鹅沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

鹅沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

冯文，金

摘

要：菊，王，王欢，路振香★

（安徽科技学院动物科学学院，安徽凤阳233100）

对送检的疑似沙门氏菌的病死鹅进行病原菌的分离鉴定及药敏试验，为沙门氏菌病的实验室诊断提供

对从病死鹅肝脏中分离得到的细菌进行培养，革兰氏染色，镜检，生化试验以

从病死鹅的肝脏中分离到一株革兰阴性单个存在的杆菌。该菌在营养琼脂上生长为半透明、灰白

参考资料，为养殖户用药提供指导。及药敏试验。表面光滑湿润、圆形、隆起的小菌落。该菌能利用色、圆形、湿润、隆起、中等大小的菌落。在麦康凯琼脂平板上为透明、利用麦芽糖只产酸，不利用乳糖和蔗糖，吲哚形成试验为阴葡萄糖既产酸又产气，MR试验为阳性，VP试验为阴性，性。该送检病死鹅是由于感染了沙门氏菌病而引起的死亡。

分离鉴定；药敏试验；鹅关键词：沙门氏菌；DOI:10援3969/J.ISSN援1671-6027援2018援06.016鹅沙门氏菌病又称鹅副伤寒，该病是由沙门氏菌引起病鹅主要表现为精神沉郁，排的，是雏鹅的一种常见传染病，病死鹅的主要病理变化为肝脏肿白色或黄白色水样稀粪等，

脾脏肿大，肾脏肿大，颜色变深，有时上面有覆盖一层包膜，气囊炎等。近年来，该病在鹅大，随着养鹅业规模化的发展，给养鹅业带来了严重的较大损失，并且沙门群中较为常见，

氏菌对外界因素的适应性较强，因此该菌可长期生存在土在鹅舍中可生存较长时间，这些特征给鹅壤、粪便和污水中，同时该菌还可导致人沙门氏菌病的防治带来了一定的困难。

再通过污染食物而引起人畜共患疾病，引起禽类发病之后，中毒，对人类的健康带来了严重威胁。

本文对2017年5月安徽明光某养鹅户送检的25日龄病死鹅进行病原的分离鉴定及药敏试验。该发病鹅表现为精神沉郁，羽毛松乱无光泽，排出绿色糊状稀粪并伴有呼吸道胰脏有症状，主要病理变化有肝脏淤血肿大，脾脏淤血肿大，直坏死灶，肾脏肿大，心包膜增厚，气囊浑浊，肠道广泛出血，特肠内充满白色、绿色稀粪，为查明病因和指导养殖户用药，对病死鹅进行病原菌的分离鉴定与药敏试验。1材料与方法1.1.11.1.2

病料

病死鹅10只。明光某养鹅户处提供病鹅，

头氨苄西林、庆大霉素、痢特灵、新霉素、

2.3.1糖类分解试验结果2.3.22.3.3

该分离菌可利用葡萄糖既产酸又

该分离菌

产气，利用麦芽糖只产酸，不能利用乳糖和蔗糖。

吲哚形成试验、MR试验及VP试验结果分离菌药敏试验结果

表1分离菌的药敏试验结果

药敏纸片

的吲哚形成试验为阴性，MR试验为阳性，VP试验为阴性。存在的中等大小杆菌。1.2.1

病原菌的分离培养及纯化

用接种环蘸取病死鹅的

肝组织分别划线接种于营养琼脂培养基与麦康凯培养基上，然后置于37℃培养箱内培养18~24h。挑取分离到的细菌进油镜下观察。行纯化，革兰氏染色，1.2.21.2.3

分离菌的生化试验分离菌的药敏试验

取分离菌的纯培养物分别进行用涂布棒刮取适量分离菌纯培

吲哚形成试验、糖类分解试验、MR试验、VP试验。

用无菌眼科镊子将药养物均匀涂布到营养琼脂培养基表面，置37℃培养18~24h。敏纸片均匀贴在其上面，2结

果

从送检病死鹅的肝脏中分离得到一

光滑湿润、株细菌，该菌在麦康凯琼脂平板上呈无色、透明、圆形、圆形、隆起的小菌落；在营养琼脂培养基上为灰白色、半透明、光滑湿润、轻度隆起的小菌落。

该分离菌为革兰阴性单个

孢哌酮舒巴坦、阿米卡星、头孢哌酮、妥布霉素、头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢噻吩、新生霉素、氧氟沙星、左氟沙星等15种抗菌药物纸片购于杭州滨和微生物试剂有限公司，生产批号是20160415。

基金项目：安徽科技学院大学生创新创业训练计划项目（2017X026）。

作者简介：冯文（1997~），男，安徽省芜湖市人，在读本科生。★通讯作者

注：氨苄西林、头孢他啶、头孢曲松、头孢呋辛、头孢噻吩、新生霉素、氧氟沙星、左氟沙星均为耐药，故未列出。

畜牧兽医科技信息2018年第6期

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试验研究

牛O-P液采样方法和注意事项

梁

勇，潘杰

（广东省东莞市动物疫病预防控制中心，广东东莞523086）

DOI:10援3969/J.ISSN援1671-6027援2018援06.017

牛O-P液是牛食道-咽部分泌物的缩写，主要作为口了解病原蹄疫等病原学检测样品，从而评估免疫抗体水平，分布状况及疫情风险。掌握正确的牛O-P液采样方法对保证样品的真实性起着关键性作用。1材

