犬猫肠道疾病的实验室诊断方法
2022-10-19
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犬猫肠道疾病的实验室诊断方法 孙亚东,刘 欣 (沈阳农业大学高等职业技术学院,辽宁沈阳100122) 摘 要:犬猫的慢性肠道疾病是一类常见的临床疾病,其主要表现特异性较小,能引起发病的原因较多, 临床诊断难度较大。论文主要综述了血清胰蛋白酶样免疫反应、血清叶酸和维生素B12浓度检测,肠道膜 通透性检测,肠道蛋白质丢失的评估等实验室诊断方法,为犬猫肠道疾病的诊断提供参考。 关键词:犬;猫;肠道疾病;实验室诊断 中图分类号:¥858.293 文献标识码:B 文章编号:1007—5038(2012)08—0105—03 犬猫的慢性肠道疾病是一类常见的临床疾病, 其主要临床症状为呕吐、腹泻和消瘦等,且有些动物 患病后只表现出消瘦而无明显的呕吐、腹泻等症状, 会被忽略。因其临床表现特异性较小,引起发病的 原因又较多,所以临床诊断难度较大。本文阐述了 5种用来诊断犬猫慢性肠道疾病的实验室方法,希 望能为其诊断提供帮助。 测PLI诊断EPI,因为健康和EPI动物血清PLI的 浓度有重合部分[3]。 2血清叶酸和维生素B12浓度检查 分析血清叶酸和维生素B12浓度,对诊断犬猫 小肠疾病很重要。结果正常不能排除小肠疾病,结 果异常不仅可以确定小肠疾病而且能找出疾病的原 因 。 1血清胰蛋白酶样免疫反应 犬血清胰蛋白酶免疫反应(canine trypsin-like 膳食叶酸的正常吸收主要发生在近端小肠。血 清叶酸降低,可提示近端小肠损伤。因为近端小肠 是膳食叶酸的主要吸收场所,造成这段小肠损伤的 immunoreactivity,cTLI)能敏感且特异地检测犬胰 腺内分泌功能不全(exocrine pancreatic insufficien— cy,EPI)Eli。引起犬的EPI最常见的原因是胰泡细 原因有许多,如饮食敏感、先天性炎症性肠道疾病和 淋巴瘤。猫血清叶酸浓度降低说明小肠形态发生异 胞萎缩,其次是胰腺发育不全或慢性胰腺炎导致胰 腺腺泡损坏。胰蛋白酶原从胰腺释放入血,通过 TLI定量测定胰蛋白酶原就能间接确定胰腺组织功 能。EPI的患犬血清胰蛋白酶原浓度非常低。 常,尤其是炎症性肠道疾病。与犬不同,患有EPI的 猫血清叶酸浓度下降。相比而言,维生素BI2的正 常吸收则特定地发生在远端小肠,它涉及到一个比 其他营养物质吸收更为复杂的机制。 维生素B12的吸收需要一种称作内因子(in— trinsic factor,IF)的蛋白,IF在大多数哺乳动物的 胃内合成。在犬胰腺也能合成IF[ ,在猫胰腺则是 猫血清胰蛋白酶样免疫反应(feline TLI,fTLI) 也可以检测猫EPI[2],但与狗相比猫不易患EPI,原 因是猫罕见慢性胰腺炎和腺泡细胞萎缩。胰腺组织 破坏可以导致EPI和糖尿病,因此,当胰岛素治疗无 效,消瘦严重症状出现后应考虑糖尿病患猫是否患 有EPI。在怀疑肠道疾病之前应当把EPI排除,因 合成IF的惟一器官_6]。胰蛋白酶降解胃内非特异 性与维生素B12结合的R蛋白从而阻止其与IF结 合。EPI发生时,胰腺中IF和胰蛋白酶生成都受干 扰,导致狗和猫维生素B12缺乏症,尤其猫更为严 重,因此在解释维生素B12浓度结果时必须排除 EPI。 为EPI使小肠结构变化,导致维生素B12吸收不良, 影响血清维生素B12浓度在诊断肠道疾病中的 作用。 血清胰脂肪酶活性(pancreatic lipase activity, PLI)检测用来特异性诊断犬猫胰腺炎。对某些表现 血清维生素B12浓度降低表明小肠末端损伤, 如果同时血清叶酸浓度也下降就表明十二指肠相当 呕吐的慢性肠道疾病需要与胰肠炎鉴别。不建议检 收稿日期:2012—02—10 严重的潜在的弥漫性病变。猫血清钴胺素浓度下降 基金项目:沈阳农业大学青年教师基金项目(20081035) 作者简介:孙亚东(1978一)男,吉林松原人,硕士研究生,主要从事干细胞与胚胎工程研究。 1O6 动物医学进展2012年第33卷第8期(总第230期) 通常表明了严重的肠道疾病,尤其是炎症性肠道疾 病或淋巴瘤[7]。当没有明显的消化道症状如呕吐和 腹泻出现时,猫的小肠疾病很容易被忽视。怀疑中 外途径添加维生素B12,治疗才能有效。 3肠道黏膜通透性检测 在犬的小肠疾病诊断中,肠黏膜通透性检查敏 老龄猫甲状腺机能亢进,并且体重减轻时检测钴胺 素和叶酸很有用。犬出现血清钴胺素下降或(和)血 清叶酸浓度升高能够表明近端小肠细菌过度生长 (small intestinal bacterial overgrowth,SIBO),又称 “抗生素反应性腹泻”[8-9]。SIBO在有体重减轻的 慢性间歇性腹泻的幼龄动物常见,组织结构改变仅 感且无损伤,比肠组织活检更有用。原因是即使活 组织检查正常也不能排除肠道已经损伤(如细菌过 度生长)。另外,采用活组织检查诊断多种原因引起 的炎症性肠道疾病时,如果不能发现特异性肠组织 病理学改变,就不能确定病因。相反,犬肠道黏膜通 透性测定不仅可以发现严重的细微的组织损伤,并 出现在少部分病例中。然而,生化研究证实常规组 织病理学检查不能发现明显的黏膜损伤,在关于细 菌在十二指肠中是否正常分布方面仍有些争论,大 量的研究证明肠道内的细菌及其分泌物能提高肠黏 膜的通透性_1 。 如果排除EPI,犬血清钴胺素浓度下降或叶酸 含量上升间接表明SIBO的存在。事实上,SIBO是 引起犬钴胺素缺乏的一个极其常见的原因,以梭菌 属和拟杆菌属为主的厌氧菌细菌大量寄生近端肠道 中,它们可以使钴胺索变得黏合导致钴胺素在小肠 末端不能被吸收。小肠内一些细菌合成的叶酸被机 体吸收导致SIBO犬血清叶酸浓度升高。相反,叶 酸在小肠末端和结肠中很少被吸收,这些部位的细 菌对血清叶酸浓度的上升几乎不起作用。然而单一 的叶酸浓度升高就可能暗示着SIBO,犬血清叶酸浓 度上升同时钴胺素浓度下降表明是SIBO。SIBO是 犬EPI引起的第二大并发症,能够导致血清叶酸浓 度升高,另外通过IF和胰酶的缺乏还能导致钴胺素 浓度的降低。SIBO不是猫的典型临床综合症状,但 是肠道细菌能够导致血清钴胺素浓度下降。排除 EPI,血清钴胺素浓度下降则极有可能是猫小肠肠疾 病的指征。 回肠上皮细胞的IF受体功能异常,引起犬遗传 性钴胺素吸收障碍。这种疾病在巨型雪纳瑞狗、边 境牧羊犬、澳大利亚牧羊犬和猎兔犬能见到l1 ]。1 岁以内的这种幼犬,发育不良,慢性再生障碍性贫 血,血清钴胺素浓度剧烈下降。 血清叶酸和维生素B12检查的临床意义在于: 对于大多数犬,如果血清叶酸浓度下降首先考虑食 物敏感性原因,如果血清维生素B12浓度下降叶酸 浓度升高时首先考虑SIBO。如果叶酸和钴胺素浓 度同时降低,要考虑到潜在严重弥漫性小肠疾病。 在猫,尤其注意钴胺素浓度下降,它暗示严重的肠道 疾病。维生素B12维持胃肠结构完整性和正常功 能。对于某些严重缺乏维生素B12的病例,比如有 遗传性吸收障碍的犬和EPI的猫,只有通过消化道 且可以直接确定损伤的原因。但这种方法对猫却效 果不好,因为与犬相比,猫的肠黏膜通透性更好。 使用51Gr—EDTA检测犬肠道黏膜通透性的方 法比较有效I1。’¨],但是放射性标志物限制了实际应 用,新方法是口服包括乳果糖和鼠李糖的糖溶液,然 后对尿液和血液样本进行分析l1 ”]。 Nery J等l1朝通过上述方法确定一个3岁金毛 猎犬由慢性腹泻和呕吐造成肠道损伤的原因是由于 食物过敏。改变食物前肠道黏膜通透性升高暗示着 肠道损伤,改变食物后通透性下降说明肠道损伤 恢复。 通透性检测诊断细菌过度生长造成黏膜损伤的 严重程度尤其有用ll 。在S1BO病例中即使没有明 显的组织结构异常,随着肠道细菌过度生长,肠黏膜 通透性能升高50 ~60 ,口服抗生素后肠黏膜通 透性下降。肠黏膜损伤修复,通透性恢复正常后即 可停止使用抗生素。对于肠黏膜通透性很高的患 犬,虽然经过一个月的治疗后明显好转,但是复发的 几率仍然较高,因此建议继续使用抗生素治疗。犬 持续的高渗透性及治疗效果不理想提示存在先天性 炎症性肠道疾病。 4肠道蛋白质丢失的评估 许多肠道疾病能导致胃肠道中蛋白质过多,尤 其是炎症性肠道疾病、肠道淋巴瘤和肠道淋巴管扩 张,这可能与营养或者黏膜损伤相关的吸收不良有 关。白蛋白丢失超过肝合成能力导致低白蛋白血 症,由此产生腹水、胸腔积液和水肿。评估肠道蛋白 丢失有助于在低蛋白血症出现前发现肠道病理改 变,排除肾病和肝病造成的蛋白缺失。 可以通过分析粪便中a1一蛋白激酶抑制剂(al PI)来评估肠内蛋白缺失。a卜PI是一种血清蛋白, 它与白蛋白分子质量大小相当,以一定的比率渗入 到肠道中 1 。与大部分蛋白质不同的是,a1一PI不 能被肠道中的蛋白酶水解,最终随粪便排出。 5肠活组织检查和组织病理学检查 肠活组织检查和组织病理学检查是诊断肠道疾 孙亚东等:犬猫肠道疾病的实验室诊断方法 107 病的决定性步骤,但炎症性肠道疾病、淋巴瘤和淋巴 [9] Lamm C G,Ferguson A C,Lehenbauer T W,et a1.Streptococ 管扩张,肠组织活检的结果往往是阴性的。当内窥 镜不可用时,检查局部而非弥漫性的肠道疾病时,就 需要通过剖腹术进行全层活组织检查。 ca1 infection in dogs:A retrospective study of 393 cases[J]. 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Laboratory Diagnosis of Intestinal Disease in Dogs and Cats SUN Ya—dong,LIU Xin (Vocational College,Shenyang Agriculture University,Shenyang,Liaoning,110122。China) Abstract:Chronic intestinal diseases are common in dogs and cats.The main problem is clinical signs of that are not specific,many causes and difficult to identify.This paper mainly clarified different laboratory diag— nosis methords including serum trypsin—like immunoreactivity,serum folate and eobalamin,intestinal per— meability test,and assessment of intestinal protein loss to distinguish intestinal diseases. Key words:dog;cat;intestinal disesase;laboratory diagnosis