植物活性肽对哺乳仔猪免疫性能及肠道微生物影响的研究

张为鹏，等：植物活性肽对哺乳仔猪免疫性能及肠道微生物影响的研究　一ｌ９一　植物活牲肽对晡乳仔猪免疫牲能及　肠道微生物影晌的研究　张为鹏　王斌　王兴科　杨在宾　（１．山东省莱西市畜牧局，山东莱西２６６６００；２．山东农业大学动物科技学院，泰安２７１０１８）　摘要：试验选用７±２日龄的ＰＩＣ商品代哺乳仔猪４Ｏ窝，随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四个组，　每个组分为ｌＯ个重复。试验Ａ组为鱼粉对照组，营养水平参照ＰＩＣ猪营养需要设计，配方　中含有２％的鱼粉。试验Ｂ组为血浆蛋白组，含有２％的血浆蛋白粉；试验ｃ、Ｄ组为添加植　物活性肽的试验组，分别添加２％和４％的植物活性肽，用来代替血浆蛋白粉。仔猪１４日龄　时，每个重复选取一头体格中等的仔猪注射牛血清白蛋白作为外来抗原。用来研究植物活性　肽对哺乳仔猪血清抗体水平的影响。在饲养试验结束时，每个试验组选取体格中等的３头　仔猪，进行屠宰试验，取适量大肠内容物，用于研究植物活性肽对哺乳仔猪肠道微生物区系　的影响。研究结果表明：哺乳仔猪日粮中添加４％的植物活性肽和血浆蛋白粉可以显著提　高血清中的抗体水平（Ｐ＜０．０５），免疫器官脾脏的绝对质量与相对质量明显比血浆蛋白粉　组要高（Ｐ＜０．０５）。日粮中添加植物活性肽可以显著提高大肠中有益茵群乳酸茵的数量（Ｐ　＜０．０５），降低有害茵群大肠杆茵和沙门氏茵的数量（Ｐ＜０．０５）。　关键词：植物活性肽；哺乳仔猪；抗体水平；肠道微生物　１材料与方法　１．１试验材料　血液用于做阴性对照，离心取上清液，用于进行　抗体指标的测定。试验期间一切卫生与免疫工　血浆蛋白粉，植物活性肽制剂（由上海邦成　生物科技公司提供）。　１．２试验地点　作按猪场常规制度进行。　青岛某ｌＯ万头ＰＩＣ商品代猪场；山东农业　大学动物科技学院。　１．３试验动物及试验时间　试验共选取７±２日龄体重相近、ＰＩＣ商品　代哺乳仔猪４Ｏ窝，共４００头左右；试验期自７日　龄补饲开始至２１日龄断奶结束，共计ｌ４天。　１．４试验日粮组成及营养水平（见表１）　１．５试验设计　仔猪２１日龄时，每个组选取体重相近的仔　猪３头，猪只经颈部放血宰杀后，迅速打开腹腔，　取出脾脏和消化道，采用双结扎法取盲肠后段，　结肠中段样品５厘米左右，扎紧，以防污染，超低　温冰箱保存。　１．６检测指标　１．６．１免疫器官重量及免疫器官指数（见表２）　２１日龄屠宰前仔猪称重，屠宰后取出脾脏　和肝脏称重，并计算脾脏和肝脏的免疫器官指数　［免疫器官指数＝免疫器官重量（ｇ）／活体重　（　）］。　１．６．２血清抗体水平（见表３）　免疫比浊法。测定原理：血清中的抗体　ＩｇＧ，ＩｇＡ，ＩｇＭ和可溶性抗原与特异性抗体相结　试验仔猪７日龄开始试喂，当仔猪１４日龄　时，每个重复随机挑选一头仔猪，按每公斤体重　２５ｒａｇ的剂量注射牛血清白蛋白稀释液，２１日龄　时，每只猪采血１０—１５ｍＬ，采一头未经免疫的猪　一２０一　中国饲料添加剂　２００７年第９期（总第６３期）　合，形成不溶性免疫复合物，使反应液产生浑浊，　容物中细菌个数的对数表示（ＩｇＣＦＵ／ｇ）。　