料

金属探杯、灭菌广口瓶、采样箱、记号笔、标签、

封口膜、一次性手套、口罩、防护服、水鞋、防护镜、牵引绳、保定架、鼻钳。

1.2.110.1mol/LPBS液

氯化钠80g，氯化钾2g，磷酸氢二钠30g，磷酸二氢钾2g，（0.1mol/L蒸馏水1000mL，0.04mol/LpH7.4磷酸盐缓冲液PBS液400mL,蒸馏水600mL）。1.2.2

0.5%水解乳蛋白/Earle液

氯化钠6.8g，氯化钾0.4g，氯化钙0.2g，硫酸镁0.2g，磷酸二氢钠0.14g，葡萄糖1g，10%酚红2g，水解乳蛋白5g，加双最后加双蒸蒸馏水1000mL。按配方称取各成分并逐个溶解，或69kpa高压蒸汽灭菌15min，馏水1000mL，过滤除菌，室温或4℃保存。2方

法

采样探杯在使用前经0.2%柠檬酸或2%氢

采样时动物站立保定，将氧化钠浸泡5min，再用自来水冲洗。探杯随吞咽动作送入食道上部10~15cm处，轻轻来回移动2～3次，然后将探杯拉出。

将探杯采集到的8~10mLO-P液倒入25mL

助理兽医师，作者简介：梁勇（1983~），男，广东省东莞市人，从事动物监测采样工作3

讨

论

以上的灭菌玻璃容器中,容器中应事先加有8～10mL细胞培养液（0.5%水解乳蛋白-Earle液）或磷酸盐缓冲液（0.04mol/L、pH7.4），加盖密封后充分摇匀，贴上防水标签，并做好标识，尽快放入装有冰块的冷藏箱内，然后转往-30℃冰箱冻存待检。3注意事项

尽量选择牵有鼻绳的牛，配备保定架，将牛

赶入保定架前后栅栏关上后，牵拉牛头成45°仰角，将鼻绳在保定架转角位置绕3~4圈，期间不断测试是否容易松脱，使牛头完全固定好。对没有鼻绳的牛，需要借助鼻钳尽量向前向上牵引，牛肩胛骨位置套上保定装置防止牛动作太大，期间需要注意牛角对采样人员的伤害。

以被检动物在采样前禁食（可饮水）12h，

免反刍胃内容物严重污染O-P液。如采集的O-P液被反刍要用生理盐水或自来水冲洗口腔后重新胃内容物严重污染，采样。

所使用的探杯与一头动物使用一个探杯，

防止探杯因动铁丝焊好，采样前检查是否出现松脱等情况，物反抗过大被滞留在体内。

依次为口罩、防护按顺序穿戴防护用品，

防护服、口罩、第二层手套并套在防护服袖镜、第一层手套、防护镜、防护服、水鞋、口罩、口外面。卸载顺序则为外手套、

一般为可反复内层手套，并将使用过的防护用品分开装载，使用的水鞋待消毒后循环使用，其他一次性防护用品另外包尤其是装集中销毁。在采样过程中，要首先保证动物保定好，角、蹄等具伤害性部位处于安全防护范围，保定栏结实防止动物冲撞。

通过上述试验可知：送检的病死鹅是由于感染了沙门氏该养殖户菌而导致的沙门菌病引起的死亡，经过了解得知：氨气浓的鹅舍卫生条件差，很少清理鹅粪便，鹅舍气味难闻，度大，鹅群养殖密度大，且鹅舍通风不良。选用药敏试验中的筛选出来的敏感药物-新霉素让该养鹅户使用对鹅群进行治疗，疫情很快得到控制。

参考文献

[1]成建.鹅沙门氏菌病的诊治[J].农业灾害研究,2016,6(03)：14-15,55.

[2]朱奇,等.沙门氏菌生物学研究进展[J].疾病监测与控制,2015，07：21-24.

鹅沙门近年来，随着养鹅业规模化和集约化快速发展，尤其是在一些饲氏菌病仍然经常威胁着养鹅业的健康发展，

养管理水平低下的鹅群中经常发生，因此，在该病的防治上，必须做到加强饲养管理，对用具如饮水器、饲槽等经常清洗消毒，鹅群尽干净后消毒，对鹅舍、场地也要尽量经常清理，量饲喂青绿饲料，提高鹅体的抗病能力。对鹅群所在的水源要尽要清洁卫生，尽量远离受到污染的水源。鹅群一旦病鹅，最好通过药敏试快诊断，由于沙门菌极易产生耐药性，因此，验筛选出敏感的抗菌药物用于治疗，只有这样才能尽快控制疫情。

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2018年第6期畜牧兽医科技信息