盐酸利多卡因纳米高分子脂质体的制备与体外透皮实验研究

天津医药２０１３年４月第４１卷第４期　３４ｌ　ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．０２５３－９８９６．２０１３．０４．０１６　盐酸利多卡因纳米高分子脂质体的制备与　体外透皮实验研究　李雨辰　曹岩　王悦　王汉杰　李芹　李长义’张连云　【摘要】　目的采用赖氨酸壳聚糖十八烷基季铵盐（ＯＱＬＣＳ）／胆固醇包载盐酸利多卡因制备纳米高分子脂质体　（ＬＩＤ—ＰＬｓ），并研究其体外透皮渗透情况。方法采用反相蒸发法制备ＬＩＤ—ＰＬｓ和盐酸利多卡因传统脂质体　（ＬＩＤ—ＣＬｓ），用激光粒度仪／Ｚｅｔａ电位仪测试其粒径；建立测定盐酸利多卡因浓度的ＨＰＬＣ法；使用离体小鼠皮和Ｆｒａｎｚ　扩散池进行体外透皮实验，评价不同时间点ＬＩＤ—ＰＬｓ、ＬＩＤ—ＣＬｓ和盐酸利多卡因注射液（ＬＩＤ—ＩＪ）的体外透皮渗透情　况。结果ＬＩＤ—ＰＬｓ组粒径小于ＬＩＤ—ＣＬｓ组『（６１．２￣８．１４）ｎｍ掷（２１９￣７．５１）ｎｍ］。所建立的ＨＰＬＣ法专一性好，盐酸利　多卡因的保留时间为３．８９９　ｍｉｎ，空白纳米高分子脂质体、空白透皮接收液对盐酸利多卡因的测定均无影响，其标准曲　线方程为　０．０５１　２．７０１（ｒ＝０．９９９　９）。ＬＩＤ—ＰＬｓ组在５ｍｉｎ、１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、２　ｈ，４　ｈ，６　ｈ、８　ｈ、１２　ｈ及２４　ｈ的平均累积透　过量均明显高于ＬＩＤ—ＣＬｓ组和ＬＩＤ—ＩＪ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。ＬＩＤ—ＣＬｓ组在１０　ｍｉｎ、３０　ｍｉｎ、１．５　ｈ、２　ｈ、４　ｈ．６　ｈ、８　ｈ、　１２　ｈ、２４ｈ的平均累积透过量均明显高于ＬＩＤ—ＩＪ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。结论释放行为，所建立的ＨＰＬＣ方法准确可靠。　ＬＩＤ—ＰＬｓ制备简单，具有良好的透皮　【关键词１盐酸利多卡因；纳米结构；脂质体；壳聚糖；赖氨酸；药物利用；体外研究　Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ－ｌｏａｄｅｄ　Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ　Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ　ａｎｄ　Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｔｈｒｏｕｇｈ　Ｍｏｕｓｅ　Ｓｋｉｎ　ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　ＬＩ　Ｙｕｅｈｅｎ。ＣＡＯ　Ｙａｈ　，ＷＡＮＧ　Ｙｕｅ　，ＷＡＮＧ　Ｈａｎｊｉｅ　，ＬＩ　Ｑｉｎ　，ＬＩ　Ｃｈａｎｇｙｉ　，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉａｎｙｕｎ’　，１　Ｔｈｅ　Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ死０ｎｉｎ　ｆＭｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｉｆｎ　３０００７０，Ｃｈｉｎａ：２　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆＮａｎｏｂｉｏｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｆＭａｔｏｅｒｉａｌｓ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｔｉａｎｉｆｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ；３　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｆＰｈａｒｏｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｂａｓｉｃ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，　Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｔｈｅ　ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ－ｌｏａｄｅｄ　ｌｙｓｉｎｅ　ｍｏｄｉｉｆｅｄ　ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ　ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ　（ＬＩＤ－ＰＬｓ）ａｎｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｉｔｓ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｍｏｕｓｅ　ｓｋｉｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＬＩＤ－ＰＬｓ　ａｎｄ　ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｈｙｄｒｏ—　ｃｈｌｏｒｉｄｅ－ｌｏａｄｅｄ　ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ　ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ（ＬＩＤ－ＣＬｓ）ｗｅｒｅ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｒｅｖｅｒｓｅ－ｐｈａｓｅ　ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｄｉａｍｅｔｅｒ　ａｎｄ　ｚｅｔａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ＬＩＤ—ＰＬｓ　ａｎｄ　ＬＩＤ－ＣＬｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｄｙｎａｍｉｃ　ｌｉｇｈｔ　ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ（ＤＬＳ）ｕｓｉｎｇ　ａ　Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎ　Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ．Ａ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｍｏｕｓｅ　ｓｋｉｎ　ａｎｄ　Ｆｒａｎｚ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＬＩＤ－ＰＬｓ，ＬＩＤ－ＣＬｓ　ａｎｄ　ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（ＬＩＤ－Ｈ）．　Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｄｉａｍｅｔｅｒ　ｏｆ　ＬＩＤ－ＰＬｓ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｓｍａｌｌｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ＬＩＤ－ＣＬｓ　ｆ６１．２±８．１４　ｎｍ　ｖｓ　２１９￣７．５１　ｎｍ）．Ｔｈｅ　＾　ｓｐｅｃｉｉｆｃｉｔｙ　ｏｆ　ＨＰＬＣ　ｗａｓ　ｈｉｇｈ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｙ＝０．０５ｌＸ－２．７０１．ｒ＝０．９９９　９．　ｒｈｅ　ｍｅａｎ　ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ　ｐｅｒｍｅ－　ａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ａｔ　５　ｍｉｎ，１０　ｍｉｎ，３０　ｍｉｎ，２　ｈ，４　ｈ，６　ｈ，８　ｈ，１２　ｈ　ａｎｄ　２４　ｈ　ａｆｔｅｒ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ＬＩＤ－ＰＬｓ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ＬＩＤ－ＣＬｓ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ＬＩＤ－ＩＪ　ｇｒｏｕｐ　＜０．０５　ｏｒ　Ｐ＜０．ｏ１）．Ｔｈｅ　ｍｅａｎ　ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉ・　ｄｏｃａｉｎｅ　ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎ　ＬＩＤ－ＣＬｓ　ｇｒｏｕｐ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ＬＩＤ－ＩＪ　ｇｒｏｕｐ　ａｔ　１０　ｍｉｎ，３０　ｍｉｎ，１．