交叉配血试验用于检测贫血的受血者和供血者之间的血清型是否相容，用于预防受血动物输血后发生输血反应。
1. 主测配血试验是检测受血者血清中是否有抗供血犬红细胞抗体，如果有则不能输血。 主测配血试验：受血者血浆+供血者红细胞
2. 副测配血试验是检验供血者血清中是否有抗受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供血犬血液进入受血犬体内后很快被稀释。 副测配血试验：供血者血浆+受血者红细胞
3. 多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输过血的犬初次交叉配血试验显示相容性。 4. 曾经有受血经历的犬，在第二次输血前，即使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。 5. 猫能产生自然同种抗体，所以在猫输血前必须做交叉配血试验。交叉配血试验还能鉴定猫的血型，若主测配血试验不相合，受血猫可能为B血型，供血猫为A型血。若副测配血试验不相合，受血猫可能为A血型，供血猫为B血型。如果交叉配血实验相合，则供血猫和受血猫血型相同。猫的血液最好在需要输血时，现采血现输血，不要长期贮存。 二、步骤
1）分别取0.5毫升受血者和供血者的抗凝血液，可用EDTA抗凝，或者从供血袋内取血；（见下图）
2）对抗凝血进行离心，2000转每分钟，离心5分钟;(见下图)
3）离心后，用移液枪吸取上面血浆，放入另外的一个试管，并标记；或者直接转移入贴有主测、副测和受血者对照标签的3支1毫升离心管中，每支离心管中加对应血浆100微升。（见下图）
4）用磷酸盐缓冲盐水或者生理盐水洗涤红细胞3遍，并制成5%的红细胞悬液。操作方法是：加入洗涤液后，用手指轻弹试管底，使红细胞和洗涤液混合，再2000转每分钟离心5分钟，取上清液扔掉，如此重复3次；（见下图）
5）向装有100微升血浆的离心管中各加入100微升对应的5%红细胞悬液，并在室温下静置15分钟；（见下图）
主测配血试验：100微升受血者血浆+100微升5%供血者红细胞悬液，轻轻混合 副测配血试验：100微升供血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合 对照试验： 100微升受血者血浆+100微升5%受血者红细胞悬液，轻轻混合
6）离心后，检查上清液有无溶血；（见下图）
7）轻轻晃动离心管，肉眼或借助显微镜观察有无凝集；（见下图）
8) 主测配血试验出现任何程度的溶血或凝集都表示血型不合，副测配血试验出现轻微溶血或凝集可用于紧急情况下的输血，但是必须仔细监护；
9) 当受血者对照试验出现凝集或溶血后，不应进行交叉配血。 三、结果判读
相容现象（400X镜）
凝集现象：可见红细胞凝集，凝块大小可能会有差异。（见下图，100倍镜、400倍镜）
交叉配血试验无凝集时才可以输血。 四、备注
要使用磷酸盐缓冲盐水或者生理盐水洗涤红细胞，输血时最好用生理盐水稀释。因为5%的葡萄糖对红细胞能造成伤害（见下图）。
蒸馏水对红细胞也能造成伤害。
犬猫交叉配血方法
(康乐佳宠物医院 玲玲）
交叉配血实验（corss-match test）是同种异体肾移植手术前必须做的检测。广泛应用于临床输血前检查。将供血者的红细胞与受血者的血清进行血清配合试验，称为
主侧试
验（major crossmatch）；把受血者的红细胞与供血者的血清作配合试验，称为次侧试验(minor crossmatch）。这样既可检验血型是否适合，又能发现他们的红细胞或血
清中是否还存在一些其它的凝集原或凝集素，是否可引起红细胞凝集反应。减少显微血管吻合后出现血栓的可能。交叉配血试验，在 37℃下进行，以保证可能有的凝集反应得以充分显示。具体步骤如下：
a. 分别从供体和受体采血1ml，用EDTA抗凝。
b．在离心机内离心1min（1000rpm）。吸出血清至另一标记好的试管内 c．受体和供体的红细胞分别配制成2%红细胞混悬液：抽取0.1ml 红细胞至另一试管内，并 加入0.9%NaCl 生理盐水5ml。充分混匀
d．清洗红细胞：将上述混悬液离心1min（1000rpm），用吸管吸除红细胞上方的生理盐水，然后再加入0.9%NaCl 生理盐水5ml，混匀后再重复上述操作。至少清洗红细胞3遍。最后配制成清洗后的2％红细胞混悬液。
e．主侧试验：吸取受体的2滴血清和供体的2滴2％红细胞混悬液至一试管内混匀。
次侧试验：吸取供体的2滴血清和受体的2滴2％红细胞混悬液至另一试管内混匀。
为了便于对照，分别将自体的2滴血清和自体的2滴2％红细胞混悬液至一试管内混匀。 置于37°温箱内温浴30min。
f．检查试管内红细胞是否出现凝集反应、是否溶血。吸取一滴试管内血清红细胞混合液滴至载玻片上，在400倍显微镜下观察是否有红细胞凝集。
犬只输血 血液配型 相关知识 （康乐佳宠物医
院 玲玲）
犬的血型 犬的血型－1
•通过直接或间接凝集反应以及溶血反应，人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原（DEA）。
•到目前为止，已报道的犬血型有： - 红细胞抗原1.1（A1）； - 红细胞抗原1.2（A2）； - 红细胞抗原3（B）； - 红细胞抗原4（C）； - 红细胞抗原5（D）； - 红细胞抗原6（F）；
- 红细胞抗原7（Tr）和红细胞抗原8（He）。 犬的血型－2
•最近澳大利亚又发现犬有红细胞抗原1.3（A3）血型。 •最强的抗原性因子： - 红细胞抗原1.1 - 红细胞抗原1.2 - 红细胞抗原7 犬的血型－3
•犬的红细胞表面不只有一个红细胞抗原，如红细胞可以是DEA1.1阳性或DEA1.1阴性，同时DEA1.1阴性的红细胞也可以是DEA1.2阳性或DEA1.2阴性，这些血型表现为等显性遗传。 犬的血型－4
•血型为DEA1.1、DEA1.2和DEA7阳性的犬血只能给相同血型的犬输； •如果血型为DEA1.1、DEA1.2和DEA7阴性的犬首次输入上述三种阳性血型中的任何一种或两种以上以后，第二次输入同一阳性血型时肯定会发生严重的输血反应。
