1.实验目的
学习用输尿管插管记录尿量的方法. 观察几种因素对尿生成的影响. 2.实验原理
尿生成的过程包括:肾小球的滤过作用,肾小管与集合管的重吸收作用,肾小管与集合管的分泌作用.凡是影响这些过程的因素,都会因影响尿生成而引起尿量变化. 3.实验对象与实验材料
家兔常规手术器械、止血钳、剪毛剪、眼科剪、眼科镊、玻璃分针、棉花、滴管、纱布、棉线、温热生理盐水、烧杯、污物缸、兔手术台、塑料绳、棉签、动脉夹、注射器、照明灯、保护刺激电极、支架、PowerLab生理实验系统、生物电输入线、受滴器、输尿管插管、接尿器皿、麻醉剂(2%戊巴比妥钠2ml/Kg)、肝素溶液(200U/ml) 、20%葡萄糖溶液、10%Na2SO4溶液、肾上腺素(1:10000)、垂体后叶素(5U/ml)、20%甘露醇. 4.实验方法与步骤
家兔称重,麻醉(耳缘静脉注射2%戊巴比妥钠2ml/Kg)、固定(仰式)、剪毛、剪颈部皮肤6~7cm,钝性分离颈部肌肉等组织.暴露气管、穿线、手术刀手术剪T形切口,事先准备好的棉签将气管中的血块弄出,插好气管插管并结扎.分离右侧迷走神经穿线备用. 输尿管和膀胱血管丰富,在插管之前先注射肝素抗凝(200U/kg体重).
膀胱插管.先用棉线从输尿管下方穿线绕到膀胱底部将膀胱与尿道连接处结扎紧,防止尿液从尿道排出,如果膀胱未充盈,可先用注射器注射生理盐水进入膀胱,让膀胱壁变薄后用大注射针头刺破膀胱壁,然后从穿孔处将充满生理盐水的细塑料管或插管插入膀胱内,确保尿液可进入插管,然后将膀胱壁和插管一起结扎并固定好,排出气泡,确保导尿管道充满“尿液”.
安装调节好受滴装置,先打开Powerlab,后打开Chart软件,设置1个通道,调节通道1(100mV,10Hz,DC直流电)和刺激器的参数.
记录一段“正常”尿生成:观察有滴尿即可,并在通道1曲线可显示出尿滴的标记波动变化.耳缘静脉注射温热生理盐水30ml(速度可快),观察尿滴和通道1的标记. 待尿量平稳后,同法注射肾上腺素溶液~,观察尿滴标记. 同上,注射15ml葡萄糖溶液观察.观察尿滴标记. 注射垂体后叶素2单位观察.观察尿滴标记. 注射10%Na2SO4 溶液4ml.观察尿滴标记.
刺激右侧迷走神经200或300脉冲,观察家兔反应和尿滴变化. 注射20%甘露醇3ml/kg体重.观察尿滴标记. 5.实验结果
图 正常尿液生成图 图 注射生理盐水后尿液变化图 图 注射肾上腺素后尿液变化图 图(1) 注射葡萄糖后尿液变化图(1) 图(2) 注射葡萄糖后尿液变化图(2)
图 注射垂体后叶素后尿液变化图 图 注射硫酸钠溶液后尿液变化图
图(1) 刺激右侧迷走神经后尿液变化图(1) 图(2) 刺激右侧迷走神经后尿液变化图(2)
图 注射甘露醇后尿液变化图
6.实验分析与讨论
根据图可知,注射生理盐水后尿量显着增加.
原因:①血液稀释,血浆胶体渗透压下降,因为肾小球有效滤过压=肾小球毛细血管压—(血浆胶体渗透压+肾小囊内压).静脉注射大量生理盐水后肾小球有效滤过压增加,滤过增加,尿
液增加(主要因素).②大量生理盐水进入血管,血容量增加,肾血浆流量增加,滤过增加,尿液增加.③血容量增加,刺激左心房、胸腔大静脉的容量感受器,冲动沿迷走神经传导,刺激下丘脑视上核和室旁核,抗利尿激素(ADH)分泌降低,远曲小管和集合管对水的重吸收作用减弱,尿液增加.④血容量增加,血压增加,对颈动脉窦和主动脉弓压力感受器刺激增加,通过神经上传使ADH分泌降低.⑤血量增加,对心房的刺激增加,心房钠尿肽分泌增
加,利尿、利钠增加,肾小球滤过率增加,尿液增加. 根据图可知,注射肾上腺素后尿量减少.
原因:主要由于肾入球小动脉收缩,肾小球毛细血管血压和血量均减少,有效滤过压下降,
原尿滤过作用减少.注射肾上腺素还会使肾动脉血管收缩,肾血流量减少,肾小球滤过作用减弱,尿量减少.
根据图(1)(2)可知,注射葡萄糖后尿量增加.
原因:静脉注射葡萄糖,由于肾小管对葡萄糖的重吸收具有一定限度(肾糖阈160~180mg/ml),实验中葡萄糖的注射量远远超过其肾糖阈,经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收,小管液中葡萄糖含量增多,渗透压增高,妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收,小管液中的Na+浓度被稀释而降低,故Na+的重吸收也减少,氯化钠及水的排出均增加,水随葡萄糖一起排出,尿量增加.
根据图可知,注射垂体后叶素后尿量减少.
原因:垂体后叶素含有ADH,远曲小管和集合管对水的重吸收作用增强,尿液减少.
根据图可知,注射硫酸钠后尿量迅速增加.
原因:Na2SO4主要作用部位是髓袢升支粗段,硫酸根与氯离子竞争受体抑制该段Na+-K+-2Cl-共
同转运系统,使外髓高渗透状态遭到破坏,尿液浓缩减弱,减少了大量水分的重吸收,使尿量增加.
根据图可知,刺激右侧迷走神经后尿量减少.
原因:刺激迷走神经导致血压下降,心输出量减少,肾小球毛细血管血压下降,有效滤过压下降,肾小球滤过作用减弱,尿量减少.
根据图可知,注射甘露醇后尿液分泌增加.
原因:甘露醇是一种临床上常用的渗透性利尿药,甘露醇静脉注射后,经过肾小球它与血浆的水分一起滤过,但它在肾小管和集合管完全不被重吸收.因此它能提高血浆渗透压,当其通过肾脏排出体外时,可增加水分和部分离子的排出,产生渗透性利尿作用. 7.注意事项
耳缘静脉注射的部位要偏上,预留位置或留针法,多次注射实验项目.
输尿管和膀胱血管丰富,注意打肝素,区分输精管与输尿管等,插管要妥善固定. 膀胱插管术,注意结扎膀胱与尿道连接处. 注意导尿的管道不被压迫或堵塞.
实验项目要按顺序搭配,利尿和减尿的对比. 刺激迷走神经要小心家兔心脏停止跳动.
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