中，样品保存于一２０￣Ｃ备用。ＲＮＡ样品用紫外分　光光度仪测定Ａ２６０和Ａ２８０，计算含量。　１．４．２引物的设计与合成Ｇｌｙｐｉｅａｎ一３引物设计参照文献１３１，由上海　生物工程公司合成。　（１）Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３（ＧｅｎＢａｎｋ　ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　ｎｕｍｂｅ￣ＮＭ＿００４４８４）：扩增　产物为２０２ｂｐ。ｓｅｎｓｅ　ｐｒｉｍｅｒ．５’一Ａ　ｒＡＣＣＡＡＣ　ｒＡＡＣＡＧＣＡＣＧＡ１Ｔｒ　－织中Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达情况进行了观察研究。－　３’；ａｎｔｉｓｅｎｓｅ　ｐｒｉｍｅｒ．５’一ＴＩ＇ＣＡＣＣＣＡＣＡＡＡＣ　ｒＣＡＡＡＡ一３’。　（２）ｐ—ａｃｔｉｎ（ａｃｃｅｓｓｉｏｎ　ｎｕｍｂｅｒ．ＢＣ００４２５１）：扩增产物为２７５ｈｐ。　１材料与方法　１．１一般资料　２００２年２月２５日一２００５年１月１２日在我院普外科住院　手术的乳腺癌患者５２例，均为女性；年龄３１—７０岁，中位年龄　４６．５岁；所有病例术前均未经任何抗癌药物治疗及放疗或化疗，　术后均经病理组织学证实。　１．２标本收集　ｓｅｎｓｅ　ｐｒｉｍｅｒ．５　－ＡＣＣＡＣＡＧＣＴＧＡＧＡＧＧＧＡＡＡＴＣ－３　：ａｎ　ｓｅｎｓｅ　ｐｒｉｍｅｒ：５　一ＡＧＧＴＣＴｎ’ＧＣＣＧＡＴＣＴＣＣＡ一３　。　１．４．３　ＲＴ～ＰＣＲ过程ＲＴ－ＰＣＲ反应体系：按ＱＩＡＧＥＮ　ｏｎｅｓｔｅｐ　ＲＴ－ＰＣＲＫｉｔ说明，并稍加改进。总ＲＮＡ　１　Ｌ，加入５×ＱＩＡＧＥＮ　ｏｎｅｓｔｅｐ　ＲＴ－ＰＣＲ　ｂｕｆｆｅｒ　５．０　Ｌ，ｄＮＴＰ　Ｍｉｘ　１．０　Ｌ，５×ＱＩＡＧＥＮ　ｏｎｅｓｔｅｐＲＴ－ＰＣＲＥｎｚｙｍｅＭｉｘ　１．０　Ｌ，ＲＮａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ０．５　Ｌ，目的　基因（Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３）和内参照（ｐ—ａｃｆｉｎ）上下游引物各２．５　Ｌ，　ＤＥＰＣ处理水６，５　Ｌ，总体积２５　Ｌ，稍离心后混匀，于ＰＥ９６００型　标本均于手术切除３０ｍｉｎ内切取肿瘤中心及远癌旁组织处　１．Ｏｃｍ×１．０ｃｍ×１．０ｅｍ组织各一块，立即放入液氮中速冻ｌＯｍｉｎ　ＰＣＲ仪上进行ＰＣＲ。Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３反应参数分别为：９５＇Ｅ　４．５ｍｉｎ，９４ｏＣ　ｌｍｉｎ，５６ｏＣ　ｌｍｉｎ，７２℃ｌｍｉｎ共３０　ｃｙｃｌｅｓ，７２￣Ｃ延伸　１０ｒａｉｎ；９５ｏＣ　４．５ｍｉｎ，９４ｏＣ　ｌｍｉｎ，５５℃ｌｍｉｎ，７２℃ｌｍｉｎ共３０　ｃｙｃｌｅｓ。　后置于一７５￣Ｃ冰箱保存备用；剩余的标本予４０％福尔马林固定　后送我院病理科行病理组织学检查。　１．３主要试剂及仪器　７２￣Ｃ延伸１０ｍｉｎ。ＰＣＲ产物用２％琼脂糖凝胶电泳分离检测。　１．５统计学分析　数据采用统计学软件ＳＰＳＳ１　１．５的ｘ　检验进行统计学分析。　２结果　２．１乳腺肿瘤组织总ＲＮＡ测定　ＱＩＡＧＥＮ　ｏｎｅｓｔｅｐ　ＲＴ－ＰＣＲ试剂盒（德国ＱＩＡＧＥＮ公司）；　ＤＥＰＣ（上海华舜生物＿Ｔ程有限公司）。主要仪器有：９６００型ＰＣＲ　仪（美国ＰＥ公司）。　１．４　ＲＴ—ＰＣＲ检测Ｇ１ＹＰｉｃａｎ－３方法　１．４．１总ＲＮＡ的提取按Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒说明。取一７０￣Ｃ保存的新鲜　肿瘤组织及远癌旁正常乳腺组织各１００ｍｇ置于匀浆器中，加入　ｌｍＬ　Ｔｒｉｚｏｌ试剂。研磨３～５ｒａｉｎ，上清吸至１．５　ｍＬ经ＤＥＰＣ水处　理过的ＥＰ管中，置室温５ｍｉｎ，加氯仿０．２　ｍＬ，振摇５０ｓ。置室温　５ｒａｉｎ，分层，４￣Ｃ，１２０００ｇ离心１５ｒａｉｎ。