HPLC测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸B的含量

特产研究　Ｓｐｅｃｉａｌ　Ｗｄｄ　Ｅｃｏｎｏｍｉｃ　Ａｎｉｍａｌ　ａｎｄ　Ｐｈｎｔ　ｌ￣ｅｓｅａｒｃｈ　４７　文章编号：１ＯＯ１—４７２１（２ＯＯ８）０１—００４７－０３　ＨＰＬＣ测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸Ｂ的含量　陈双英　（湖南省澧县人民医院药剂科，湖南澧县４１５５００）　摘要：目的　建立高效液相色谱法测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸Ｂ的含量。方法　采用ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－－．Ｃ　色谱柱（４．６ｍｍ　Ｘ　２５０ｍｍ，５　ｍ），流动相：甲醇一乙腈－０．５％甲酸溶液（３０：９：６１），流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长：２８６ｎｍ。结果０．２９－２．９４ＩＸｇ线性关系良好，ｒ＝Ｏ．９９９９。平均回收率为９９．２５％，ＲＳＤ－－Ｏ．５４％（ｎ－５）。结论可用于该制剂的质量控制。　丹酚酸Ｂ在　本方法分离效果好、准确、重复性好，　关键词：高效液相色谱法；丹酚酸Ｂ；血栓　脉宁胶囊　中图分类号：０６５７．７￣；Ｒ９２７　文献标识码：Ａ　ＨＰＬＣ　ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉＯｎ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　Ａｃｉｄ　Ｂ　ｉｎ　…Ｘｕｅｓｈｕａｎｘｉ　・ｎｍａｉ・‘ｍｎｇ　ａｐｓｕｌｅ　＾’　ＣＨＥＮ　Ｓｈｕａｎｇ・—－ｙｉｎｇ　（Ｅｌ　Ｃｉｔｙ　Ｐｅｏｐｌｅ‘Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｌｉ　Ｃｉｔｙ　Ｈｕｎａｎ　４１５５００，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｏｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｍｅ￣ｏｄ　ｆｏｒ　ＨＰＬＣ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　ｉｎ　ＸｕａｓｈｕａｎｙＳｎｍａｉｎｉｎｇ　ｃａｐｓｕｌｅ．Ｍｏｔｈｏｄ　ＴｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｆｏｒＨＰＬＣｗａｓＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８ｃｏｌｕｍｎ（４．６ｎｕｎＸ２５０ｎｕｎ。５　ｍ）ｗｉｔｈ　．５％ｆｏｒｍｉｃ　ａｃｉｄ侣０：９：６１）　ａｓｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅ．Ｔｈｅｆｌｏｗ　ｒａｔｅｗａｓ　１．０ｍＬ／ｍｉｎ　ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｓＷａｓ２７０　ｎｌｎａｎｄ２８６　ｎｌｎ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＲｅｓｕＲ　Ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ＣＩＩＩ＇ＶＣ　ｏｆＳａｌｖｉａｎｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　Ｂ　Ｗａｓ　ｌｉｎｅｒｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ０．