油菜秸秆的无公害处理研究

中国草食动物　２０１０年　油菜秸秆的无公害处理研究　陈丽园，夏伦志，吴　东　（安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，合肥２３００３１）　摘要：试验通过改良氨化、混合青贮及添加微生物的方法对油菜秸秆进行饲用化处理，结果表明，混合青　贮处理油菜秸秆后可有效降解其中的纤维素等化学　收稿日期：２０１０－０４—０８　组成；通过饲养试验表明采用混合青贮及改良氨化　持其生长。同时表明所筛选的ＢＦ１４菌株通过发酵　基金项目：安徽省自然科学基金（０７０４１１０２７）及“江淮平原区秸秆还　后的油菜秸秆可代替一部分的后备母羊日粮且能维　田循环利用技术集成研究与示范”（２ＯＯ７ＢＡＤ８９　Ｂ１Ｏ　７）　作者简介：陈丽园（１９８１一）．女，主要从事饲料及环境微生物方面的研究　通讯作者：夏伦志，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｌｚ１６８＠１６３．ｃｏｌＴＩ　文章编号：１００７—９７２６（２０１０）０４－００３６—０３　中圈分类号：￥５４　后可降解油菜秸秆纤维素６３．５２　，对于油菜秸秆　与畜禽粪便联合堆肥有重要研究价值。　关键词：油菜秸秆；氨化；青贮；堆肥　种绵羊都以Ｐｒ　为优势基因。　表２　Ｐｒ的基因型频率和基因频率　项目　ＦＦ　表４可见，策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊在血清转铁　蛋白（Ｔｆ）、前白蛋白（Ｐｒ）、血清白蛋白（Ａｌｂ）３个位点　的预期基因平均杂合度较高。　Ｆ　基因型频率　ＳＳ　ＦＳ　基因频率　Ｓ　表４　Ｎｅｉ氏预期基因平均杂合度（Ｈ）　策勒黑羊　ｏ．２６６　７　ｏ．４６６　７　ｏ．２６６　７　０．５９９　９　ｏ．４００　１　和田羊　ｏ．３２１　４　ｏ．４２８　６　０．２５０　ｏ　ｏ．５５３　６　０．４４６　４　卡拉摩尔羊　ｏ．１６６　７　ｏ．５３３　３　ｏ．３００　ｏ　０．６８３　３　ｏ．３１６　７　２．１．３　３种绵羊血清白蛋白（Ａｌｂ）的基因型频率和基　因频率　由表３可见，策勒黑羊血清白蛋白（Ａｌｂ）位　点检测出６种基因型，缺少ＷＶ型和ＤＳ型；和田羊血　清白蛋白（Ａｉｂ）位点检测出６种基因型，缺少ｗＶ型　和ＤＳ型；卡拉库尔羊血清白蛋白（Ａｌｂ）位点检测出６　种基因型，缺少ＦＦ型和ＳＳ型。在基因型频率上，３种　３讨论　基因杂合度（Ｈ）又称基因多样度，反映各群体在　ｎ个位点上的遗传变异。一般认为它是度量群体遗　传变异的一个最适参数　。本研究结果表明：策勒　黑羊、和田羊、卡拉库尔羊在血清转铁蛋白（Ｔｆ）、前　白蛋白（Ｐｒ）、血清白蛋白（Ａｌｂ）３个位点的预期基因　平均杂合度分别为０．５３１　８、０．５４２　３、０．５１２　４，基因　绵羊都以Ａｌｂ　为优势基因型。在基因频率上，３种绵　羊都以Ａｌｈｗ为优势基因，策勒黑羊和和田羊缺少　Ａｌｂ　和Ａｌｂ　基因。　表３　ＡＩｂ的基因型频率和基因频率　平均杂合度较高。其中和田羊和策勒黑羊群体的预　期基因平均杂合度相对较高，说明了和田羊和策勒　黑羊群体基因型一致性差，遗传变异大，因此认为和　田羊和策勒黑羊的遗传多样性丰富，具有较大的遗　传潜力，为今后和田羊和策勒黑羊的定向培育新类　型提供了理论依据。　