仔细取上层水相，移至另　一样品经紫外分光光度计测定Ａ２６０和Ａ２８０，鉴定ＲＮＡ的纯　度及计算其含量。ＲＮＡ经紫外分光光度计测定，２６０ｎｍ和２８０ｎｍ　吸光度的比值均为１．８～２．０；同时甲醛变性凝胶电泳鉴定ＲＮＡ　质量，提取出的ＲＮＡ经琼脂糖凝胶电泳显示５ｓ、１８ｓ、２８ｓ三条　ＥＰ管中，加０．５　ｍＬ异丙醇，混匀。置室温ｌＯｍｉｎ，４￣Ｃ，１２　ＲＮＡ电泳带，后者荧光强度最高，无其他杂带，说明ＲＮＡ完整，　无降解，无ＤＮＡ污染（见图１　ｏ凝胶在ＵＶＰ凝胶成像分析系统　Ｏ００ｇ离心ｌＯｍｉｎ，用ＤＥＰＣ处理的７５％乙醇洗涤沉淀（ＲＮＡ），　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＤＯＣＴＯＲ中田现代医生５　维普资讯 http://www.cqvip.com ・论　著・　—～一　…　～　一一…一　一一一２００７年５月第４５卷第３期　２．４　Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３表达与乳腺墙病理组织学类型及分化程嚏的关系　肿瘤分化程度越差，Ｇ１），ｐｉｃａｎ一３表达缺失率越高，但无统计　学差异。Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３　ｍＲＮＡ表达缺失与肿瘤组织学类型、肿瘤分　化程度未见显著相关（Ｐ＞０．０５）（见表２）。　３讨论　中扫描，分析电泳带灰度，计算特异性Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３扩增带灰度与　Ｂ—ａｃｔｉｎ扩增带灰度之比值，即表示Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　ｍＲＮＡ表达量。　２．２　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　ｍＲＮＡ在乳腺癌及相应癌旁组织中的表达　经ＲＴ—ＰＣＲ扩增后Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３基因扩增产物为２０２ｂｐ，　１３一ａｃｔｉｎ基因扩增产物为２７５ｂｐ，均与理论值相符。Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３基　因在正常组织中均表达，而在乳腺癌组织中存在较高的表达缺失　率（６７．３％），两者比较差异有统计学意义（Ｐ（０．Ｏ５）（见图２）。　图ｌ总ＲＮＡ的电泳图■　电泳图中可见５ｓ、ｌ８ｓ、２８ｓ三条ＲＮＡ电泳带　１∞曲Ｐ　５０ＵｂＰ　—ａｃ曲２７５ｂｐ　￣ｉｃａｎ・３　２０２ｂｐ　ｌ００ｂｐ　Ｍ：ＤＮＡＭａｋｅｒ　Ａ、Ｂ、Ｃ：正常乳腺组织　Ｄ…Ｅ　Ｆ　Ｇ、Ｈ、Ｉ：乳腺癌组织　图２　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３在乳腺癌组织及远癌正常组织中表达的凝胶电泳图像　２．３　Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３表达与乳腺癌病理分期的关系　从研究结果可看出，Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达缺失率与ＴＮＭ分期相　关，Ⅲ期乳腺癌组织中其表达缺失显著高于Ｉ期或Ⅱ期（Ｐ（０．０５），　其中与淋巴结是否转移之间的关系更为显著（Ｐ（０、００１）（见表１）。　表１　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达与乳腺癌病理分期的关系　表２　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达与乳腺癌病理组织学类型及分化程度的关系　６中国现代医生ＣＨＩＮＡ　Ｍ０ＤＥＲＮ　ＤＯＣＴＯＲ　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３基因自１９９６年被Ｐｉｌｉａ等　报道以来，就一直倍　受研究者的关注。