•目前未发现犬体内含有天然抗DEA1.1和DEA1.2的抗体，但犬体内确实存在抗某些血型的天然抗体。
•另外，由于地域的不同以及各品种的分布数量的差异，各地犬的不同血型所占比例也不尽相同。 犬的血型－5
•目前还未就某一品种犬的血型分布情况做出详细研究，但研究发现Greyhound出现DEA1.1和DEA1.2阳性的机率很小。 犬的血型－6
•Pitoler Ｍe等对美国不同品种犬调查得出 - DEA1.1 占40%， - DEA1.2 占20%， - DEA3 占5%， - DEA4 占98%， - DEA5 占20~25%， - DEA6 占98%， - DEA7 占45~50%， - DEA8 占40%。 输血疗法的适应症
•输血疗法可适用于各种原因引起的贫血；
•车祸、手术、外伤等引发的大失血； •剧烈呕吐、腹泻引起的血容量降低； •老年性疾病；
•血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良； •华法令鼠药中毒；
•白细胞减少症和低蛋白血症等病症。 输血的作用
•输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能等作用。 •另外对供血犬采取相应的免疫后，其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的抗病力。 输血的标准
•当犬出现下列情况： - 循环血量减少超过30%； - 红细胞压积小于20%； - 持续性出血； - 粘膜苍白；
- 毛细血管充盈时间大于2秒；
- 呼吸急促和心动过速等症状；则必须紧急输血。
供血犬的选择要求
•供血犬的体重应大于25公斤； •年龄在2-8岁之间；
•临床检查正常（包括血常规及血液生化）； •红细胞压积大于40%； •定期注射疫苗；
•供血犬不应有红细胞抗原1.1、红细胞抗原1.2或红细胞抗原7。
•如果受血犬需大量输入血小板和凝血因子，应检测供血犬的凝血时间； •根据地域的不同，相应淘汰存在巴贝丝虫病、利什曼原虫病、埃利希氏病、疏螺旋体病、布鲁菌病和犬恶丝虫病的供血犬。 •特别应注意供血犬不可有受血经历。 •采血量不应超过20毫升/公斤体重； •一般间隔三周采集一次。
•供血犬的日粮中应添加硫酸铁制剂，剂量为10mg/kg体重。
•由于Greyhound血液的红细胞压积很高，静脉容易采血并且血液中很少含有DEA1.1、DEA1.2和DEA7，可将Greyhound作为理想的供血犬。 血液的采集及保存 常用的保存液
•可以从犬的颈静脉或从麻醉犬的股内动脉采集血液。
•采血常用的保存液：
- 枸橼酸磷酸葡萄糖（CPD）； - 枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌呤（CPD-A1） - 酸性枸橼酸葡萄糖（ACD）； - 肝素。
血液的保存
•犬的全血制品应保存在3-6℃的条件下， •温度高于37℃，易破坏血液的成分， •低于2℃，可形成纤维蛋白。
•另外应使抗凝剂和采血袋在采血前保持在5℃左右，以防止溶血。 •采血过程中必须轻轻晃动采血袋。 配血实验
•输血前应给犬做交叉配血试验，
•但在紧急输血情况下，如果犬是第一次输血，可以不做配血试验。
•受血犬过去曾被输过不明血型的血液或需多次输血，必须做配血试验，否则，易产生输血反应。 交叉配血试验
•交叉配血试验可以分为主侧配血和次侧配血两部分，
•主侧配血是受血犬的血浆或血清和供血犬的红细胞反应与否； •次侧配血是受血犬的红细胞与供血犬的血浆或血清反应与否。 •由于受血犬血清中很少含有天然抗体，一般可不做次侧配血试验。 •任何程度的凝集反应或溶血反应都表明血型不相容。 盐水配血法
•可利用盐水配血法进行检测，具体实验步骤为： a. 分别取供血犬和受血犬的新鲜血液，用EDTA抗凝。
b. 用0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞，分别以1000转/分钟离心15秒，去掉上清液。
c. 将红细胞泥配成4%红细胞盐水悬液。
d. 主侧配血：向10×75毫米的试管加入两滴供血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的血清或血浆。
e. 次侧配血：向10×75毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血犬的血清或血浆。 f. 以1000转/分钟离心1分钟。
g. 取出观察上清液有无溶血，轻轻晃动试管，观察有无凝血。 简易的“三滴法”配血实验
•简易的“三滴法”配血实验：方法为取供血犬血液1滴、受血犬血液1滴及抗凝剂1滴于载玻片上，混合后肉眼观察有无凝集，若无凝集，则可输血。 输血方法
•静脉输血是最常用的一种方法。
•如果静脉输血确实有困难，也可进行腹腔输血，但腹腔输血的作用比较慢。 •腹腔输血24小时后，有50%血细胞被吸收进入循环系统。 •腹腔输血2-3天后，约70%的血细胞进入循环血液。 •腹腔输血对慢性疾病（如慢性贫血）效果较好。
•幼犬静脉输血失败，可以进行骨髓内输血，用消毒后的20号针头或骨髓穿刺针刺入股骨或肱骨近端，输血后约95%左右的血细胞可以被吸收进入血液循环系统。
•输血前15分钟，可以给犬注射苯海拉明防止过敏。 •将血袋取出后反复颠倒数次，使沉积的红细胞充分混匀。
•输血过程中发生阻塞时，须立即更换输血器具，也可在输血前向血袋内注入50-100毫升生理盐水以稀释浓缩的红细胞，有利于降低血液的粘稠度。 输血量的计算
•静脉输血的剂量一般为10-20ml/kg。
•输入20ml/kg的全血或10ml/kg浓缩的红细胞，则红细胞压积增加10%左右。 •输血量的计算公式为：所输血量=2.2×受血犬的体重（kg）×40×（正常血细胞比容-受血犬血细胞比容/供血犬血细胞比容）。 静脉输血的速度
•静脉输血的速度一般应小于10ml/kg/h；
•输血最初30分钟一定要慢，大约0.25ml/kg/h。 •输血过程中犬如果出现荨麻疹，则马上停止输血。
•一般情况下血制品不用预热，但输血速度达50ml/kg/h，则必须预热。 血小板或其它凝血因子
•如果要输入血小板或其它凝血因子，必须使用新鲜的血液，这是由于血小板只能存活4-8小时，而凝血因子Ⅷ和Ⅻ在1-6℃条件下也只能保存6小时。 输血反应
•输血血型发生不相容时，犬输血后7～10天产生抗体，此时发生凝集和溶血反应。
•临床上犬在输血后初期虽表现为好转，但1～2周后则会死亡。
•但犬的肾脏可以排泄大量的血红蛋白，肾脏几乎不发生任何病理变化，而人体内红细胞释放的血红蛋白可以引起肾脏病变。
•由于此原因，有时给同一条犬几次输入不相容血型也不会引起死亡。 输血维持的时间
•必须注意输血的疗效是暂时的，患非再生性贫血和非溶血性贫血的犬一次性输入新鲜血液后可以维持三周左右。
•过量输血以及经常性输血，可以抑制自身红细胞的生成。 输血并发症
•如果供血犬和受血犬的血型相同，一般很少发生并发症。犬输血的并发症主要
有： - 发热、 - 过敏、 - 溶血、 - 循环负荷过重、 - 低钙血症 - 以及血凝病等。
•发热和过敏主要表现为高热、红斑和瘙痒等症状，临床处理措施为减慢输血速度，给予退热剂，应用抗组织胺药物，如盐酸苯海拉明，剂量为2mg/kg； •溶血主要表现为血红蛋白血症、血红蛋白尿症、乏力、呕吐、发热、心动过速、急性肾衰和凝血等症状，如果发生溶血反应，应立即停止输血，给予静脉输液以及皮质类固醇和抗组织胺药物；
•循环负荷过重是由于输血量过大造成的，可以引起肺水肿，应用速尿处理，用量为2- 4mg/kg；
•低钙血症：输入大量含枸橼酸盐抗凝剂的血液可使犬产生低钙血症，犬临床表现为肌肉震颤、心率不齐或者呕吐。发生上述症状可以停止输血，一般可用葡萄糖酸钙治疗；
•血凝病：大量输入全血或浓缩红细胞可以造成犬发生血凝病，可用富含血小板的血浆进行治疗
犬的血型与输血疗法
（北京康乐佳宠物医院）
输血疗法是治疗疾病， 尤其是危重病例的一种重要方法。 输血疗法在人医临床上已经得 到广泛的应用，但在过去的兽医临床治疗中应用甚少，究其原因，主要是考虑动物的经济价 值和缺乏相应的血液来源。 目前随着伴侣动物的发展， 其自身的经济价值以及社会价值不断 得到提高，宠物主人在为他们的宠物治疗疾病时，已不再是仅仅考虑花费，更重要的是能否将宠物治愈。因此，输血疗法逐渐在宠物临床治疗，特别是犬病治疗中得到应用。
1. 犬的血型 通过直接或间接凝集反应以及溶血反应， 人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原。 到目前为止，已报道的犬血型有红细胞抗原（DEA）1.1（A1） 、红细胞抗原 1.2（A2） 、红细胞抗 原 3（B） 、红细胞抗原 4（C） 、红细胞抗原 5（D） 、红细胞抗原 6（F） 、红细胞抗原 7（Tr） 和红细胞抗原 8（He） 。最近澳大利亚又发现犬有红细胞抗原 1.3（A3）血型。红细胞抗原 1.1、红细胞抗原 1.2 和红细胞抗原7 是最强的抗原性因子[1]。犬的红细胞表面不只有一个红细胞抗原，如红细胞可以是 DEA1.1 阳性或 DEA1.1 阴性，同时 DEA1.1 阴性的红细胞也可以是 DEA1.2 阳性或 DEA1.2 阴性，这些血型表现为等显性遗传。血型为 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7 阳性的犬血只能给相同血型的犬输，如果血型为 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7 阴性的犬首次输入上述三种阳性血型中的任何一种或两种以上以后， 第二次输入同一阳性血型时肯定会发生严重的输血反应。目前未发现犬体内含有天然抗 DEA1.1 和 DEA1.2 的抗体，但犬体内确实存在抗某些血型的天然抗体。 另外， 由于地域的不同以及各品种的分布数量的差异，各地犬的不同血型所占比例也不尽相同。Pitoler Ｍe 等对美国不同品种犬调查得出 DEA1.1 占 40%，DEA1.2 占 20%，DEA3 占 5%，DEA4 占 98%，DEA5 占 20~25%，DEA6 占 98%，DEA7 占 45~50%，DEA8 占 40%。目前还未就某一品种犬的血型分布情况做出详细研究，但研究发现灵缇出现 DEA1.1 和 DEA1.2 的机率很小[2]。
2. 输血疗法的适应症 输血疗法可适用于各种原因引起的贫血； 车祸、 手术、 外伤等引发的大失血； 剧烈呕吐、 腹泻引起的血容量降低；老年性疾病；血小板和凝血因子缺乏引起的凝血不良；华法令鼠药 中毒；白细胞减少症和低蛋白血症等病症。输血可以起到迅速补充循环血量、维持一定的血压、增加血液的凝固性和血红蛋白的浓度、增加血液运输氧的能力以及刺激机体的造血机能等作用。另外对供血犬采取相应的免疫后，其血制品对犬细小病毒、犬瘟热可产生特异性的 抗病力。另外，当犬出现循环血量减少超过 30%；红细胞压积小于 20%；持续性出血；粘膜苍白；毛细血管充盈时间大于2 秒；呼吸急促和心动过速等症状则必须紧急输血。
3. 供血犬的选择 在输血时，应注意对供血犬的严格要求。供血犬的体重应大于 25 公斤；年龄在 2~8 岁 之间；临床检查正常（其中包括血常规及血液生化指标）；红细胞压积大于 40%；定期注射 疫苗；供血犬不应有红细胞抗原 1.1、红细胞抗原 1.2 或红细胞抗原 7；如果受血犬需大量输 入血小板和凝血因子，应检测供血犬的凝血时间；另外根据地域的不同，相应淘汰存在巴贝 丝虫病、利什曼原虫病、埃利希氏病、疏螺旋体病、布鲁菌病和犬恶丝虫病的供血犬。特别 应注意供血犬不可有受血经历。 采血量不应超过 20 毫升/公斤体重， 一般间隔三周采集一次。供血犬的日粮中应添加硫酸铁制剂，剂量为 10mg/kg 体重。由于灵缇血液的红细胞压积很高，静脉容易采血并且血液中很少含有 DEA1.1、DEA1.2 和 DEA7，可将灵缇作为理想的供血犬[2、5、6]。
