一、实验目的：掌握从污水中分离目的菌的原理和方法
二、实验概述：大肠埃希菌，革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周身
鞭毛，能运动，无芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气，在EMB平板上因发酵乳酸，使伊红和亚甲蓝结合，菌落呈现深紫色，有金属光泽。大肠埃希菌侵入人体一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等。从污水中分离大肠埃希菌可以检测污水中大肠埃希菌的相对含量，从而明确其对人类的危害程度，进而采取相应的措施控制污水的质量。
三、实验材料：1、样品：污水 2、培养基：EMB平板，糖发酵培养基（葡
萄糖、乳糖），柠檬酸盐斜面培养基，蛋白胨水培养基，葡萄糖蛋白胨水培养基，KIA高层斜面培养基 3、试剂与器材：甲基红试剂，吲哚试剂，LB增菌液，接种环，接种针，酒精灯，无菌试管，无菌平板等等
四、分离程序：样品处理→选择性增菌→EMB平板分离→鉴定
五、鉴定程序：革兰氏涂片染色→镜下观测→氧化酶试验→进一步生化鉴
定（包括糖发酵、IMViC、H2S的产生、动力试验等）
六、预期结果：1、取EMB平板上的深紫色菌落中的菌体进行鉴定的结果如
下：革兰氏染色为阴性，镜下为短杆状，氧化酶试验为阴性，葡萄糖和乳糖酵解试验为阳性、产气，吲哚试验为阳性，甲基红为阳性，VP试验为阴性，柠檬酸盐试验为阴性，KIA试验结果为A/AG—，动力试验为阳性。由此可得出结论，平板分离出的深紫色菌落为大肠埃希氏菌。
2、试验设计的系列生化鉴定结果有不符上述情况者，均考虑不是大
肠埃希氏菌或者其中混入杂菌。
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