目前认为Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３作为～种膜性间质蛋白，　其表达方式与生长因子　日成纤维细胞生长因子，ＦＧＦ等）及其受　体表达方式一致，能通过一系列细胞表面受体传导的信号来调　节细胞形态和各种细胞行为（如：黏附、增殖、迁移、存活和分化）。　Ｇｌｙｐｉｃａｎ参与调节细胞增殖、分化、黏附和迁移等，还可能涉及到　抑制或调节大部分中胚层组织和器官的生长。Ｐｉｌｉａ等用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测发现Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３高度表达于发育中的小肠和中胚层　来源组织中，在绝大多数成人正常组织如肝、心、脑、脾、胃、小肠、　大肠、睾丸、膀胱、肾及胰腺中均不表达。据研究，胚胎期　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达于发育中的小肠和中胚层来源组织中，在成人除　在胎盘、卵巢、乳腺、间皮、肺及肾组织也有表达１５１。Ｐｉｌｉａ、Ｘｕ等　报道Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３可特异性结合胰岛素样生长因子ＩＩ（ＩＧＦ—ＩＩ），在　其介导的信号传递中发挥作用。　本实验研究Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３在乳腺及乳腺癌中的表达情况，发　现正常乳腺组织中均有Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达，而乳腺癌中其表达　缺失率较高，两者比较差异有统计学意义（Ｐ以ｏ５）。研究表明，　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３在间皮瘤、卵巢癌细胞系和肺癌中由于其启动子的过　甲基化而表达沉默，与这些肿瘤的发生、发展有密切关系。Ｌｉｎ等　研究了ｌ３种卵巢癌细胞系，结果没有发现Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３突变，但它　的表达在所研究的３１％　１３）卵巢癌细胞中缺失。其中表达缺失　的１例用８ｏｕｔｈｅＦｎ分析法证实Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３启动子为过甲基化，通　过５，一氮一２，一脱氧胞苷制剂的去甲基化治疗作用，上述卵巢癌　细胞Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达得以恢复，并用集落形成测定法确定变　异的Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达阻止了卵巢癌细胞系的生长。我们认为　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３表达在乳腺癌中沉默，至少部分应归于Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３启　动子的过甲基化。　病理分期中，Ⅱ期与Ⅲ期相比，其表达缺失的差异无显著意　义，但Ⅲ期与Ｉ期或Ⅱ期与Ｉ期病例相比，差异均有显著性，说明　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达缺失在越晚期病例中越为显著。而且　Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３的表达差异与淋巴结是否转移之间的关系更为显著　（Ｐ（０、００１），这一结果说明该基因的表达缺失可能与淋巴结转移　相关，通过淋巴结转移进而影响预后，但这有待今后进一步研究　证实。Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３启动子区ＣｐＧ岛的高甲基化影响乳腺癌患者　术后生存期，也支持了这种推测的可能性。　