4. 血液的采集及保存 可以从犬的颈静脉或从麻醉犬的股内动脉采集血液。 采血常用的保存液有枸橼酸磷酸葡萄糖（CPD）、枸橼酸磷酸葡萄糖腺嘌呤（CPD-A1）、酸性枸橼酸葡萄糖（ACD）和肝素[3]。CPD 能够较好保持红细胞携带氧到组织的能力，用 CPD 抗凝的血可保持 21 天。CPD-A1 则 可以维持血液中原有的 2，3—二磷酸甘油酸（2，3—DPG）和三磷酸腺苷（ATP）的浓度， CPD-A1 中的腺嘌呤可以作为红细胞合成 ATP 的底物，用 CPD-A1 可保存犬血 35 天。但最 新研究表明用 CPD-A1 保存的血 30 天后输入犬的体
内后，有 27%的红细胞失活，因此建议 用 CPD-A1 保存血液最好不要超过 20 天。用肝素抗凝的血液，禁止用于患有凝血病的犬， 它可以干扰血小板的功能，其抗凝的血制品必须在 48 小时内使用，使用剂量为 625U/50ml 血液。用 ACD 保存的血液可以保存 14 天。犬的全血制品应保存在 3-6℃的条件下，温度高 于 37℃，易破坏血液的成分，低于 2℃，可形成纤维蛋白。另外应使抗凝剂和采血袋在采血 前保持在 5℃左右，以防止溶血。采血过程中必须轻轻晃动采血袋[6]。
5. 配血实验 输血前应给犬做交叉配血试验，但在紧急输血情况下，如果犬是第一次输血，可以不做配血试验。受血犬过去曾被输过不明血型的血液或需多次输血，必须做配血试验，否则，易产生输血反应。 交叉配血试验可以分为主侧配血和次侧配血两部分， 主侧配血是受血犬的血 浆或血清和供血犬的红细胞反应与否； 次侧配血是受血犬的红细胞与供血犬的血浆或血清反 应与否。由于受血犬血清中很少含有天然抗体，一般可不做次侧配血试验。任何程度的凝集反应或溶血反应都表明血型不相容[6]。
可利用盐水配血法进行检测，具体实验步骤为： a、 分别取供血犬和受血犬的新鲜血液，用 EDTA 抗凝。
b、 用 0.9%氯化钠溶液洗三遍红细胞，分别以 1000 转/分钟离心 15 秒，去掉上清夜。 c、 将红细胞泥配成 4%红细胞盐水悬液。
d、 主侧配血：向10×75 毫米的试管加入两滴供血犬的 4%红细胞盐水悬液和两滴受血犬的血清或血浆。
e、 次侧配血：向10×75 毫米的试管加入两滴受血犬的4%红细胞盐水悬液和两滴供血犬的血清或血浆。
f、 以1000 转/分钟离心1分钟。
g、 取出观察上清液有无溶血，轻轻晃动试管，观察有无凝血[6、7]。
也可采用简易的“三滴法”配血实验，方法为取供血犬血液 1 滴、 受血犬血液 1 滴及抗凝剂 1 滴于载玻片上，混合后肉眼观察有无凝集，若无凝集，则可输血 [1] 。
6. 输血方法 静脉输血是最常用的一种方法。如果静脉输血确实有困难，也可进行腹腔输血，但腹腔输血的作用比较慢， 腹腔输血 24 小时后， 50%血细胞被吸收进入循环系统。 有腹腔输血 2~3 天后，约70%的血细胞进入循环血液。腹腔输血对慢性疾病（如慢性贫血）效果较好。幼犬静脉输血失败，可以进行骨髓内输血，用消毒后的 20 号针头或骨髓穿刺针刺入股骨或肱骨近端，输血后约 95%左右的血细胞可以被吸收进入血液循环系统。 输血前 15 分钟，可以给犬注射苯海拉明防止过敏。将血袋取出后反复颠倒数次，使沉 积的红细胞充分混匀。输血过程中发生阻塞时，须立即更换输血器具，也可在输血前向血袋 内注入 50~100 毫升生理盐水以稀释浓缩的红细胞，有利于降低血液的粘稠度。静脉输血的 剂量一般为 10~20ml/kg。如果输入 20ml/kg 的全血或 10ml/kg 浓缩的红细胞，则红细胞压积 增加 10%左右。
输血量的计算公式为：所输血量=2.2×受血犬的体重（kg）×40×（正常血 细胞比容-受血犬血细胞比容/供血犬血细胞比容）
静脉输血的速度一般应小于 10ml/kg·h， 输血最初 30 分钟一定要慢，大约 0.25ml/kg·h。输血过程中犬如果出现荨麻疹，则马上停 止输血。一般情况下血制品不用预热，但输血速度达 50ml/kg·h，则必须预热。如果要输入血小板或其它凝血因子，必须使用新鲜的血液，这是由于血小板只能存活 4-8 小时，而凝血因子Ⅷ和Ⅻ在 1-6℃条件下也只能保存 6 小时 。 输血血型发生不相容时，犬输血后 7～10 天产生抗体，此时发生凝集和溶血反应。临床上犬在输血后初期虽表现为好转，但 1～2 周后则会死亡。但犬的肾脏可以排泄大量的血红蛋白，肾脏几乎不发生任何病理变化，而人体内红细胞释放的血红蛋白可以引起肾脏病变。 由于此原因， 有时给同一条犬几次输入不相容血型也不会引起死亡。 必须注意输血的疗效是暂时的，患非再生性贫血和非溶血性贫血的犬一次性输入新鲜血液后可以维持三周左右。过量输血以及经常性输血，可以抑制自身红细胞的生成。
7. 并发症 如果供血犬和受血犬的血型相同， 一般很少发生并发症。 犬输血的并发症主要有： 发热、 过敏、溶血、循环负荷过重、低钙血症以及血凝病等。发热和过敏主要表现为高热、红斑和 瘙痒等症状，临床处理措施为减慢输血速度，给予退热剂，应用抗组织胺药物，如盐酸苯海拉明，剂量为 2mg/kg；溶血主要表现为血红蛋白血症、血红蛋白尿症、乏力、呕吐、发热、 心动过速、急性肾衰和凝血等症状，如果发生溶血反应，应立即停止输血，给予静脉输液以 及皮质类固醇和抗组织胺药物；循环负荷过重是由于输血量过大造成的，可以引起肺水肿， 应用速尿处理， 用量为 2～4mg/kg； 输入大量含枸橼酸盐抗凝剂的血液可使犬产生低钙血症， 犬临床表现为肌肉震颤、心率不齐或者呕吐。发生上述症状可以停止输血，一般可不用葡萄糖酸钙治疗； 大量输入全血或浓缩红细胞可以造成犬发生血凝病， 可用富含血小板的血浆进行治疗 。 参考文献
[1]王力光， 董君艳.新编犬病临床指南[M].长春： 吉林科学技术出版社， 2001.156-161. [2] George Lubas. Blood transfusion in dogs and cat [DB/OL]，2000-03-21. [3] Alice Howard，Beth Callan，Mark Sweeney，et al.Transfusion practices and costs in dogs[J].JAVMA，1992，201（11） ：1697-1701.