５　ｈ，２　ｈ，４　ｈ，６　ｈ，８　ｈ，１２　ｈ　ａｎｄ　２４　ｈ　ａｆｔｅｒ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｆＰ＜０．０５　ｏｒ　Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＬＩＤ—ＰＬｓ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｉｔ　ｈａｓ　ｇｏｏｄ　ｐｅｍｅ－ｒ　ａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅ　ＨＰＬＣ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】ｌｉｄｏｃａｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ；ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ；ｃｈｉｔｏｓａｎ；ｌｙｓｉｎｅ；ｄｒｕｇ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　镇痛是牙科治疗的基础，目前通过表面涂布的　方法以达到无痛局麻的相关研究少见。盐酸利多　卡因起效快、维持时间长，但渗透力较差，不能直接　作为表面麻醉剂使用。本课题组前期已成功制备　了新型阳离子赖氨酸壳聚糖十八烷基季铵盐　（ＯＱＬＣＳ）／胆固醇（ｃｈｏ１）纳米高分子脂质体　，制备方　法简单，稳定性好　，药物包封率高，具有良好的控　国家自然科学基金资助项目（项目编号：８１０７０８７１）；天津市　自然科学基金重点资助项目（项目编号：ｌ１ＪＣｚＤＪｃ２０４００）　作者单位：１天津医科大学口腔医院（邮编３０００７０）；２天津大学　材料科学与工程学院纳米生物技术研究所；３天津医科大学基础医　学院药理学教研室　通讯作者Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｑｉｎｑｌ＠１６３．ｃｏｎ　３４２　释功能　。目前国内外亦少见应用ＯＱＬＣＳ包载盐酸　利多卡因进行牙科无痛治疗的相关报道。本研究　使用ＯＱＬＣＳ／ｃｈｏｌ包载盐酸利多卡因制备纳米高分　子脂质体（ＬＩＤ—ＰＬｓ），并比较其与盐酸利多卡因注　射液（ＬＩＤ—ＩＪ）和盐酸利多卡因传统脂质体　（ＬＩＤ—ＣＬｓ）体外透皮渗透情况的差异，初步探讨盐　酸利多卡因纳米高分子脂质体作为口腔表面麻醉　剂的可能性。　１材料与方法　１．１材料ＳＰＦ级昆明种小鼠２４只，雌雄不拘，体质量（２５＋　２）ｇ，由天津医科大学动物实验中心提供。Ａｇｉｌｅｎｔ　１　１００高效　液相色谱仪（美国Ａｇｉｌｅｎｔ），ＲＹＪ一６Ａ型药物透皮扩散实验仪　（上海黄海药检仪器有限公司），ＲＥ一５２Ａ型旋转蒸发仪（上海　亚荣生化仪器厂），透射电子显微镜（ＪＥＯＬ２１ＯＯＣＸⅡ，１３本），　激光粒度仪／Ｚｅｔａ电位仪（ＢＩ９０ｐｌｕｓＢｒ０ｏｋｈａｖｅｎ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｃｏｒ．　ｐｏｒａｔｉｏｎ，美国），ＰＢ１５３一Ｓ精密分析天平（ＭＥＴｒＬＥＲ　ＴＯＬＥ．　ＤＯ，瑞士）。盐酸利多卡因（纯度＞９９．Ｏ％，山西新宝源医药有　限公司，批号：２０１　１０５２０），ＯＱＬＣＳ（天津大学材料学院纳米生　物技术研究所自制），胆固醇（天津市光复精细化工研究所），　盐酸利多卡因注射液（规格：０．１　ｇ／５　ｍＬ，批号２０１１０３１２，上海　禾丰制药有限公司），甲醇为色谱纯，二氯甲烷、磷酸二氢钾　均为市售分析纯。　１．２　ＬＩＤ—ＰＬｓ的制备参照文献［４】采用反相蒸发法。用激　光粒度仪／Ｚｅｔａ电位仪测试载药纳米粒子的粒径为（６１．２±　８．１４）ｎｍ，多分散性指数为０．１８４￣０．０２３，Ｚｅｔａ电位为（６．５１±　２．０５）ｍＶ，采用葡萄糖凝胶柱层析法测定包封率为（７０．５±　３．２）％（ｎ＝５）。　１．３　ＬＩＤ—ＣＬｓ的制备仅使用磷脂替代ＯＱＬＣＳ，其他方法同　上。测得的粒径为（２１９＋７．５１）ｎｍ，多分散性指数为０．３０￣　０．０３，Ｚｅｔａ电位为（０．７５￣０．７８）ｍＹ（ｎ＝５）。采用葡萄糖凝胶柱层　析法测定包封率为（６２．１￣４．３）％（ｎ：５）。　１．４高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）￣ｑ定盐酸利多卡因浓度的方法　学建立（１）色谱条件。色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ　ｚｏｒｂａｘ　ＳＢ—Ｃ１８色谱　柱（１５０ｍｍｘ４．６ｍｍ，５　Ｉｘｍ）；流动相：甲醇一０．０１Ｍ磷酸二氢钠　（Ｖ：Ｖ＝７５：２５）；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：３５℃；检测波长：２６０　ｎｍ；进样量２０　。