本研究发现，Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３基因在乳腺癌组织中存在较高的表达　缺失，这充分说明该基因在乳腺癌的发生和发展中的重要作用，进　一步研究将其完善成为检测乳腺癌的新型肿瘤标志物。　［参考文献】　［１】Ｋｉｍ　Ｈ，Ｘｕ　Ｇ，Ｂｏｗｚｕｋ　ＡＣ，ｅｔ　ａｌ、Ｔｈｅ　ｈｅｐａｒａｎ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ　ＧＰＣ３　ｉｓ　ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｌｕｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ田、Ａｍ　Ｊ　Ｒｅｓｐｉｒ　Ｃｅｌｌ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，２００３，２９（６）：　６９４—７０１、　（下转第２９页）　维普资讯 http://www.cqvip.com ２００７年５月第４５卷第３期　・临床研究・　３８例亚急性甲状腺炎诊治体会　曾小川　（湖北省荆门市第一人民医院普外Ⅲ科，湖北荆门４４８０００）　［摘要］目的探讨亚急性甲状腺炎的诊断及治疗。方法对３８例亚急性甲状腺炎的临床资料进行回顾性分析。结果３８例中　７例误诊而行不必要手术。结论亚急性甲状腺炎的临床表现多样化，多普勒血流探测仪及穿刺细胞学诊断率高，特异性强。　［关键词］甲状腺炎；亚急性；误诊；手术　【中图分类号】８７３９．６３　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７３—９７０１（２００７）０３—０３—０３　治疗，根据病隋及检查结果部分患者加服优甲乐；９例行手术治疗。　亚急性甲状腺炎的发病率呈逐年上升趋势，其发病率占所　有甲状腺疾病的０．５％～２．０％，其病程的不同阶段的临床表现和　各项辅助检查结果各不相同，因此易造成误诊、误治ｎ１。现将我院　收治的３８例亚急性甲状腺炎诊治情况报告如下：　２　结果　３０例患者药物治疗后，甲状腺明显缩小，疼痛减轻并消失：９　例手术治疗患者，其中２例合并甲状腺癌而行根治术，其余７例　南于诊断错误而行不必要手术。　３讨论　亚急性甲状腺炎好发于女性，发病率为男性的３～４倍。病因　尚不明确，一般认为与病毒感染有关，最常见的临床表现为颈前区　疼痛，伴甲状腺触痛，甲状腺肿大及不同程度的发热等表现。大多　数以局部症状为主，也有全身症状严重而局部症状不明显，甚至有　无痛性或静止『生甲状腺炎。因病程不同，甲状腺滤泡的破坏及甲状　腺胶质的耗竭，临床上可有甲状腺功能亢进、正常或减低表现。分　析各项辅助检查对诊断本病的作用表明，血清Ｔ１、Ｔ　、ＴＳＨ水平也　可协助诊断，判断疾病所处时期；血沉对诊断亚急性甲状腺炎缺乏　特异性；多普勒及穿刺细胞学诊断率高，特异性强１２１：　亚急性甲状腺炎的治疗以药物治疗为主，均可取得良好效　果。但以下情况应行手术治疗：（１）合并甲状腺其他病变，如甲状　腺癌、结节性甲状腺肿等。（２）本病急性期后形成的慢性局灶性　病变。（３）诊断困难的病例应手术探查，并根据术中冰冻切片结　果决定手术方式：　［参考文献］　ｆ１］盖宝东，石卫东．３７２例亚急性甲状腺炎辅助检查结＿果分析ＩＪＪ．中同实　用外科杂志，２００３，２３（３）：１４６—１４７．　ｆ２】陈国锐，王深明．甲状腺外科［Ｍ］．北京人民卫生出｝叛社，２００５：５９．　（收稿日期：２００７．０３．２７）　１资料与方法　１．１一般资料　本组３８例中，男性６例，女性３２例，男女之比１：５．３３；年龄　１２～６７岁，平均３９．５岁，所有病例均根据临床表现、实验室检　查、穿刺细胞学和病理检查确诊。　１．２病史特点　有明确上呼吸道感染病史２】例，以颈前区包块就诊３】例，　颈前区疼痛就诊３５例，均表现程度不同的颈前区肿胀疼痛，部　分病例疼痛后向对侧转移，并向耳部、下颌等放射，初诊为中耳　炎４例，发热者１７例：　１．