[4] U.Giger，C.J.Gelens，M.B.Callan，et al.An acute hemolytic transfusion reaction caused by dog erythrocyte antigen 1.1 incompatibility in a previously sensitized dog[J].JAVMA， 1995，20 （5） ：1358-1362.
[5] Task .Collect whole blood from a donor dog[DB/OL]，2000-04-02.
[6] Bartola.Fluid therapy in small animal practice[M].Philadelphia： W.B.Saunders Company， 1992.371-382.
[7] 李志强.现代血液病输血疗法[M].上海：上海医科大学出版社，1999.406-407.
犬的血型
（北京康乐佳宠物医院）
犬的血型和人类的血型一样，是具有种属特异性和抗原性的红细胞表面的遗传标记，即犬红细胞表面抗原，其实质大多为糖蛋白。由于犬的红细胞抗原种类繁多，所以血型的分类也比较复杂。
1、 犬红细胞表面抗原（Dog Erythrocyte Antigen，简称DEA），即血型系统是按照阿拉伯数字排序来分类的。目前发现的犬的红细胞表面抗原超过13族，其中经国际标准确认的为8种[1]，分别为DEA[1.1]、DEA[1.2]、DEA[3]、DEA[4]、DEA[5]、DEA[6]、DEA[7]、DEA[8]。其中DEA[1]又有 DEA[1.1]和DEA[1.2]两个亚型。所有的DEA中，DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[7]具有较强的免疫原性。其中DEA[1.1]和DEA[1.2] 的抗原—抗体反应是导致急性输血性溶血的最主要因素。DEA[7]是较弱的免疫溶血因子，其抗原—抗体反应主要导致输血后红细胞寿命缩短，在3-5天内崩解死亡。而且DEA[7]稳定性较差，升高温度就可以破坏其免疫原性。其它的表面抗原的抗原性都很弱，DEA[3]、DEA[5]的抗原—抗体反应与DEA[7]有相同的损害作用；DEA[4]的抗原—抗体反应对输血的红细胞没有任何影响，所以，如果某只犬只有DEA[4]，而没有其它血型抗原，则可以作为万能供血者。总的说来，DEA[1.1]和DEA[1.2]是犬输血过程中最主要的溶血因素，其它的血型系统一般不会影响到不同个体之间血液的相容性[2]。
鉴于犬血型的复杂多样以及DEA[1.1]、DEA[1.2]的抗原—抗体反应强度最大，所以将犬的血型分为DEA[1.1]系、DEA[1.2]系和DEA[1-]三个血型系统，其中DEA[1-]指不含有DEA[1.1]和DEA[1.2]抗原。每个血型系统内其他的DEA可以任意以阳性或阴性。所以，这三个血型其实都是若干DEA的组合，具体组合如下：DEA[1.1]+加一个或数个的DEA[3]-[8]的复合血型；DEA[1.2] 加一个或几个的DEA[3]-[8]的复合血型；DEA[1(-)]加一个或几个DEA[3]-[8]的复合血型。所以临床上一般的犬血型指的就是DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[1-]三种。目前，美国等国家和地区使用的犬血型检测试剂也是针对这三个血型的红细胞表面抗原设计的。
2、 测定犬血型的方法
犬的血型虽然较人的复杂，但经过科研工作者的不懈努力，在近十几年还是涌现出了不少方便、准确、可行的监测方法。科学家们依据红细胞表面抗原在特异抗体存在的情况下，会发生红细胞凝集的这一普遍原理，积极探索和寻找能够引起特定抗原红细胞凝集的凝集素，甚至研究过植物凝集素的分型效果[2]。其中Andrews等[3]在1992年研制出了利用单克隆抗体检测DEA[1.1]的实验板，用于确定犬血的DEA[1.1]阳性和DEA[1.1]阴性；随后，宠物血液库（The Pet Blood Bank）等机构相继推出了可以检测DEA[1.1]和DEA[1.2]的血型试剂盒，可以轻易区分DEA[1.1] 、DEA[1.2]和DEA[1-]，从而基本满足了临床上对血型测定的要求。
现在广泛使用的血型检测方法就是血型检测试剂盒，都是使用简单、方便、快速的
产品，最早使用这些产品的大多是欧美发达国家，日本和韩国在这方面是走在亚洲的前面的。最近，台湾地区也有宠物医院引进了犬血型检测试剂盒。目前，国内也开始开展血型检测的业务。
3 、 犬的血型在输血中的意义
确定犬的血型在兽医临床中的首要意义，无疑在于输血的时候避免出现输血反应。常见的输血反应包括：发热、呕吐和最严重的溶血。输血时，一般的兽医在没有血型检测试剂的情况下，会进行输、受血犬的血液配型试验。该方法虽然简单易行，只需要将两个犬抗凝血样混合在一起，以是否出现红细胞凝集为判断依据[5]。不出现就意味着两只犬的血型相合，反之亦然。
