凯氏定氮法

取两个凯氏烧瓶标号，一只加1.0ml蒸馏水作为空白对照，另一只加1.0ml样液。 各加硫酸钾和硫酸铜混合物约20mg、浓硫酸2ml。烧瓶口插一漏斗（冷凝用），烧瓶置于电炉上加热。开始时应注意火力，以免使瓶内液体冲至瓶颈。待瓶内水气蒸完，硫酸开始分解生成SO2白烟时，适当加强火力，直至消化液透明并呈但旅色为止（约2~3h），用木夹取出，冷却，准备蒸馏。

2、 蒸馏

取50~100ml锥形瓶3只，先按一般方法洗净，再用蒸汽洗涤数分钟，冷却。用移液管各加入2%硼酸溶液5.0ml和指示剂4滴。如瓶内液体呈葡萄紫色，可再加硼酸液5ml，盖好备用。如锥形瓶内液体呈绿色，需用蒸汽重新洗涤。

1.安全管 2.导管 3.汽水分离管 4.样品入口 5.塞子

6.冷凝管 7.吸收瓶 8.隔热液套 9.反应管 10.蒸汽发生瓶

微量凯氏蒸馏装置如图

2所示，蒸汽15发生器内盛放有滴加数

4滴H2SO4的蒸馏水和数粒沸石。3106加热后，产

生的蒸汽经储液管、反应室至冷凝

9管，冷凝后

的液体流入接受瓶。每87次使用前，

需用蒸汽洗涤10min左

右（此时可用一小烧杯盛接冷凝的水）。然后将一只盛有硼酸液和指示剂的锥形瓶放置在冷凝管的下端，并使冷凝管之管口插入酸液面下，继续蒸馏1~2min，如硼酸液颜色不变，表明仪器已洗净，否则需再洗。移去酸液，蒸馏1min，用水冲洗冷凝管口吸去反应室残夜。 将消化好的消化液，由小漏斗加入反应室，用蒸馏水洗涤凯氏烧瓶2次（每次约2ml），洗涤液均经小漏斗加入反应室，再在冷凝管下置一盛有硼酸液和指示剂的锥形瓶，并使冷凝管口插入酸液面下0.5cm处（10mL酸液置于50~100mL锥形瓶内，液体深度不大，可将锥形瓶斜放。冷凝管口必须插在液面下，但也不宜太深，这样，万一发生倒吸现象时，硼酸液也不致被吸入反应室内）。

用小量筒取10~15mL30%的NaOH溶液，倒入小漏斗，放松弹簧夹，让NaOH溶液缓缓流入反应室，当小漏斗内剩下少量NaOH溶液时，夹紧夹子，再加入约3mL蒸馏水于

小漏斗内，同样缓慢放入反应室，并留少量水在漏斗内做水封，即可蒸馏。

开始蒸馏后，即应注意硼酸溶液颜色变化。当酸液由葡萄紫色变成绿色后，再蒸馏约3min，然后降低锥形瓶，使冷凝管口离开酸液面约1cm，再蒸馏1min，用少量蒸馏水冲洗冷凝管口，移去锥形瓶，盖好，准备滴定。

3、 定氮仪的洗涤

每次使用定氮仪后必须先把反应室内的残液洗去，洗净。用电炉加热，就及时切断电源电炉余温仍较高，倒吸结果不好，为此在蒸汽发生器和储液管间加一个三通活塞，蒸馏时可使蒸汽发生器仅与储液管相通，蒸汽进入反应室。需倒吸时，转动三通活塞使蒸汽外逸（进入大气），不进入储液管，此时由于储液管温度突然下降，即可将反应室残液吸至储液管。

4、 滴定

用0.01mol/L的HCl溶液滴定锥形瓶中的硼酸液至浅葡萄紫色，记录所耗HCl溶液量。

仪器——

微量凯氏定氮仪，移液管，滴定管，烧杯，量筒，三角烧瓶，凯氏烧瓶，电炉，分析天平

试剂——

0.9%的NaCl溶液； 98%分析纯浓硫酸；

硫酸钾和硫酸铜的混合物。硫酸钾和硫酸铜按3:1~4:1（m/m）混匀，研成粉末； 30%NaOH溶液。30gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100mL； 2%硼酸溶液。2g硼酸溶于蒸馏水，稀释至100mL；

混和指示剂。0.1%甲基红酒精溶液和0.1%甲基蓝酒精溶液按4:1的比例（V/V）混合；

0.01mol/L标准盐酸溶液； 待测样液。1g的螺旋藻粉溶于0.9%的NaCl溶液中，并稀释至100mL。如有不容物，离心取上清液备用