２９－２．４　ｇ　ａ９ｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　Ｗａｓ　０．９９９９．Ｔｈｅ　ｃｏｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　Ｗａｓ　９９．２５％ｗｉｔｈ　ＲＳＤ　Ｏ．５４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｓｈｏｗｓ　ｇｏｏｄ　ｓｅｐａｒａｔｉｎｇ　ｒｅｓｕｌｔ，ａｃｃｕｒａｃｙ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ。ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｈｅ　ｑｕａｌｔｉ哆ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆＸｕｅｓｈｕａｎｘｉｎｍａｉｎｉｎｇ　ｔａｂｌｅｔ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｉ－￣ＬＣ；Ｓａｌｖｉｎｏｌａｉｃ　ａｃｉｄＢ：Ｘｕｅｓｈｕａｎｘｉｎｍａｉｎｉｎｇ　ｃａｐｓｕｌｅ　可用于该制剂的质量控制。　血栓心脉宁胶囊系Ｅｈ］￣ｌ芎、丹参、槐花、麝香等ｌ０　好，味中药组成的复方中药制剂，具有芳香开窍、活血散瘀　１　仪器与试药　的功能，用于脑血栓、冠　病、心绞痛等属血瘀证者。丹　美国惠普公司ＨＰ一１１００型高效液相色谱仪、　酚酸Ｂ为其有效成分之一，有关控制含丹参及其制剂　Ｇ１３１４Ａ可变波长紫外检测器、Ｇ１３１１Ａ四元低压泵，　的质量已有报避　，为了更有效地控制该制剂的质量，　ＨＰ化学工作站。　本文首次采用ＨＰＬＣ测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸Ｂ　丹酚酸Ｂ对照品（批号１１１５６２－２００４０３，由中国药　（ｃ　Ｏ坫）的含量，该方法操作简便，重复性、准确性均　品生物制品检定所提供）。血栓心脉宁胶囊（吉林华康　收稿日期：２００７—１１－２０　作者简介：陈双英（１９６５－），女，湖南澧县人，药剂科主任，执业中药师，从事药品检测、中药炮制等研究。　Ｌ　维普资讯 http://www.cqvip.com

４８　特　产　研　究　２００８年第１期　药业股份有限公司，批号０６０６０１、０６０６０２、０６０６０３）。其　的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。　他试剂均为分析纯。　２．２．２　对照品溶液的制备精密称取丹酚酸Ｂ对照品　适量，加７５％甲醇溶解，配制成含丹酚酸Ｂ２００ｇ　ｍＬ　２方法与结果　的溶液，作为对照品溶液。　２．１色谱条件　丹酚酸Ｂ色谱柱：ＺＯＲＢＡＸ　ＳＢ－Ｃ１日（４．６ｒａｍ×　２．２．３　阴性对照液的制备按处方配比投入无丹参的　制成空白制剂，按样品溶液制备方法　￣５ｏｍｍ，５　ｍ）；流动相：甲醇一乙腈－０．５％甲酸溶液　其他药材和辅料，　（３０：９：６１），流速：１．０ｍＩＪｍｉｎ，检测波长为２８６ｍｎ，柱　制备。３干扰性试验　温３Ｏ℃，进样量５ｐ，Ｌ。理论板数以丹酚酸Ｂ计，应不得　２．在２．１项色谱条件下，分别取丹酚酸Ｂ对照品溶　少于３０００。　２．２溶液的制备　液、阴性对照溶液、供试品溶液各５　Ｌ注入色谱仪，记　取本品１Ｏ粒，除去胶囊，　录色谱图，见图１一图３。结果显示，在此条件下，血栓　２．２．１供试品溶液的制备研细，取０．３ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入　心脉宁胶囊中各组分分离度效果良好，其他组分不干　　７５％甲醇５０　ｍＬ，称定重量，超声处理（功率２５０Ｗ，频　扰丹酚酸Ｂ的测定。