参考文献　Ｅ１］Ｌｉ　Ｃ　Ｃ．群体遗传学［Ｍ］．吴仲贤。译．北京：农业出版社，１９８１：１—１０．　Ｅ２］牛荣，商海涛，魏泓，等．版纳小耳猪近交系５家系３５个微卫星位座　２．２策勒黑羊、和田羊、卡拉库尔羊遗传变异性　由　的遗传分析ＥＪ］．遗传学报，２００１，２８（６）：５１８—５２６．　第３Ｏ卷第４期　草原与饲料　湖北、湖南、贵州、江西、安徽等长江流域省份是中　国油菜主产区，油菜面积和总产量占世界的四分之一。　随着国际油价大涨，生物燃料（如油菜、玉米）的大面积　种植将是必然趋势。然而相对于油菜的大面积种植而　言，国内对油菜秸秆的利用率却很低，每到油菜收割季　节，农民焚烧秸秆的现象仍屡禁不绝，由此引发的环境　污染、火灾和交通事故等给国民经济带来了重大损失。　为此，油菜秸秆的无公害处理成为一个急需解决的热　点问题。　本研究基于油菜秸秆的无公害处理的思想，首先采　用改良氨化、混合青贮及添加微生物的方法对油菜秸秆　进行饲用化处理。试验采用的改良氨化方法是添加沸　石粉以减少氨氮流失，提高氨化效果；而混合青贮则是　充分利用当地河道、鱼塘、水田中泛滥成灾的水花生与　油菜秸秆混合碾青变废为宝的过程；同时试验还采用添　加微贮菌剂“海星王”及筛选的纤维素分解菌进行微生　物处理。通过以上４种饲用化处理后，本试验测定了各　处理组中油菜秸秆的粗纤维等含量的变化，进一步评定　其营养价值。并采用后备母羊进行饲喂试验，以测定改　良氨化秸秆及混合青贮在替代青贮玉米上的可能性。　据研究表明，油菜秸秆中全碳占４２．６　，全氮　０．５２　９／６，全磷０．０８　，全钾０．４８　ｌ＿１］。油菜秸秆的碳氮　比值大，在畜禽粪便的堆肥过程中，若添加油菜秸秆作　为调理剂则可有效地减少氨气的排放［２］，由此不仅可减　少臭气的产生，同时可减少农家肥中氮的损失，增加磷、　钾的含量，对于农业生产有重要的应用价值。本研究采　用筛选所得的纤维素分解菌进行发酵试验，也是进行自　筛菌种对油菜秸秆减量化试验的一个测定，为后期油菜　秸秆与猪粪进行联合堆肥研究进行指导性试验。　１材料与方法　１．１　油菜秸秆的前处理选取保存较好、不霉变的油　菜秸秆，将其用粉碎机剪切到３～５　ｃｍ长。　１．２青贮池的筑建选择地势较高处，建成池长约６　ｍ，宽约１　ｍ，高约１　ｍ的长方形大池，中间用砖等分　成４个小池，４周用砖砌牢，并用水泥将底部和四周内　壁糊刷致密，建成约１．５　ｍ。的四联池。　１．３油菜秸秆饲用化制作方法　１．３．１　改良氨化处理组的制作　将粉碎后的油菜秸　秆按每１００　ｋｇ秸秆加入４　ｋｇ尿素、４．５　ｋｇ沸石粉、　１００　ｋｇ清水的比例ｌ３］，在青贮池中填入秸秆粉，每层　秸秆厚１５　ｃｍ，踩实，均匀地洒入尿素溶液和沸石粉。　按以上方法逐层添加，踩实，盖上双层加厚塑料薄膜，　上压水泥砖。　１．３．２混合青贮处理组的制作将水花生捞起，晾晒　２　ｈ后，用粉碎机粉碎至３～５　ｃｍ长。每１００　ｋｇ油菜　秸秆加人８０　ｋｇ水草，３　ｋｇ麸皮，４Ｏ　ｋｇ清水。逐层加　入，压实，方法同改良氨化处理组。　ｌ＿３．３商用微贮处理组的制作　将海星牌“微贮王”　秸秆发酵活干菌１袋３　ｇ，倒入２００　ｍＬ含１　白糖水　中充分溶解，在常温下放置ｌ～２　ｈ使菌种复活。按菌　种说明书，每１００　ｋｇ油菜秸秆加入１．