这种配型试验虽然简单易行，操作方便，不需要借助任何仪器设备和特定试剂。但是如果受血犬的血型为DEA[1-]，而供血犬的血型为DEA[1.1]或DEA[1.2]时，首次输血可能不会出现严重的溶血反应。但四天后，受血犬就会产生相应抗体，第二次输血时，血液中的DEA[1.1]或DEA[1.2]抗原与相应的抗体结合，从而出现严重的免疫溶血反应。导致动物病情加重，甚至死亡。李志发等[6]用此方法作配型试验，给五只病犬输血一次，两只出现体温的升高，三只无免疫反应。张方林等[7]用健康犬全血输血治疗犬瘟热病例收到非常好的疗效，但也只是输一次。所以，在不能确定血型的情况下输血，配型试验可以提供首次安全输血的依据，但不能保证二次输血的安全性。而且，病犬进行过一次不同型输血治疗康复后，也会终生对该血型产生强烈的免疫活性。从而为以后输血埋下隐患[8]。
另外，不同血型之间输血后，红细胞的寿命也会大大缩短（一般多见于DEA[1.1]输给DEA[1-]），因为机体产生DEA[1.1]的抗体只需要四天的时间[9]。
综上所述，要在临床上放心的使用输血这一方法治疗病犬时，最好确定输血犬和受血犬的血型，保证治疗的有效性和安全性。当然，如前所述，目前的血型检测只是区分DEA[1.1]、DEA[1.2]和DEA[1-]，不包括其它可能引起输血反应的红细胞抗原，所以，在输血前除了用血型鉴定试剂盒等工具确定血型外，还要作体外配型试验。
4、 犬的血型在犬繁殖中的意义
目前，在犬的繁育工作中，几乎没有人意识到种犬的血型会对仔犬产生什么样的后果。可事实上，这个影响有时候是非常严重和具有毁灭性的。
台湾有人报道，血型为DEA[1-]的雌性黄金猎犬与血型为DEA[1.1]的雄性犬交配，第一胎的七只DEA[1.1]型仔犬健康，但与同一雄犬交配生下的第二胎仔犬则全部在哺乳三天后死亡。调查后得出的结论为，该雌犬在第一次生产的时候，有部分子犬的脐血通过破裂的子宫内膜进入母体，刺激母体产生抗DEA[1.1]的抗体，当第二次生产后哺乳幼犬时，母乳中的DEA[1.1]抗体导致了血型为DEA[1.1]的仔犬的溶血性贫血，俗称新生幼犬溶血性贫血。这样的报道说明，如果不同血型的犬进行交配，极有可能造成新生幼犬的死亡。一般在繁育中对犬血型的选择应该是有方向的，否则结果可能空欢喜一场。
另外一种导致新生幼犬溶血性贫血的与血型有关的原因是：DEA[1-]血型的母犬与
DEA[1.1]血型的雄犬配种前，接受过与该雄犬同一血型的输血。结果，雌犬体内由于前面的输血，产生了抗DEA[1.1]的抗体。当雌犬产下血型为DEA[1.1]的幼犬后，该抗体随着母乳被幼犬吸收，导致幼犬发生溶血性贫血而很快死亡。同样的规律也适用于DEA[1-]雌犬与血型为DEA[1.2]的雄犬交配。
在所有的犬中，DEA[1-]血型的占35%-60%，DEA[1.1]血型的犬占到33%-45%，DEA[1.2]血型的犬占到7%-20%[10]，各血型的分布可能与地区和品种有关。由于近几十年世界各地的犬种在国家、大洲之间频繁交流，这种地区差异也在逐渐消失。从上面的数据可以看出，繁殖中，DEA[1-]雌犬遇到DEA[1+]血型的雄犬可能性是非常高的。所以，如果要保证爱犬的繁殖安全和质量，就必须明确的知道犬的血型，不论雌犬的血型是DEA[1-]、DEA[1.1]还是DEA[1.2]，对于科学繁育都是十分重要的。虽然过去的犬繁育者对这个问题认识不足，但过去一个世纪以来，并没有严重影响到大部分的繁育者。因为，许多纯种犬繁育过程中都采用近亲繁殖的方法，来强化血统，近亲的犬血型大多又都是一致的，在自然的状态下避免了因血型不同导致的仔犬溶血。虽然近亲繁殖也带来了许多遗传方面的疾病。
5、 结语
虽然，犬的血型在犬输血治疗和犬繁殖中具有重要意义，但由于国内动物医院和医生没有实用、简单、低价的工具检测犬血型，所以临床应用风险很大，且效果无法保障。要提高治疗水平，增加繁育成功率和科学性，当务之急要尽快推动犬血型检测的普及，引进或研制先进的血型检测方法，建立全国性的犬血型数据库。为实现犬输血疗法广泛应用和优生优育打下良好的基础。将来，犬的血型和人的一样，成为疾病治疗的一个有力保障，一个鲜明的个体标志。
犬临床输血疗法
(北京康乐佳宠物医院 穆子会)
输血疗法主要是通过给机体输入正常生理机能的血液达到补血、止血、解毒等疗效的一种治疗措施。意义在于迅速增加循环血量和体液量,维持一定的血压，增强血液运输氧的能力，增加蛋白质浓度及血液凝固性,刺激造血机能，使新陈代谢旺盛, 内分泌活动增强,血液内的毒素被红细胞吸附变为无毒从而提高机体的全身免疫力。当失血量少于30 mL/ kg
时可采用晶体液(林格氏液等)治疗;当失血量为30mL/ kg～40mL/kg时,可选用血浆;
当失血量达50mL/kg 或红细胞压积降低更多时,需要补充全血。
输血疗法主要用于犬外伤及某些疾病引起的大出血、失血过多、休克、各种类型的贫血、白细胞减少、、凝血不良、恶病质败血症和危重传染病。
输血是补充动物血液或某一成分的一种安全有效的挽救生命疗法。犬血液占体重的8%—9%（即每千克体重有80～90mL血液）,而幼年动物血液占体重可达10%。
一 、犬血型系统
依据红细胞表面抗原不同分类，犬至少有13种红细胞血型，但只有6个血型有意义，它们是DEA系统的DEA1.1、1.2、3、4、5、7血型。DEA1血型有多个等位基因，包括DEA1.1、DEA1.2、DEA1.3和一个无效血型，DEA1.1抗原最重要，其次是DEA1.2。如果供血犬是DEA1.1阳性，受血犬是DEA1.1阴性，初次输血将致敏，第二次输血，将很快或在12h内发生输血溶血反应，导致输入的红细胞崩解，甚至危机生命。因此，不能用DEA1.1阳性犬作供血犬。 犬DEA4阳性率为98%，阴性率为2%，不管犬DEA4为阳性或阴性，都可作为供血犬，故称“通适供血犬或万能供血犬”。