浑浊高低反映血清样品ＩｇＧ，ＩｇＡ，ＩｇＭ的含量。　１。７数据分析　表ｌ试验日粮组成及营养水平（％）　采用ＳＰＳＳ统计软件对数据进行统计，用邓　项目　—　肯氏法进行多重比较。所有数据用“平均数±　日粮组成　标准误”表示。　玉米　４８．８　４９　４９．４　４９．６　２结果与讨论　去皮豆粕　ｌ３　ｌ３　ｌ３　ｌ３　２．１免疫性能的比较　浓缩蛋白　２．５　２．５　２．５　２．５　乳清粉　１Ｏ　ｌＯ　１０　１０　２．１．１免疫器官的重量及免疫器官指数比较　鱼粉　１．９　由表２可以看出，试验Ａ、Ｄ两组脾脏的绝　血浆蛋白ＳＤＰＰ　，　１０　ｌ０　对重量差异不显著（Ｐ＞０．０５），和其它两组相比　蛋能宝　ｌＯ　ｌＯ　血球蛋白　２．９　２．４　２．１　差异显著（Ｐ＜０．０５）。试验Ｄ组脾脏的相对重　小肽　２　４　量和其它三组相比差异显著（Ｐ＜０．０５）。试验　豆油　２．４　２．１　２．２　１．９　葡萄糖　４　４　４　４　Ｂ组脾脏的绝对重量和相对重量都是最低。肝　预混料　４．５　５　４．８　５　脏的重量和肝脏指数四个组差异都不显著（Ｐ＞　合计　１ｏ０　１ｏｏ　１ｏｏ　１ｏｏ　０．０５）。　营养水平　消化能，ＤＥ　ｍ／ｋｇ　１４．０２　１４．０２　１４．０２　１４．０２　由此说明，仔猪饲粮中添加４％的小肽可以　粗蛋白，ＣＰ％　２１．０　２１．０　２１．０　２１．０　显著促进哺乳仔猪免疫器官脾脏的发育，从而增　赖氨酸，ｌｙ８％　１．４２　１．４２　１．４２　１．４２　蛋氨酸＋胱氨酸，　强仔猪的免疫性能，提高仔猪抵抗疾病的能力。　Ｏ．８１　Ｏ．８１　０．８１　Ｏ．８１　ｍｅｔ＋ｅｙｅ％　添加血浆蛋白粉的试验Ｂ组却没有表现出较好　钙，Ｃａ％　０．８８　０．８８　０．８８　０．８８　的作用，这可能与血浆蛋白粉的添加量较少有　磷，Ｐ％　０．７４　０．７４　０．７４　０．７４　关。Ｇａｔｎａｕ等（１９９０）认为，在饲料添加血浆蛋　使用仪器：日立７１５０型全自动生化分析仪　白粉的量为０—８％时，仔猪的生长性能与添加　系列。　量之间呈二次相关性，最佳量为６％。添加植物　１．６．３肠道微生物数量　活性肽的两个试验组对肝脏发育的促进作用不　细菌数量用平板菌落计数法，用ｌｇ肠道内　明显，其中的原因还有待于进一步分析。　表２免疫器官重量及免疫器官指数　注：同行数字肩标不同字母表示差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５），下同。　表３哺乳仔猪血清中的抗体水平　２．１．２血清抗体水平的比较分析　量，四个组几乎完全一样。但对于起最主要作用　由表３可以看出，试验四个组仔猪血清中的　的免疫球蛋白ｌｇＧ，试验Ｂ、Ｄ两组和其它两组相　ＩｇＡ和ＩｇＭ水平差异都不显著，尤其是ＩｇＡ的含　比差异显著（Ｐ＜Ｏ．０５），试验Ｃ组和Ａ组相比差　张为鹏，等：植物活性肽对哺乳仔猪免疫性能及肠道微生物影响的研究　一２１一　异不显著（Ｐ＞０．０５）。这说明哺乳仔猪的饲粮　２．