３　ｋｇ食盐，０．５　ｋｇ麸皮，１０８　ｋｇ清水。　１．３．４　自筛菌种ＢＦ１４实验组的制作　菌种ＢＦ１４采　用ＰＤＡ培养基划线培养，２８℃培养５　ｄ。使用前用清水　将培养皿表面的孢子洗下，制成菌悬液。每１００　ｋｇ油菜　秸秆加人２　ｋｇ的尿素，１Ｏ　麸皮及１００　ｋｇ清水。　１．４样品分析　中性洗涤纤维（ＮＤＦ）、酸性洗涤纤　维（ＡＤＦ）按Ｖａｎ　Ｓｏｅｓｔ法进行，半纤维素一ＮＤＦ—　ＡＤＦ，纤维素一ＡＤＦ—ＡＤＩ　。　１．５试验动物选择２４只后备波尔山羊母羊，母羊　发育正常、精神良好、体重相近。随机分成３组，每组　８只，组间体重差异不明显。　１．６　饲养管理　３组试验羊在单列式棚舍饲条件下　饲养。饲喂方法：先喂油菜秸秆，再喂混合料（由青贮　玉米及麸皮组成），自由饮水。对照组所用青贮玉米减　量２０　，分别替换成各处理组油菜秸秆。　１．７　数据处理　本试验数据采用ＤＰＳ软件进行方差　分析。　２结果与分析　２．１　秸秆饲用化处理后感官测定　感官测定结果见　表１，结果表明两个微生物处理组都具有霉味，考虑到　其适口性较差，所以不考虑对微生物处理组进行后期　的饲喂试验。而混合青贮组和改良氨化组从感官测定　而言符合饲养的条件，其青贮效果明显优于微生物处　理组。　表１　各处理组的感官测定评价表　２．２秸秆成分分析４个处理组与未作任何处理油　菜秸秆的各项化学成分见表２。由表３可得改良氨　化组纤维素降解率４４．９６　；ＢＦ１４菌种组和商用微　贮组的纤维素降解率６６．２７　和７２．７７　；而混合青　贮组的纤维素降解率远高于其他３组，为８４．５Ｏ　。　综合各项化学成化的变化所示，混合青贮组对于油　中国草食动物　２０１Ｏ年　菜秸秆的降解率与其他各组间有显著差异，而采用　额外添加微生物的两个处理组其效果较为相近，但　３小结与讨论　’　在前期实验中［３　课题组通过分离筛选最终得到　３ｆ　株分解能力较好的菌株，并对３株菌株在发酵过程中　ＣＭＣ酶、滤纸酶、木质素酶及淀粉酶的产量进行了测　与改良氨化组在纤维素的分解上也有显著差异，对　于半纤维素的分解差异不明显。４个处理组的纤维　降解效果为：混合青贮组＞商用微贮组＞ＢＦ１４菌种　组＞改良氨化组。　表２　各处理组油菜秸秆主要化学成分变化　项目　中性洗涤纤维　酸性洗涤纤维半纤维素　（ＮＤＦ）　（ＡＤＦ）　定，最终得出ＢＦ１４菌株的产酶活性优于其他两株菌　株。本试验通过ＢＦ１４菌株对油菜秸秆的发酵与油菜　秸秆进行改良氨化、混合青贮及添加“海星牌”商用微　生物等处理进行比较试验，结果表明４个处理组对油　菜秸秆的降解效果排序为：混合青贮组＞商用微贮组　＞ＢＦ１４菌种组＞改良氨化组。虽然ＢＦ１４菌株对于　油菜秸秆的分解非最佳效果，但是该菌株对于油菜秸　秆纤维素的降解率可达６６．２７　，效果极为显著，因此　该菌虽然对于油菜秸秆的饲用化处理中不具优势　但　％　纤维素　对照组　５５．ＯＯ±０．８３　４７．６Ｏ－－＿０．９４４－　改良氨化组３９．Ｏ３±０．８３　３２．９６±０．２２　混合青贮组１２．Ｏ７＿－＿４－０．４７　９．６３±０．０１　ＢＦ１４菌种组３２．８２士０．３８　２６．２０±０．４３　商用微贮组３３．０９±１．７６　２６．８４±０．２６　７．４Ｏ　３８．１９±１．６５　６．０７　２１．Ｏ１±１．Ｏ９　２．７１　５．９２－４－０．２３　６．