HPLC法测定安胎益母丸中芍药苷的含量

・技术与方法・　２０１１年ｌ２月第４９卷第３４期　ＨＰＬＣ法测定安胎益母丸中芍药苷的含量　汪正宇赵向阳　（安徽省宿州市食品药品检验所，安徽宿州２３４０００）　【摘要】目的建立安胎益母丸中芍药苷的含量测定方法。方法采用ＲＰ－ＨＰＬＣ法，以乙腈一水（１５：８５）为流动相，检测渡长　为２３０ｎｍ。结果芍药苷在（１５．４０～１５４．００）ｇ／ｍＬ（ｒ＝Ｏ．９９９９）范围内线性关系良好，平均回收率为９９．６％，ＲＳＤ为０，６４％　（ｎ：６）。结论本文方法简便可靠，专属性强，重复性好，可用于安胎益母丸的质量控制。　【关键词】ＨＰＬＣ；安胎益母丸；芍药苷　【中图分类号】Ｒ９２７．２　【文献标识码】Ｂ　【文章编号】１６７３—９７０１（２０１　１）３４－９０—０２　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐａｅｏｎｉｌｏｒｉｎ　ｉｎ　Ａｎｔａｉｆ　Ｙｉｍｕ　Ｐｉｌｌ　ｂｙ　ＨＰＬＣ　ＷＡＮＧ　Ｚｈｅｎｇｙｕ　ＺＨＡＯ　Ｘｉａｎｇｙａｎｇ　Ｓｕｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ｉｎ　Ａｎｈｕｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｓｕｚｈｏｕ　２３４０００，Ｃｈｉｎａ　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐａｅｏｎｉｌｆｏｒｉｎ　ｉｎ　Ａｎｔａｉ　Ｙｉｍｕ　Ｐｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨＰＬＣ　Ｗａｆｔ　ｕｓｅｄ　ａｎｄ　ａｃｅｔｏｎｉｔｉｌｆｅ—ｗａｔｅｒ（１　５：８５）ｍｉｘｔｕｒｅ　ａｓ　ａ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　ｓｅｔ　ａｔ　２３０ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｐａｅｏｎｉｌｆｏｒｉｎ　ｓｈｏｗｅｄ　ａ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ａｔ　ａ　ｒａｎｇｅｒ　ｏｆ（１５．４０—１５４．ｏｏ）　ｍＬ，（ｒ＝Ｏ．９９９９）．Ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　９９．６％，ａｎｄ　ＲＳＤ　ｗａｓ　０．６４％（ｎ＝６）．　Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ｗｉｔｈ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｉｎ　ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　Ａｎｔａｉ　Ｙｉｍｕ　Ｐｉｌ１．　ＩＫｅｙ　ｗｏｒｄｓ】ＨＰＬＣ；Ａｎｔａｉ　Ｙｉｍｕ　Ｐｉｌｌ；Ｐａｅｏｎｉｌｆｏｒｉｎ　安胎益母丸是卫生部中药成方制剂第十二册的品种，由益母　草、香附、川芎、当归、续断、艾叶、白芍、白术等１７味中药组成，具　有调经、活血、安胎的功效，用于气血两亏、月经不调、胎动不安。　本研究参考相关文献　对处方中的白芍建立了含量测定方法，为　２，３供试品溶液的制备　取本品研细，精密称取４ｇ，置锥形瓶中，精密加甲醇５０ｍＬ，　密塞。称定重量，超声处理３０ｍｉｎ，用甲醇补足减失的重量，滤过，　取续滤液，经０，４５　ｍ微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。同法，制　有效控制该药物的内在质量提供了专属性强、操作简便、快速、准　确的方法，现报道如下。　得不含白芍的阴性对照液。　２．４阴性对照试验　按照本品的处方、制法制备不含白芍的模拟样品，按供试品　１仪器与试药　１．１仪器　溶液制备方法制成白芍阴性对照溶液。将芍药苷对照品溶液、供　试品溶液和白芍阴性对照溶液分别注入高效液相色谱仪进行测　定，结果表明处方中其它成分不干扰芍药苷的测定。见图１。　２．５线性关系考察　Ａｇｉｌｅｎｔ　１２６０高效液相色谱仪；十八烷基硅烷键合硅胶色谱　柱；１２６０ＶＷＤ紫外可变波长检测器；Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｃ１８色谱柱；梅特勒　ＡＢ一１３５Ｓ电子分析天平（Ｏ．０１ｍｇ）。　１．２试药　精密吸取对照品溶液１、２、４、６、８、１０　Ｌ注入液相色谱仪进　行分析。以芍药苷峰面积值为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准　曲线，得回归方程Ｙ＝Ｉ　１６４．６０Ｘ＋２８．１４，ｒ－＝０．９９９９。结果表明芍药苷　芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：　１１０７３６—２００７３２）；安胎益母丸（安徽雪枫制药厂，批号：　２００９０７０３，２００９０９０４，２００９１００３）。试剂：水为纯化水，乙腈为色谱　纯，甲醇为分析纯。　在（０．１５４　１．５４）　ｇ／ｍＬ范围内呈良好的线性关系。　２．６精密度试验　取同一供试品溶液（批号：２００９０７０３），精密量取ｌ０　Ｌ，注入　液相色谱仪，重复进样５次．测定峰面积，结果芍药苷峰面积ＲＳＤ　２方法与结果　２．１色谱条件及系统适用性试验　为０．４５％（ｎ＝５），表明精密度良好。　２．７稳定性试验　色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ　Ｃ１８（４．６ｍｍ　Ｘ　１５０ｍｍ；５．０　ｍ）；流动相：乙腈　一取同一供试品溶液（批号：２００９０７０３），每隔２ｈ进样ｌ０　Ｌ，　依法测定芍药苷峰面积值，ＲＳＤ为芍药苷０．３６％（ｎ＝６），结果表明　供试品溶液在１２ｈ内稳定。　２．８加样回收率试验　水（１５：８５）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长为２３０ｎｍ；进样量：１０　Ｌ　精密称取芍药苷对照品适量（置Ｐ２０　干燥器中真空干燥２４ｈ），　２．２对照品溶液的制备　加甲醇制成每ｌｍＬ含芍药苷０．１５４ｍｇ的溶液。　９０中国现代医生ＣＨＩＮＡ　Ｍ０ＤＥＲＮ　ＤＯＣＴＯＲ　精密称取已知含量的安胎益母丸（批号：２００９０７０３）６份，分别