率２５Ⅺ｛ｚ）３Ｏ　ａｉｒｎ，再称定重量，用７５％甲醇补足减失　８０　６０　４０　２０　Ｏ　０　Ｓ　１０　１Ｓ　２０　图１丹酚酸Ｂ对照品ＨＰＬＣ图　０　５　图２阴性样品丹酚酸ＢＨＰＬＣ图　８０　６０　４０　２０　０　Ｏ　５　１Ｏ　１５　２Ｏ　图３供试品中丹酚酸Ｂ　ＨＰＬＣ图　维普资讯 http://www.cqvip.com 第１期　２．４线性关系考察　陈双英：Ｉ－－ＩＰＬＣ测定血栓心脉宁胶囊中丹酚酸Ｂ的含量４９　取丹酚酸Ｂ同一供试品溶液，分别于０ｈ、２ｈ、４ｈ、　精密称取丹酚酸Ｂ对照品溶液（２９４．２　ｇ／ｍＬ）　１．０　Ｌ、３．０　Ｌ、５．０　Ｌ、７．０　Ｌ、１０．０　Ｌ，注入液相　８ｈ、２４ｈ注入高效液相色谱仪，测定含量，计算得ＲＳＤ　为１．００％（ｎ＝５），表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。　色谱仪，按上述条件测定，以峰面积为纵坐标、进样　２．７重复性试验　一　量（　ｇ）为横坐标进行线性回归，得回归方程，丹酚　精密称取丹酚酸Ｂ同一批号的样品５份，按２．２　酸Ｂ：ｙ＝ｌ　０８９．４５ｘ一２９．３４１　６，线性范围０．２９—２．９４　ｇ，ｒ　项供试品溶液制备方法制备，按２．１项色谱条件测试，　＝０．９９９９。　测得丹酚酸Ｂ峰面积ＲＳＤ－－Ｏ．６％（ｎ＝５），结果表明本法　２．５精密度试验　的重复性好。　精密吸取０．１９４　２ｍｇ／ｍＬ的丹酚酸Ｂ对照品溶液　２．８回收率试验　５　Ｌ，各进样５次，记录色谱图，结果丹酚酸Ｂ峰面积　精密称取已知丹酚酸Ｂ含量的血栓心脉宁胶囊样　ＲＳＤ－－Ｏ．４４％，表明仪器精密度良好。　品共６份，分别精密加入丹酚酸Ｂ对照品，按供试品溶　２．６稳定性试验　液制备方法制备，依法测定，计算回收率，结果见表１。　表１　血栓心脉宁胶囊中丹酚酸Ｂ回收率试验结果　取样量（ｇ）　丹酚酸Ｂ含量（ｎａｇ）　加入对照品量（ｍｇ）　测得量（ｎａｇ）　回收率（％）　平均回收率（％）　ＲＳＤ（％）　２．９样品的含量测定　验结果带来困难。本试验以丹酚酸Ｂ含量为主要指标，　分别精密称取３批血栓心脉宁胶囊，按供试品制　制定了血栓心脉宁胶囊的含量测定标准，以更好地控　备方法制备，精密吸取对照品溶液及供试品溶液，注入　制产品的质量，保证临床的疗效。　高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定丹酚酸Ｂ含量，　结果见表２。　参考文献　表２　血栓心脉宁胶囊含量测定结果（　ｇ／粒）　［１】国家药典委员会．中国药典（２００５年版一部）［ｓ】．北京：化　批号　丹酚酸Ｂ含量　学工业出版社，２００５，５２．　１４．４４　［２】游勇基，陈铭辉．高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸Ｂ等　１４．４８　３种有效成分【Ｊ】＿中国药学杂志，２００３，３８（１２）：９５０－９５２．　１４．３２　［３】杨广德，贺浪冲，李永茂．丹参有效部位指纹图谱定性和有　３　讨论　效成分定量分析方法研究［Ｊ】．药物分析杂志，２００３，２３　（６）：４０９－４１３．　中药复方在中医临床上占据着重要的地位，其研　［４】吕东，刘亚蓉．复方丹参胶囊质量控制标准研究［Ｊ】．西北药　究与应用应重视制剂的研究和质量控制；如果忽略制　学杂志，２０００，１５（６）：２５４．　剂研究和质量控制，不仅影响临床疗效，而且给阐明实　（上接第４６页）　［２１周军，谢文，张少文．清热解毒口服液的提取工艺改进　参考文献　［Ｊ】．中国医院药学杂志，２００５，２５（２）：１８３—１８４．　［１】国家药典委员会．中华人民共和国药典（２００５年版一部）　［３】张小利，张黎明，王朝臣．山楂叶总黄酮酶解提取液的澄　［ｓ】．北京：化学工业出版社，２００５，６１９．　清工艺研究［Ｊ】．食品研究与开发，２００６，２７（１０）：１０１—１０４．