６２　１２．８８±３．４９。　６．２５　１０．４０±０．３７０　注：数据换算成鲜样中的含量。同列肩标不同字母为差异　极显著（Ｐ＜０．０１），相同字母为差异不显著（Ｐ＞０．０５）。　表３各处理组对于各化学成分的降解率　是在油菜秸秆与畜禽粪便的联合堆肥中仍具有重要的　研究价值。　通过油菜秸秆混合青贮及饲喂试验表明，采用油　菜秸秆与如今农村水塘泛滥成灾的水花生等水草进　行混合青贮，对于油菜秸秆中的纤维素、木质素等降　解显著，同时青贮后的秸秆可在不影响生长的情况　下替代一部分备用母羊的日粮，真正做达到变废为　宝的目的。　２．３饲喂试验将改良氨化及混合青贮的油菜秸秆　参考文献　［１］陈尚洪，朱钟麟，吴婕，等．紫色土丘陵区秸秆还田的腐解特征及土　壤肥力的影响［Ｊ］．水土保持学报，２００６，２０（６）：１４１—１４４．　Ｌ２』Ｉ　ｉａｎｇ　Ｙ，Ｌｅｏｎａｒｄ　Ｊ　Ｊ，Ｆｅｄｄｅｓ　Ｊ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ａｍ—　以一定的比例添人后备母羊的日粮中，饲喂３５　ｄ后记　录各羊只体重变化，通过方差分析（ＤＰＳ）结果如表４　所示，改良氨化组和混合青贮组的后备母羊与对照组　的后备母羊在体重上并无显著差异，因此采用氨化及　混合青贮法可替代２０　的后备母羊日粮，在实践中具　有明显的经济价值，可有效地节约饲养成本。　表４试验羊体重变化　ｍｏｎｉａ　ｖｏｌａｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｏｍｐｏｓｔｉｎｇ［－Ｊ］．Ａｍｅｒｉｃａｎ　ｓｏｃｉｅｔｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｅｕｌ—　ｔｕｒａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｓ，２００４，４７（５）：１６６７—１６８０．　［３３吕贞龙，陈后庆，尹召华，等．小麦秸秆氨化中尿素氮水平对其器质　的影响Ｉ－ｊ］．饲料工业，２００７，２８（２３）：２６—２８．　［４］杨胜．饲料分析及饲料质量检测技术［Ｍ］．北京：中国农业大学出版　｝　组别　始重／　末重／　只增重／　平均日增重　社，２００２．　改良氮化组１８．３５±１．４６　１９．８６±１．９３　１．５ｌ±０．５４　４３．１４±０　混合青贮组１７．８１±０．９６　１９．３４－－＋１．２７　１．５３±Ｏ．９５　４３．７１±Ｏ．０３　组　１８　２３±１．２９　２０．１３￣１．４１　１．９０￣０．３６　５４．２９￣０．０１　［５３陈丽园，夏伦志，吴东，等．油菜秸秆分解菌的筛选与产酶特性初探　［Ｊ］．中国草食动物，２００７，２７（５）：９－１２．　中草药饲料添加剂的毒性试验和体外抑菌试验　李　昀，俞联平，陈兴荣，张　林，杜笑村，李新媛　（甘肃省动物营养研究所，兰州Ｉ　７３００１０）　摘要：试验旨在研究中草药饲料添加剂的毒性和体　０　４　－Ｉ　，外抑菌活性　毒牲试验和侮　抑菌试验显示　草药　｜钢聃添如　经小鼠灌　给蔼岳，朱啦现明显急性毒　硕士。　一性症状，小氮１　Ｈ最大给药铺量１５０　ｇ／ｋｇ，相当亍奶　。中图分类号　ｓ８１６．７　牛用量的３　０００倍（含量为０．９Ｚ　ｍｌ－为１　６６７倍）、肉