（２）专一性考察。分别将空白纳米高分子　脂质体、盐酸利多卡因对照品溶液、盐酸利多卡因纳米高分　子脂质体、空白透皮接收液、透皮接收液样本进样，在上述色　谱条件下测定，考察该ＨＰＬＣ检测方法的专一性。（３）标准曲　线的制备。精密称取干燥的盐酸利多卡因２５　ｍｇ于２５　ｍＬ容　量瓶中，加双蒸水溶解并稀释到刻度，制成浓度为１　ｓ／Ｌ的储　备溶液。采用倍半稀释法，精密配制０．５、１、５、１０、５０、１００及　５００　ｍｓ／Ｌ的盐酸利多卡因系列标准溶液，按照上述色谱条件　进行测定。以盐酸利多卡因的峰面积为横坐标，浓度为纵坐　标进行线性回归，求得盐酸利多卡因的标准曲线方程。（４）精　Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１３，Ｖｏｌ　４１　Ｎｏ　４　密度实验。使用标准曲线项下制备的盐酸利多卡因储备溶　液，分别配制１、５０、５００ｍｇ／Ｌ的低、中、高３个浓度的盐酸利多　卡因标准溶液，分别于同日内测定５次，计算日内精密度；每　日测定１次，连续测定５日，计算日间精密度。其日内精密度　０．５１％一１．０１％，日间精密度０．８６％～１．３５％。（５）回收率实验。　使用标准曲线项下制备的盐酸利多卡因储备溶液，分别配制　１、５０及５００　ｍｇ／Ｌ的低、中、高３个浓度的盐酸利多卡因标准　溶液，分别测定５次，将峰面积代人标准曲线计算出药物浓　度，与理论浓度比较，计算回收率。其回收率为９９．５％～　１０２．２％。　１．５体外透皮实验（１）离体皮肤的制备。取２４只小鼠脱　颈处死后剥离皮肤，立即用电推剃除腹部毛，注意不伤及角　质层，按扩散池大小（外直径２．７５　ｃｍ）剪取脱毛后皮肤，除尽　皮下黏膜及脂肪组织，用蒸馏水、生理盐水反复洗至无白色　混浊，浸于生理盐水中，置冰箱４℃保存，２４　ｈ内使用　。（２）实　验分组。按干预方式不同分为空白组、ＬＩＤ—ＰＬｓ组、ＬＩＤ—ＣＬｓ　组及ＬＩＤ—ＩＪ组，每组６只小鼠。（３）体外透皮实验。将离体鼠　皮恢复至室温，用生理盐水冲洗后，用滤纸吸干表面液体，置　于Ｆｒａｎｚ扩散池（有效释药面积为２．２７　ｅｍ　，接收室容积为７　ｍＬ）的供给室与接收室之间，角质层朝向供给室。接收室中　加满ｐＨ值为６．８的ＰＢＳ溶液作为接收介质，排尽气泡，使接　收液与皮肤紧密接触。接受介质温度为（３７＋０．５）　，磁力搅　拌速度为４００　ｒ／ｍｉｎ。各组分别在供给室中加入０．５　ｍＬ双蒸　水、ＬＩＤ—ＰＬｓ、ＬＩＤ—ＣＬｓ或ＬＩＤ—ＩＪ，分别于实验开始后５　ｍｉｎ、　１０　ｍｉｎ、３０　ｍｉｎ、１　ｈ、１．５　ｈ、２　ｈ、４　ｈ、６　ｈ、８　ｈ、１２　ｈ、２４　ｈ从接收　室取样管精密吸取４００　ＩｘＬ接收液ｆ同时补充等量等温ＰＢＳ溶　液），接收液经０．４５　Ｉｘｍ微孔滤膜过滤后，取２０　滤液进样测　定，将峰面积代入标准曲线计算药物浓度，按以下公式计算　各时间点的单位面积累积透过量（Ｑ，ｉｘｇ／ｃｍ２）　。　”一１　Ｑ＝［Ｃｎ￣Ｖｎ＋∑（Ｃｉ　ｘ　ｖｉ）］／Ａ　ｆ＃１　式中ｃｎ为第ｎ个取样点测得的药物浓度，单位为ｍｇ／Ｌ；　ｃｉ为第ｉ个取样点的药物浓度，单位为ｍｓ／Ｌ；Ｖｎ为接收室中　接收液的总体积；Ｖ。为取样体积，本实验取值为０．４　ｍＬ；Ａ为　透皮面积。　１．６统计学方法采用ＳＰＳＳ　１６．０软件进行统计学分析。符　合正态分布的计量资料以　表示，多组间比较采用单因素　方差分析，组间的两两比较：方差齐采用ＬＳＤ—ｔ法，方差不齐　采用Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓＴ３检验，Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　２结果　２．１　ＨＰＬＣ专一Ｉ生检测及标准曲线计算结果盐酸　利多卡因峰形良好，无杂质峰干扰。盐酸利多卡因　的保留时间为３．８９９　ｍｉｎ，空白纳米高分子脂质体、　空白透皮接收液对盐酸利多卡因的测定均无影响，　见图１。以盐酸利多卡因的峰面积为横坐标，浓度　为纵坐标进行线性回归，得到盐酸利多卡因的标准　３４４　Ｔｉａｎｊｉｎ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１３，Ｖｏｌ　４１　Ｎｏ　４　进行修饰，合成生理条件下水溶的赖氨酸壳聚糖，　参考文献　［Ｉ］Ｗａｎｇ　Ｈ，Ｚｈａｏ　Ｐ，Ｌｉａｎｇ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｎｓｔｕｃｔｒｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｃａｔｉｏｎｉｃ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ　ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ　ｆｏｒｍｅｄ　ｆｒｏｍ　ＰＥＧｌａｔｅｄｏｃｔａｄｅｃｙｌ－ｑｕａｔｅｒｎｉｚｅｄ　壳聚糖主链上引入了赖氨酸分子，增加了分子中氨　基（一ＮＨ：）含量ｍ。