临床上给未输过血的犬，初次输血时，可以不做交叉配血试验或检验血型。但是，若初次输入了不相合的血型血液，输入血液的半衰期约12ｈ；如果初次输入相合血型的血液时，输入血液的半衰期为21d。所以初次给犬输血时，为了效果更好，鉴别血型或做交叉配血试验，根据血型或试验结果输血是很重要的。
二、交叉配血实验
主侧试验=供血者的红细胞+受血者的血清 次侧试验=受血者的红细胞+供血者的血清
•在37℃下进行以保证凝集反应得以充分显示。
交叉配血试验有多种操作方法，现选用较多应用的一种方法，详述如下：
1) 用EDTA抗凝，分别从受血者和供血者采血，或从供血袋内取血； 2) 在1000转/ｍin离心机里离心供血者和受血者血液5ｍin； 3) 用移液管吸取上面血浆，放入另外试管，并标记；
4) 用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗红细胞。操作为加入洗涤液后，用手指轻弹试管底，使红细胞和洗涤液混合，再1000转/ｍin离心5ｍin，取上清液仍掉，如此重复3次；
5) 然后用磷酸盐缓冲液或生理盐水制成含3%～5%的红细胞悬液； 6) 主测配血试验：取2滴受血者血浆和1滴供血者红细胞悬液，轻轻混合； 7) 副测配血试验：取2滴供血者血浆和1滴受血者红细胞悬液，轻轻混合； 8) 受血者对照试验：取2滴受血者血浆和1滴受血者红细胞悬液，轻轻混合；
9) 在室温条件下放置15ｍin；
10) 1000转/ｍin离心15秒，观察血浆有无溶血；轻轻摇动试管，悬浮红细胞，观察红细胞有无凝集。
1) 用EDTA抗凝，分别从受血者和供血者采血，或从供血袋内取血； 2) 在1000转/ｍin离心机里离心供血者和受血者血液5ｍin； 3) 用移液管吸取上面血浆，放入另外试管，并标记； 4) 用磷酸盐缓冲盐水或生理盐水洗红细胞。操作为加入洗涤液后，用手指轻弹试管底，使红细胞和洗涤液混合，再1000转/ｍin离心5ｍin，取上清液仍掉，如此重复3次； 5) 然后用磷酸盐缓冲液或生理盐水制成含3%～5%的红细胞悬液； 6) 主测配血试验：取2滴受血者血浆和1滴供血者红细胞悬液，轻轻混合； 7) 副测配血试验：取2滴供血者血浆和1滴受血者红细胞悬液，轻轻混合； 8) 受血者对照试验：取2滴受血者血浆和1滴受血者红细胞悬液，轻轻混合； 9) 在室温条件下放置15ｍin； 10) 1000转/ｍin离心15秒，观察血浆有无溶血； 轻轻摇动试管，悬浮红细胞，观察红细胞有无凝集。 交叉配血试验判断标准如下： 0 = 无凝集。
1＋ = 在自由红细胞中可见有多个小凝粒。 2＋ = 存在有大凝块，并混有较小团块。 3＋ = 许多大凝块。
4＋ = 凝成一块，无自由红细胞。 交叉配血试验无凝集时才可以输血。
犬主测配血试验是检验受血犬血清中是否有抗供血犬的红细胞抗体，如果有则不能输血。副测配血试验是检验供血犬血清中是否有抗受血犬红细胞抗体，即使有也可以忽略，因为供血犬血液进入受血犬体内后很快被稀释了。由于多数犬不存在自然产生的抗体，因此从未输过血的初次交叉配血试验，一般是无凝集，但供血犬血液在不相合受血犬体内的半衰期约仅12ｈ。凡是曾经输过血的犬，在第二次输血前，即使用同一供血犬，也一定要做交叉配血试验。
•
凝集反应（自身免疫反应）即红细胞像葡萄样积聚在一起，有时可以被清楚地看到
（在血液凝集管的边
缘），有时得在显微镜下才能看到（在一个未染色的湿涂片或染色的涂片上）。 三、血液的采集和保存
• 犬体的含血量为85 mL/ kg～90 mL/ kg ,猫为65 mL/ kg～ 75 mL/ kg。采血总量
以全身血量的
20 % 为安全限度。一次采血量不应超过22 mL/ kg ,15 kg～20 kg 体重
的犬每次可采血200 mL～250 mL ;猫每次可采取60 mL 左右,每隔2 周～3 周采血一次。如果现采现输,可直接在血液中加入抗凝剂。方法为用一次性注射器先吸取抗凝剂(40 g/ L 枸橼酸钠液与血液比例为1 ∶9) 从供血犬猫静脉采血,一次不够可重复多次采血。将采集的抗凝血立即注入盛有生理盐水或糖盐水的100 mL～200 mL 摇并加入5 mL～10
瓶内,轻
℃～
mL地塞米松注射液即可进行输血。若不立即输血可存放在4
8 ℃冰箱,24 h 内仍可使用。
四、血液及其成分的输入
输血量 根据病情需要及体重决定。研究表明,2. 2 mL/kg 的全血或1 mL/ kg 红
细胞可使红细胞压积升高1 %。输血过量会加重心血管负担,引起肺水肿及急性充血性心
力衰竭。犬通常输血量为5mL/ kg～10 mL/ kg •需要输血量（mL）=（期望
PCV-实际PCV/供血者PCV）*受血者血容量
（mL）
• 输血速度 输血速度与疾病种类、心肺功能状态密切相关。一般情况下,输血速度不宜太快,特别在开始输血的前15min内速度应慢,以后可增加输血速度, 通常犬以5 mL/ min
为宜。
五、输血反应及其处理
（1）输血溶血：犬出现不安、流口水、大小便失禁、呼吸困难、血压降低、惊厥和呕吐等，急性死亡不多见。慢性溶血可能在输血后1～2周发生，表现为贫血，一般无任何临床症状。
•
处理方法:立即停止输血,改注0.9%生理盐水或5%～10%葡萄糖液,并碱化尿液,静脉注射碳酸氢钠液。皮下注射肾上腺素,并使用强心利尿剂进行抢救。
（2）发热：