３临床特征　均有不同程度的甲状腺肿大，可触及包块３４例，其中质硬　１２例，质韧１９例，质软３例，触痛明显２２例：　１．４实验室检查　血沉检查２８例中，２３例有不同程度加快；甲状腺功能柃查　表现多样，可略有亢进或减低，以前者多见：促甲状腺激素刺激　激素（ＴＳＨ）检查３４例中，ｌ５例降低，３例增高，其余正常。　１．５辅助检查　甲状腺多普勒检查２２例，１８例首次检查诊断为本病，阳性率　８１．１％；细针穿刺细胞学检查１６例中１４例阳性，阳性率８７．５％：　１．６治疗方法　２１例患者行激素加甲状腺素治疗；８例患者口服肠溶阿司瞳林　（上接第６页）　ｆ２】Ｓｕｎｇ　ＹＫ，Ｈｗａｎｇ　ＳＹ，Ｐａｒｋ　ＭＫ，ｅｔ　ａ１．Ｇｌｙｐｉｃａｎ一３　ｉｓ　ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ　ａｎｄ　ｔｅｍｐｏｍｓｐａｔｉｌ　ｄｉａｓｔｉｒｂｕｔｉｏｎ［Ｊ】．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１　９９７，５７（２２）：　５】７９口５】８４．　ｈｕｍａｎ　ｈｅｐａｔｅｗｅｌｌｕｌｒ　ａｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｓｅｔ，２００３，９４（３）：２５９－２６２．　［３】Ｈｕｂｅｒ　Ｒ，Ｍａｚｚａｒｅｌｌａ　Ｒ、Ｃｈｅｎ　ＣＮ，ｅｔ　ａ１．Ｇｌｙｐｉｃａｎ　３　ａｎｄ　ｇｌｙｐｉｃａｎ　４　ａｒｅ　［６］Ｘｕ　Ｙ，Ｐａｐａｇｅｏｒｇｉｏｕ　Ａ，Ｐｏｌｙｃｈｒｏｎａｋｏｓ　Ｃ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｏｒｍ　ｏｆ　ｉｎｓｕｌｉｎ——ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ——ＩＩ／ｍａｎｎｏ￣６－ｐｈｏｓｐｈａｔｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｊｕｘｔａｐｏｓｅｄ　ｉｎ　Ｘｑ２６［Ｊ１．１．Ｇｅｎｅ，１９９８，２２５（１－２）：９—１６．　［４］Ｐｉｌｉａ　Ｇ，Ｈｕｇｈｅｓ—Ｂｅｎｚｉｅ　ＲＭ，ＭａｃＫｅｎｚｉｅ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ＧＰＣ３，ａ　ｇｌｙｐｉｃａｎ　ｇｅｎｅ，ｃａｕｓｅ　ｔｈｅ　Ｓｉｍｐｓｏｎ［］Ｇｏｌａｂｉ［］Ｂｅｈｍｅｌ　ｏｖｅｒｇｒｏｗｔｈ　ｓｙｎｄｒｏｍｅ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｍｍ　ｎｄ　ａａｍｎｉｏｔｉｃ　ｆｌｕｉｄ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｅｎｄ￣ｒｉｎｏｌ　Ｍｅｔａｈ，１９９８，８３（２）：　４３７口４４２．　ＩＪ１．Ｎａｔ　Ｇｅｎｅｔ，１９９６，１２（３），２４１口２４７．　【５】Ｈｓｕ　ＨＣ，Ｃｈｅｎｇ　Ｗ，Ｌａｉ　ＰＬ．Ｃｌｏｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ　ＭＸＲ７　ｉｎ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　［７］Ｌｉｎ　Ｈ，Ｈｕｂｅｒ　Ｒ，Ｓｃｈｌｅｓｓｉｎｇｅｒ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｆｒｅｑｕｅｎｔ　ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ　ｆ　ｏｔｈｅ　ＧＰＣ３　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，１９９９，５９（４）：８０７［￣８１０．　（收稿日期：２００７．０３．１６）　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＤＯＣＴＯＲ中国现代医生２９