菊苣中一个新倍半萜类化合物的结构解析

２０１０年１０月　第１２卷第ｌ０期　中国现代中药Ｍｏｄｅｍ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　菊苣中一个新倍半萜类化合物的结构解析　娄猛猛　，李国玉　ｒ，王航宇　，赵文斌　，王金辉　’　，　（１．石河子大学药学院，新疆　石河子８３２００２；２．教育部省部共建新疆特种植物药资源　重点实验室，新疆　石河子８３２００２；３．沈阳药科大学中药学院，辽宁　沈阳　１　１００１６）　［摘要］　目的：确证３ａＲ一珊塔玛内酯的结构。方法：利用反复柱层析、制备ＴＬＣ等手段进行分离，应用　Ｈ．　ＮＭＲ、１３Ｃ．ＮＭＲ、二维核磁共振（２Ｄ　ＮＭＲ）、ｕｖ、ＭＳ和ＣＤ的测定对其结构进行确证。结果：利用二维核磁共振对　新化合物３ａＲ．珊塔玛内酯的　Ｈ—ＮＭＲ和”Ｃ－ＮＭＲ进行了全归属。结论：通过上述方法，确定新化合物３ａＲ一珊塔玛内　酯的结构。　［关键词］　菊苣；倍半萜；结构鉴定　菊苣别名蓝菊，系维吾尔族习用药材，为菊科　菊苣属中的多年生草本植物毛菊苣Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ　ｇｌａｎｄｕｌｏｓｕｍ　Ｂｏｉｓｓ．ｅｔ　Ｈｕｅｔ．和菊苣Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ　ｉｎｔｙｂｕｓ　分析纯（天津市富宇精细化工有限公司）。　菊苣药材购于沈阳药材市场，经石河子大学药　学院谭勇教授鉴定为菊苣全草，保存在石河子大学　药学院，标本号为Ｎｏ．２００７１００２００２。　２提取分离　Ｌ的干燥地上部分或根。主要用于湿热黄疸，胃痛　食少，水肿尿少。菊苣根主要含有三萜、倍半萜、　有机酸等成分¨　Ｊ，但国内研究较少。为扩大药用资　源，本课题组对菊苣地上部分的化学成分进行了研　究，从菊苣地上部分分离得到了一个新的倍半萜类　化合物，结构如图１所示。通过ＨＭＱＣ，　ＨＭＢＣ，　Ｈ一。Ｈ　ＮＯＥＳＹ等二维核磁共振方法，结合　Ｈ　菊苣地上部分１０　ｋｇ，粉碎成粗粉，９５％乙醇回　流提取３次，每次３　ｈ，浓缩得浸膏。将得到的浸膏　溶于１０　Ｌ水中，分别用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙　酯萃取，其中醋酸乙酯萃取部分为２４　ｇ，３０　ｇ拌样，　１２０　ｇ硅胶装柱，经反复硅胶柱层析，制备薄层得到　和”Ｃ数据对该化合物的化学位移进行了全归属，并　利用ＣＤ谱图确定其立体构型。　该化合物（１７　ｍｇ）。　３结构鉴定　无色针晶（三氯甲烷），易溶于三氯甲烷、醋酸　乙酯、甲醇，不溶于水。ｍｐ　１３７～１３９℃。Ｂｒ２／Ｈ２Ｏ　反应呈阳性。ＣＤ［ＭｅＯＨ，Ｃ：０．０１８　ｇ・（１００ｍＬ）　］　Ｈ２Ｃ　１０　入…（［０］）ｎｍ（ｄｅｇ・ａｍ　・ｄｍｏｌ　）：２０８（１３０．８），　２３７（一３１．２）。其ＨＲ—ＥＳＩ—ＴＯＦ—ＭＳ谱给出准分　ｏ　子离子峰：２４９．１４９　８［Ｍ＋Ｈ］　（Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　Ｃ１５　Ｈ２１　Ｏ３　２４９．１４９　１，２．８），４９７．２８９　６［２Ｍ＋Ｈ］　（Ｃａｌｃｄ　ｆｏｒ　图１新倍半萜类化合物的结构　１仪器与材料　ｃ３０　Ｈ４１　Ｏ６　４９７．２９０　３，一１．４），确定其分子式为　Ｃ　Ｈ　。０　。ＮＭＲ数据和ＨＭＱＣ谱提示１个一ＣＨ，与一　个双键直接相连［　（Ｈ）１．８２（　，３Ｈ），５．３６（ｂｒ．ｓ，　１Ｈ），　（ｃ）２２．１，１３３．０，１２１．６］；一个０＝Ｃ—Ｃ＝　ＣＨ２基团［６（Ｈ）６．０４（ｄ，Ｊ＝３．０，１Ｈ），５．４９（ｄ，　ｘ－５显微熔点测定仪（北京泰克仪器有限公司）；　Ｓｈｉｍａｄｚｕ　ＵＶ一２４０１紫外一可见分光光度计（１３本岛津　公司）；ＶＯＲＩＡＮ．６００型核磁共振光谱仪测定（ＴＭＳ　Ｊ＝３．０，１Ｈ），６（Ｃ）１７１．７，１３９．２，１１６．５］；两个　０一ＣＨ基团［６（Ｈ）４．０１（ｄｄ，Ｊ：１２．０，１１．４，１Ｈ），　３．６１（ｄｄ，Ｊ＝８．０，６．６，１Ｈ），６（Ｃ）８２．２，７４．５］；　作内标）；薄层色谱用硅胶ＧＦ：　和柱层析硅胶　（２００～３００目）（青岛海洋化工厂）；其他试剂均为　［通讯作者】　・王金辉，Ｅ—ｍａｉｌ：ｗａｎ￣ｈ１９７２＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｉｎ　２２・　２０１０年１０月　第１２卷第１０期　中国现代中药Ｍｏｄｅｒｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｏｃｔ．２０１０　Ｖｏ１．１２　Ｎｏ．１０　３个ＣＨ２［６（Ｈ）２．０５（ｄｔ，Ｊ＝１３．２，３．０，１Ｈ），１．３３　（　，Ｊ＝１３．２，４．２，１Ｈ），２．４０（ｍ，１Ｈ），２．００（ｍ，　表１化合物的　Ｈ・ＮＭＲ（６００　ｎＨｚ，ＣＤＣＩ３）和　”ｃ－ＮＭＲ（１５０　ＭＨｚ，ＣＤＣＩ３）数据　１Ｈ），２．１０（由，Ｊ＝１３．２，３．６，１Ｈ），１．６８（ｑｄ，Ｊ＝　１３．２，３．６，１Ｈ），６（ｃ）３４．１，３２．１，２０．９］；两个　ＣＨ［　（Ｈ）２．３７（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝１１．４，１Ｈ），２．５７（ｔｄ，　Ｊ＝１２．０，３．６，１Ｈ），　（Ｃ）５０．９，５０．６］；１个一ＣＨ　［６（Ｈ）０．８８（ｓ，３Ｈ），６（Ｃ）１０．５］。结合ＨＭＱＣ和　ＨＭＢＣ可以归属其　Ｈ．和”Ｃ．ＮＭＲ信号。其ｃ、Ｈ数据　如表１所示。　在ＨＭＢＣ谱中Ｈ—Ｃ（１０）与Ｃ（２），Ｃ（３）及　ｃ（３ａ）有相关信号，Ｈ—ｃ（３ａ）与ｃ（４）有相关信号，　可以推出片段Ａ；Ｈ—Ｃ（１１）与Ｃ（５），Ｃ（５ａ），ｃ（６），　Ｃ（９ａ）有相关，Ｈ－Ｃ（６）和ｃ（５），Ｃ（７），Ｃ（９ａ）有　相关，Ｈ—Ｃ（５）与Ｃ（４）相关可推出片段Ｂ；由Ｈ—　Ｃ（１２）与Ｃ（８），Ｃ（９），Ｃ（９ａ）相关，Ｈ—ｃ（７）与　Ｃ（８），Ｃ（９）相关，Ｈ—Ｃ（９ａ）和Ｃ（１２）相关，可以　推断出片段Ｃ；Ｈ・Ｃ（９ｂ）和ｃ（３），Ｃ（３ａ），Ｃ（４），　Ｃ（９）和Ｃ（９ａ）的相关信号可以推断出该化合物中有　片段Ｄ和Ｅ；根据ＭＳ谱可以推断出Ｏ（１）直接连在　Ｃ（２），因此可以推断出片段Ｆ，见图２。　２２．１２　２０．９　（２．１０，１．　４Ｏ．２．ｏｏ）　１（２．４０．２．ｏｏ）　＼　２０．９　（２．１０，Ｉ．６８　（２．０５，１．３３）　Ａ　Ｂ　ｆ２．３７）　Ｃ　２０．９　Ｉｌ６．５　（６．０４，５．４　Ｈ　１．６　３６）　Ｄ　Ｅ　Ｆ　图２化合物及其结构片段的Ｉ－ＩＭＢＣ关键远程相关　在该化合物的ＮＯＥＳＹ谱中，Ｈ—ＣＨ　（１１）和Ｈ　一　Ｃ（４），Ｈ　一Ｃ（５），Ｈ　一Ｃ（７），Ｈ　－Ｃ（９ｂ）有相关信　号；Ｈ—Ｃ（９ａ）和Ｈ．ｃ（３ａ）、Ｈ—Ｃ（６）相关；Ｈ—Ｃ（６）　和Ｈ　一Ｃ（７）相关；Ｈ—Ｃ（３ａ）和Ｈ　一Ｃ（５）相关，可　谱中可以看到２０８　ｎｍ正Ｃｏｔｔｏｎ效应，１９５　ｎｍ负　Ｃｏｔｔｏｎ效应，可以推断符合Ｐ．螺旋规则，见图４。因　此，推断ｃ（３ａ）为　型，见图５。　因此，该化合物的结构确定为（３　ａＲ，５　ａＳ，６　Ｓ，　９　ａＲ，９　ｂＲ）．６．羟基．５　ａ，９．二甲基．３．甲叉．３　ａ，４，　以推断出该化合物的构型为（３　ａｏＬ，５　，６卢，　９　ａｏｔ，９　），见图３。由　Ｈ—ＮＭＲ数据推出，Ｈ　５，５　ａ，６，７，９　ａ，９　ｂ一８　Ｈ一３日一萘并［１，２－ｂ］呋　喃－２一酮［（３　ａＲ，５　ａＳ，６Ｓ，９　ａＲ，９　ｂＲ）－６一ｈ・　ｒｏｘｙ１－５ａ，９－ｄｉｍｅｔｈｙｌ一３・ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ一３　ａ，４，５，５　ａ，６，　．ｃ（１０）和Ｈ　一Ｃ（４）为ｃ（１０）位上的两个质子信　号。根据不饱和内酯的Ｃｏｔｔｏｎ螺旋规则　，从ＣＤ　２３・　２０１０年１０月　第１２卷第１０期　中国现代中药Ｍｏｄｅｒｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｏｃｔ－２０１０　Ｖｏｌ・１２　Ｎｏ・ｌ０　ｏ　．　繁　图５化合物的不饱和内酯环的　一螺旋规则　图３化合物的ＮＯＥ相关　０．９　０．８　０．７　该绝对构型为未见报道的新化合物，因此命名为　３ａ　一珊塔玛内酯（３ａＲ．ｓａｎｔａｍａｒｉｎｅ）。匠　参考文献　：　ｎ　，　∞Ｏ　Ｊ　坩　２　０．６　０．５　０．４　０　３　０．２　０　Ｉ　Ｏ　［１］杜海燕，江佩芬．菊苣的化学成分研究［Ｊ］．中国中药杂　志，１９９８，２３（１１）：６８２－６８３．　［２］何轶，郭亚健，高云艳．菊苣根化学成分研究［Ｊ］．中国中　２２０　２５０　２８０　３１０　３４０　３７０　４００　１９０　药杂志，２００２，２７（３）：２０９—２１０．　ａ．ＣＤ谱ｂ．ＵＶ谱　［３］吴立军．