２不同处理对大肠内微生物区系的影响　不同处理对大肠内大肠杆菌、沙门氏菌和乳　酸菌数量的影响如下面一组表格所示（见表４—　１，表４—２，表４—３）：　中添加血浆蛋白粉和适量的小肽可以提高血清　中的ｌｇＧ含量，能够诱导某些免疫功能的活化，　具有免疫增强剂的功效。　表４—１　不同处理对哺乳仔猪大肠内大肠杆菌数量的影响（１ｇＣＦＵ／ｇ）　表４—２不同处理对哺乳仔猪大肠内沙门氏茵数量的影响（ＩｇＣＦＵ／ｇ）　表４—３不同处理对哺乳仔猪大肠内乳酸菌数量的影响（Ｉ￣ＦＵ／ｇ）　由以上表中可以看出，试验Ｄ组大肠内的　１９９９，ｌｌ（增刊）：６９～７５．　大肠杆菌和沙门氏菌的数量显著低于Ａ、Ｂ两组　（Ｐ＜０．０５），盲肠中乳酸菌的数量明显高于对照　Ａ、Ｂ两组（Ｐ＜０．０５），结肠中乳酸菌的数量显著　高于对照Ａ组（Ｐ＜０．０５）。　大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，需氧　【２］薛晓生。等．小肽营养研究新进展［Ｊ］．饲料研究，　２００６，（６）：１９—２Ｏ．　［３］陈宝江．小肽的营养与应用［Ｊ］．中国饲料。２Ｏ０４，　（５）：３４～３６．　［４］菜元丽．小肽在动物应用中的研究概况及其应用　［Ｊ］．饲料博览，２００２，（８）：１Ｏ—ｌ２．　【５］乐国伟，等．小肽与游离氨基酸对雏鸡血液循环中　或兼性厌氧，可以导致多种幼畜下痢，如仔猪的　黄白痢以及断奶前后的水肿病。　沙门氏菌属于肠杆菌科沙门氏菌属，为致病　肽的影响【Ｊ］．畜牧兽医学报，１９９７，２８（６）：４８１～　４８８．　菌属，常侵害幼龄动物导致急性败血症、胃肠炎　及其它局部炎症的发生。　本试验饲粮中添加植物活性肽后，能够有效　抑制大肠杆菌和沙门氏菌的繁殖，增强乳酸菌等　有益菌的繁殖。　３结论　【６］陈小连，等．小肽在动物营养中的研究新动态及展望　【Ｊ］．江西饲料，２ｏｏ３，（１）：６—８．　［７］乐国伟．肽在动物蛋白质营养中的作用［Ｊ］．四川农　业大学学报，１９９６，１４（增刊）：１９—３６．　［８］张慧玲．早期断奶仔猪的营养需要［Ｊ］．饲料广角，　２Ｏ０ｏ，（３）：１７—２２．　［９］伍眷林，等．仔猪超早期隔离断奶方案的营养学原理　［Ｊ］．饲料研究，２Ｏ０２，（５）：４～７．　３．１　哺乳仔猪日粮中添加植物活性肽能够促进免　疫器官脾脏的发育，显著提高仔猪血清中的抗体水　平（Ｐ＜Ｏ．０５），从而增强哺乳仔猪的免疫性能。　３．２哺乳仔猪日粮中添加植物活性肽能够增强　大肠内乳酸菌等有益菌群的繁殖，有效抑制大肠　【ｌＯ］王恬，等．饲料潭活性肽及其营养生物学意义［Ｊ］．　畜牧与兽医，２Ｏ０２。３４（增刊）：９６～１ｏ２．　［１１］王恬，等．小肽营养素对断奶仔猪生产性能及小肠　发育的影响［Ｊ］．畜牧与兽医，２００３，（６）：５～８．　［１２］李焕友，等．小肽制荆对肉猪生产性能与猪肉品质　的影响［Ｊ］．黑龙江畜牧兽医，２ｏｏ４。（７）：８～１０．　［１３］李联杰，等．小肽对超早期断奶（ＳＥＷ）仔猪生长表　杆菌、沙门氏菌等有害菌群的繁殖。　参考文献　［１］王岗，卢德勋．肽吸收的研究进展［Ｊ］．动物学报，　现的影响【Ｊ］．饲料研究，２ｏｏ５，（６）：５－９．