ＯＱＬＣＳ是赖氨酸修饰的壳聚糖衍　生物，因其表面带有正电荷，可增加与生理条件下　带负电的细胞和皮肤表面的亲和力，增强药物渗透　能力［８１和药物控释能力［９１，是制作透皮给药的理想　材料。　ｌｙｓｉｎｅ　ｍｏｄｉｉｅｄ　ｃｈｉｆｔｏｓａｎ／ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ　ｆｏｒ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ｓｔｏｒａｇｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｕｐｔａｋｅ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ［Ｊ】．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　Ｂｉｏｅｎｇ，２０１０，１０６（６）：　９５２—９６２．　『２２］李双艳，郝丽娟，韩磊，等．赖氨酸修饰壳聚糖磁性超微载体的制　备和表征［Ｊ】．高分子通报，２００７，２Ｏ（７）：３２—４０．　［３】Ｌｉａｎｇ　ＸＦ，Ｗａｎｇ　ＨＪ，Ｔｉａｎ　Ｈ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｎｏｖｅｌ　ｑｕａｔｅｒｎｉｚｅｄｃａｒｂｏｘｙ—　ｍｅｔｈｌ　ｅｈｉｔｏｓａｎ　ｗｉｔｈ　ｍｏｉｓｔｕｒｅ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ－ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　本研究显示随着透皮时间越长，３种药物的平　均累积透过量总的趋势ＬＩＤ—ＰＬｓ＞ＬＩＤ—ＣＬｓ＞ＬＩＤ—ＩＪ，　ｄｒｕｇ　ｌｏａｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｙ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｐｈｙｓ　Ｃｈｉｍ　Ｓｉｎ，２００８，２４（２）：２２３—２２９．　表明ＬＩＤ—ＰＬｓ较ＬＩＤ—ＣＬｓ、ＬＩＤ—ＩＪ在渗透量方面有　明显的优势，且透皮速度较快，给药后５　ｍｉｎ即有较　多药物透过，而ＬＩＤ—ＩＪ在５　ｍｉｎ时没有药物透过，或　［４］赵明，李安民，常津，等．改性壳聚糖包载的磁性紫杉醇纳米微粒　的制备及对恶性脑胶质细胞瘤的抑制作用［Ｊ］．生物医学工程学　杂志，２０１　１，２８（３）：５１３—５１６．　可忽略不计，ＬＩＤ—ＰＬｓ　２４　ｈ累积透过总量也高于　ＬＩＤ—ＣＬｓ和ＬＩＤ—ＩＪ，表明ＯＱＬＣＳ包载盐酸利多卡因　可促进盐酸利多卡因的透皮速度和透皮量。粒径　【５］申明乐，王刚，李建成，等同来吉兰贴片的制备及其体外透皮释放　量的研究［Ｊ］．中国新药杂志，２０１０，１９（２０）：１９０７—１９１０．　［６］Ｎｔｉｍｅｎｏｕ　Ｖ，Ｆａｈｒ　Ａ，Ａｎｔｉｍｉｓｉａｒｉｓ　ＳＧ．Ｅｌａｓｔｉｃ　ｖｅｓｉｃｌｅｓ　ｏｒ　ｆｔｒａｎｓｄｅｒ—　ｍａｌ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｏｆ　ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ　ｄｒｕｇｓ：ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　可影响药物的透皮量。有研究报道，使用包载荧光　物质的脂质体研究透皮渗透情况结果显示，粒径为　１２０　ｎｍ左右的脂质体，透皮作用比粒径为２５０　ｎｍ左　右的脂质体明显增强ｎｑ。本研究使用纳米技术，将　ＯＱＬＣＳ替代磷脂，ＬＩＤ—ＰＬｓ和ＬＩＤ—ＣＬｓ相比，其粒径　更小（６１．２＋８．１４　ｎｍ　２１９＋７．５１　ｎｍ），包封率更高，　更有利于药物的透皮渗透。本研究使用的ＨＰＬＣ方　法专一性高，高分子纳米脂质体材料ＯＱＬＣＳ／ｃｈｏｌ以　及空白鼠皮的透过物质不干扰药物的测定，盐酸利　多卡因在０．５—５００　ｍｇ／Ｌ之间线性关系良好，精密度　及回收率高，操作简便，满足了定量分析要求。　综上所述，本研究初步研究的ＬＩＤ＇ＰＬｓ的体外　透皮情况结果表明，与ＬＩＤ—ＣＬｓ和ＬＩＤ—ＩＪ相比，　ＬＩＤ—ＰＬｓ更容易透皮，且透皮速度快，利多卡因的透　过量高，可为进一步研究经皮肤或黏膜给药的新型　表面麻醉剂提供参考。　ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｖｅｓｉｃｌｅ　ｔｙｐｅｓ【Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｍｅｄ　Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１２，８（４１：６１３—６２３．　［７】Ｈｅ　Ｗ，Ｇｕ０　Ｘ，Ｚｈａｎｇ　Ｍ．Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｎ－ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ　ｃｈｉｔｏｓａｎ　ｆｏｒ　ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ『Ｊ】．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｐｈａｒｍ，２００８，３５６　（１—２）：８２—８７．　【８　Ｗａｎｇ　Ｈ，Ｚｈａｎｇ　Ｓ，Ｌｉ８］ａｏ　Ｚ，ｅｔ　ａ１．ＰＥＧｌａｔｅｄ　ｍａｇｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ　ｌｉｐｏ－　ｓｏｍｅ　ａｎｃｈｏｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ＴＡＴ　ｏｒ　ｆｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｏｆ　ｄｒｕｇｓ　ａｃｒｏｓｓ　ｔｈｅ　ｂｌｏｏｄ－ｓｐｉ—　ｎａｌ　ｃｏｒｄ　ｂａｒｒｉｅｒ【Ｊ］．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ，２０ｔ０，３１（２５）：６５８９－６５９６．　【９］Ｈａｓａｎｏｖｉｃ　Ａ，Ｚｅｈｌ　Ｍ，Ｒｅｚｎｉｃｅｋ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｉｔ０ｓａｎ—ｔｒｉｐｏｌｙｐｈ０ｓｐｈａｔｅ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ　ａｓ　ａ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｓｋｉｎ　ｄｒｕｇ　ｄｅｌｉｖｅｒｙ　ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　ａｃｉｃｌｏｖｉｒ　ｗｉｔｈ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｊ　Ｐｈａｒｍ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００９，６１（１２）：　１６０９—１６１６．　［１０］Ｓａｎｔｏｓ　ＣＭ，ｄｅ　Ｏｌｉｖｅｉｒａ　ＲＢ，Ａｒａｎｔｅｓ　ＶＴ，ｅｔ　ａ１．Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ　Ｂ—ｌｏａｄ—　ｅｄ　ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ　ｏｒ　ｆｔｏｐｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｕｔａｎｅｏｕｓ　ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｓｉｓ：ｄｅ—　ｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｓｋｉｎ　ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ　ｓｔｕｄｉｅｓ　［Ｊ】．Ｊ　Ｂｉｏｍｅｄ　Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０１２，８（２）：３２２－３２９．　（２０１２—０７—１６收稿２０１２—０９—２５修回）　陆荣展）　（本文编辑读者・作者・编者　《天津医药》在线投稿须知　《天津医药》实行网上在线投稿，作者可登录“天津医药”网站作者区“在线投稿”版块进行投稿，网址ｈｔｔｐ：／／　ｗｗｗ．ｔｊｙｙｂｊｂ。ａｃ．ｅｌｌ。　１进入“在线投稿”点击“注册”注册后进行投稿，按照系统提示完成稿件的上传。　２网上投稿成功后，我们会尽快接受并回复您正式稿号，请您将单位介绍信寄来，并速将审稿费（每篇文章５Ｏ元）通　过邮局汇款至：天津市和平区贵州路９６号Ｄ座，《天津医药》编辑部收，邮编：３０００７０。　请在汇款单上注明论文编号和第一作者姓名，未交纳审稿费的文章不能进入审稿程序。　３作者可根据我刊Ｅ—ｍａｉｌ发送的回执提示，登陆本刊网站“在线查稿”版块，查看稿件审理情况。