实用天然有机产物化学［Ｍ］．北京：人民卫生　出版社．２００７：３３０—３３３．　图４化合物的ＣＤ和ＵＶ图　７，９　ａ，９　ｂ－８　Ｈ一３　Ｈ－ｎａｐｈｔｈｏ［１，２－ｂ］ｆｕｒａｎ一２－ｋｅｔｏｎｅ］，　（收稿日期２０１０－０４—２２）　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａ　Ｎｅｗ　ＳｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎＯｉｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄ　Ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ　Ｉｎｔｙｂｕｓ　Ｌ．　Ｌｏｕ　Ｍｅｎｇｍｅｎｇ　，Ｌｉ　Ｇｕｏｙｕ　一，Ｗａｎｇ　Ｈａｎｇｙｕ　，Ｚｈａｏ　Ｗｅｎｂｉｎ　，Ｗａｎｇ　Ｊｉｎｈｕｉ　１，２，３　（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｉｈｅｚｉ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　８３２００２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｐｈｙｔｏｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ＆Ｍｏｄｅｒｎｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴＣＭ。Ｓｈｉｈｅｚｉ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　８３２００２，Ｃｈｉｎａ；３．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍａｔｅｒｉｃａ　Ｍｅｄｉｃａ．Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　Ｌｉａｏｎｉｎｇ　１　１００１６，Ｃｈｉｎａ）　『Ａｂｓｔｒａｃｔ］　ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　３　ａＲ—ｓａｎｔａｍａｒｉｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ　ｎｅｗ　ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｎ　ｓｉｌｉｃａ．ｇｅ１．，ＰＴＬＣ．Ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｉｅｄ　ｂｙ‘Ｈ—　ｆＮＭＲ，　Ｃ—ＮＭＲ，２Ｄ—ＮＭＲ，ＵＶ，ＭＳ　ａｎｄ　ＣＤ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅ　ａｂｓｏｌｕｔｅ　ｃｏｎｆｉｇｕｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＣＤ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：　Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｐａｐｅｒ　ａｌｌ　ｔｈｅ　Ｈ—ＮＭＲ　ａｎｄ　Ｃ—ＮＭＲ　ｓｉｇｎａｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　３ａＲ—ｓａｎｔａｍａｒｌｎｅ　ｗｅｒｅ　ａｓｓｉｇｎｅｄ　ｕｎｅｑｕｉｖｏｃａｌｌｙ　ｂｙ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ｔｗｏ—ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ　ＮＭＲ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　３　ａＲ－ｓａｎｔａｍａｒｉｎｅ　ｗａｓ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ａｂｏｖｅ’ｍｅｎｔｉｏｎｅｄ　ｓｔｕｄｉｅｓ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］　Ｃｉｃｈｏｒｉｕｍ　ｉｎｔｙｂｕｓ　Ｌ．；Ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ；Ｓｔｕｃｔｒｕｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　（上接第２１页）　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｆａｔ－ｓｏｌｕｂｌｅ　Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｆａｅｃｅｓ　Ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｕｍ　ｂｙ　ＧＣ－ＭＳ　Ｙａｎｇ　Ｑｉ，Ｚｈａｏ　Ｙａｈ，Ｃｈｅｎ　Ｗｅｎｘｕｅ，Ｗａｎｇ　Ｊｉａｎ，Ｗａｎｇ　Ｙｉｎｘｉｕ，Ｚｈａｎｇ　Ｌｉａｎｘｕｅ　（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ。Ｊｉｌｉｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ　Ｊｉｌｉｎ　１　３０　１　１　８，Ｃｈｉｎａ）　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｆａｔ—ｓｏｌｕｂｌｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｆｒｏｍ　Ｆａｅｃｅｓ　ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｕｍ．　Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｆａｔ．ｓｏｌｕｂｌｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｒｅｆｌｕｘ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ＧＣ．ＭＳ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：４２　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　Ｆａｅｃｅｓ　ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｕｍ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ，１　５　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ａｃｃｏｕｎｔ　ｆｏｒ　４９．１６２％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｖｏｌａｔｉｌｉｔｙ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ，２７　ｋｉｎｄ　ｏｆ　ｎｏｎ—ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ　ａｃｃｏｕｎｔ　ｆｏｒ　４４．１　８４％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｖｏｌａｔｉｌｉｔｙ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｒａｐｉｄ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｆｏｒ　ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｆａｅｃｅｓ　ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｕｍ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］　Ｆａｅｃｅｓ　ｔｒｏｇｏｐｔｅｒｏｒｕｍ；ＧＣ—ＭＳ；Ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄｓ；Ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　．２４．