•在输血期间及输血后1 h～2 h 内体温升高1 ℃以上并有发热症状称为发热反应。
其原因可能有热原性的、物理或化学溶血性的和细菌性的当动物体温升高40℃以上，应
仔细寻找原因，并给予治疗。 （3）寻麻疹：
在输入全血或血浆时，有时可发生寻麻疹，这是受血动物抗体对抗输入全血或血浆中蛋白质的反应。临床上最典型表现为动物脸面部肿胀，有的肿胀的特别严重。
（4）血液污染：采血时消毒不严格，会使血液被微生物污染。血液被污染后，颜色将变的发淡或变深。如果病原微生物在血液里大量繁殖和产生内毒素，输血后将引起动物体温升高、败血症或休克。
（5）紫癜：其免疫机理可能是血小板被破坏掉了
（6）血流循环超载：临床上表现为咳嗽、结膜发绀和呼吸困难。胸部X线片可见血管充血和明显的肺水肿。
（7）代谢并发症：：输血引起的代谢并发症有低钙血症和高钾血症，发生在给动物大量输血时。低钙血症是由于输入过多的抗凝剂枸橼酸盐，表现为心电图上Q-T间期延长，但心率正常；严重的低钙血能引起急性死亡。高钾血症是由于输入大量贮存血液引起。在红细胞贮存时，细胞内钾离子漏出到血浆里，输入此血液，可危及肾机能，引起钾中毒。 六、输血的注意事项
• 用枸橼酸钠做抗凝剂进行大量输血后,应立即补充钙制剂。否则会因血钙骤降,导致心肌机能障碍,重则发生心跳骤停而死亡。
• 在输血前10 min～15 min 使用抗组胺药,可减少或消除输血反应。
• 当发生输血反应时应立即停止或减慢输血的速度;增加晶体液输入的速度;使用抗组胺药、皮质类固醇类药物、肾上腺素等。为维持血压可使用多巴胺或间羟胺。 • 当输血速度太快或循环血容量过多时,会发生呕吐。
• 不应将含钙的晶体液(乳酸林格氏液等) 和血液通过相同的静脉输入。这些含钙的溶液可使血液中抗血凝剂的作用失效。0.9%氯化钠溶液常作为伴随红细胞输入的液体。
犬的血型
（北京康乐佳宠物医院 李铭川）
狗狗的的血型与人的不一样，目前在狗身上发现了13种血型，但是只有6种血型有临床意义，一般来说42%的狗有相同的血型，因此受血犬需要匹配相近的血型才可以进行输血。
血液是由血浆，红细胞，白细胞和血小板组成。骨髓生成红细胞和白细胞然后释放到血浆里去进行全身循环。
目前在13种血型当中有6种是犬主要的血型，但是40%-45%的犬有同一种血型。60%的灵缇拥有万能的血型，所以经常把灵缇作为供血犬，拳狮，爱尔兰猎狼犬，德国牧羊犬，杜宾，比特斗牛梗也经常作为供血犬。因为只有DEA（犬红细胞表面抗原）1.1阴性（万能血型）的犬才能作为供血犬。大部分犬可以忽略他们本身的血型而接受此种血型，输血前做交叉配血有效的保证了您的犬与供血犬的血液匹配。
在紧急情况下，未输过血的犬可以接受其他血型犬的血液。第一次输异型血后，机体会产生相应的抗体，如果要再次输血时，就需要进行交叉配血实验，来确定血型是否匹配。
为了保证您的宠物在进行输血时的安全，在输血之前最好知道它的血型。使用试纸可以快速而简单的知道您的犬的血型。在国外宠物医生建议所有的宠物主人都应对爱犬做血型鉴定。
犬的血型和万能供血犬
到目前为止，已报道的犬血型有：
- 红细胞抗原1.1（A1）； - 红细胞抗原1.2（A2）； - 红细胞抗原3（B）； - 红细胞抗原4（C）； - 红细胞抗原5（D）； - 红细胞抗原6（F）；
- 红细胞抗原7（Tr）和红细胞抗原8（He） 每个血型又根据有无rh抗原分为阴性和阳性
只有DEA 1.1阴性血可以输血给DEA 1.1阴性血的狗，DEA
1.1阳性血犬可以接受DEA 1.1阴性血或阳性的血
犬的血库
一些兽医有他们自己的供血犬而另一些使用血库的血液。国外的一些血库有他们自己的供血犬，然而另一些则依靠志愿者供血，随着兽医外科的发展和越来越多的人愿意对伴侣动物投入医疗上的照顾（时间和金钱），对供血犬的需求也在增加。一些血库也有了去寻找血源的动力。
作为献血犬的条件：它的年龄最好在1-7岁之间，体重至少在50磅以上，身体健康，献血时无任何医疗史（心丝虫，体外寄生虫疫苗除外），在采血时有一定的温顺性。供血犬必须完成全套的免疫程序。在作为供血犬之前，必须检测其血型，只有那些拥有普遍血型的狗采可以作为供血犬，采血需要15-25分钟。
提供的血液应该检查如巴贝斯虫，利什曼原虫等血液传染病。
献血时一般从颈静脉采血，因为这是脖子上最大的静脉。一只犬通常能提供22ml/kg体重的血液；采血过程并不疼痛，狗狗通常在采血之后得到奖励。所以请您不必担心。
Source
University of Tennessee
Current Canine and Feline Blood Typing Methods and Issues U. Giger
Josephine Deubler Genetic Disease Testing Lab School of Veterinary Medicine University of Pennsylvania
Canine and Feline Blood Donor Screening for Infectious Disease
K. Jane Wardrop, Nyssa Reine, Adam Birkenheuer, Anne Hale, Ann Hohenhaus, Cynda Crawford, and Michael R. Lappin
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