碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制及同源性分析

检验医学・　中国当代医药２０１７年２月第２４卷第６期　碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制　及同源性分析　谢逢春　胡龙华　宁长秀，　金迎庆　１．南昌仁爱妇产医院检验科，江西南昌３３００２５；２．南昌大学第二附属医院检验科，江西南昌３４４０００　３３０００６；　３．江西省抚州市第一人民医院检验科。江西抚州【摘要】目的探讨碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制及同源性。方法选取２０１４年１０月～２０１６年３月南昌仁爱　妇产医院、南昌大学第二附属医院、抚州市第一人民医院检验科分离出的６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌作为研　究对象，采用药敏实验分析耐药率、改良Ｈｏｄｇｅ试验及乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）协同试验检测碳青霉烯酶、聚合酶　链反应（ＰＣＲ）扩增耐药基因并确定基因型、脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）分析菌株同源性。结果６Ｏ株菌株对抗菌药物　的耐药率前３位依次为：头孢西丁（１００．０％）、头孢他啶（９０．０％）、氨曲南（９０．０％），多黏菌素Ｂ耐药率最低（５．０％）；　改良Ｈｏｄｇｅ试验阳性率为７６．７％，ＥＤＴＡ协同试验阳性率为８１．７％；６０株菌株中检出碳青霉烯酶基因３９株，其中　Ｋｐｃ一２　３株，ＩＭＰ一４　２４株，ＩＭＰ一８　１２株。携带其他Ｂ一内酰胺酶基因４５株；６０株菌株经ＰＦＧＥ分为Ａ—Ｏ　２０种不　同的型别５９株，仅有１株多次分型均未成功。结论阴沟肠杆菌耐药机制主要与ＫＰＣ、ＩＭＰ基因有关。　【关键词】碳青霉烯酶；阴沟肠杆菌；耐药机制；同源性　【中图分类号】Ｒ３７９．９　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１６７４—４７２１（２０１７）０２（ｃ）一０１２６—０３　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｔｏ　ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ　Ｘ／Ｅ　Ｆｅｎｇ－ｃｈｕｎ　ＨＵ　Ｌｏｎｇ－ｈｕａ２　Ｎ１ＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｘｉｕ　ＪＩＮ　Ｙｉｎｇ－ｑｉｎｆ　１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｃｈａｒｉｔｙ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｆｏｒ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　３３００２５，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　ｔｏ　Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　３３００２５，Ｃｈｉｎａ；　３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ｐｅｏｐｌｅ　Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｆｕｚｈｏｕ　Ｃｉｔｙ　ｉｎ　Ｊｉａｎｇｘｉ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｆｕｚｈｏｕ　３４４０００，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ｈｏｍｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｔｏ　ｃａｒ—　ｂａｐｅｎｅｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　６０　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　ｔｏ　ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ　ｆｒｏｍ　Ｏｃｔｏｂｅｒ　２０１４　ｔｏ　Ｍａｒｃｈ　２０１６　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｆｒｏｍ　Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｃｈａｒｉｔｙ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｆｏｒ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ，ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ａｆｆｉｌｉａｔ—　ｅｄ　ｔｏ　Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ｐｅｏｐｌｅ　Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｆｕｚｈｏｕ　Ｃｉｔｙ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｓ　ｓｔｕｄｙ　ｏｂｊｅｃｔｓ．Ｄｒｕｇ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉ—　ｔｙ　ｔｅｓｔ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎＣｅ　ｒａｔｅ，ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｈｏｄｇｅ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　ＥＤＴＡ　ｓｙｎｅｒｇｙ　ｔｅｓｔ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｃａｒ－　ｂａｐｅｎｅｍ，ＰＣＲ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｍｐｌｉｆｙ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｇｅｎｅｓ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ，ＰＦＧＥ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ａｎａｌｙｚｅ　Ｓｔｒａｉｎ　ｈｏ—　ｍｏｌｏｇｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　６０　ｓｔｒａｉｎｓ　ｔｏ　ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｏｐ　３　ｗｅｒｅ　Ｃｅｆｏｘｉｔｉｎ（１００．０％），Ｃｅｆｌａｚｉｄｉｍｅ（９０．０％），　Ａｔｒｅｏｎａｍ（９０．０％）ａｎｄ　Ｐｏｌｙｍｙｘｉｎ　Ｂ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｓｔ（５．０％）．Ｔｈｅ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｍｏｄｉｉｆｅｄ　Ｈｏｄｇｅ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　ＥＤＴＡ　ｓｙｎｅｒｇｙ　ｔｅｓｔ　ｗｅｒｅ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　７６．７％ａｎｄ　８１．７％　ａｎｄ　３９　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ　ｇｅｎｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　６０　ｓｔｒａｉｎｓ．ａｎｄ　３　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ＫＰＣ一２，２４　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ＩＭＰ一４，１２　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ＩＭＰ－８，４５　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｏｔｈｅｒ￣－ｌａｃｔａｍａｓｅ　ｇｅｎｅ；６０　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　Ａ－Ｏ　ｂｙ　ＰＦＧＥ，２０　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｙｐｅｓ　ｏｆ　５９　ｓｔｒａｉｎｓ　ａｎｄ　ｏｎｌｙ　１　ｓｔｒａｉｎ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ　ｉｎ　ｔｙｐｅ．Ｃｏｎｃｌｕ－　ｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　ａｒｅ　ｍａｉｎｌｙ　ｗｉｔｈ　ＫＰＣ　ａｎｄ　ＩＭＰ　ｇｅｎｅ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ；Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ；Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ；Ｈｏｍｏｌｏｇｙ　阴沟肠杆菌广泛存在于土壤、水等外界环境和肠　杆菌对多种抗菌药物耐药，因而临床治疗难度较大。其　道中，是肠道正常菌种之一，亦是临床上常见的感染　耐药机制主要为可产生超广谱１３一内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）　病原体。临床研究表明．其可导致皮肤和软组织、下呼　和高产头孢菌素酶（ＡｍｐＣ酶）闭。碳青霉烯类抗生素　吸道、尿路、伤口及中枢神经系统感染Ｉ　。由于阴沟肠　对产ＡｍｐＣ和ＥＳＢＬ的革兰阴性杆菌具有很好的治疗　【作者简介］谢逢春（１９７５一），女，江西寻乌人，硕士，副主任医　师，研究方向：细菌耐药机制　通讯作者　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．６　Ｆｅｂｒｕａｗ　２０１　７　效果，是治疗多重耐药肠杆菌感染的最后选择　ｌ。　近年来，随着碳青霉烯类抗生素的大量甚至过度使　用，开始出现新型耐药菌，碳青霉烯类耐药的肠杆菌　中国当代医药２０１７年２月第２４卷第６期　・检验医学・　科细菌逐渐增加，给临床抗感染治疗带来严重挑战。　后７２　延伸１０　ｍｉｎ。提纯获取的基因阳性菌株ＰＣＲ　本研究探讨碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌的耐药机制，　如下。　１材料与方法　１．１材料　扩增产物，双向测序下与已知序列对比，确定基因型。　凝胶电泳（ＰＦＧＥ），以Ｂｉｏｎｕｍｅｒｉｃｓ软件分析对ＰＦＧＥ　旨在为阴沟肠杆菌感染的临床治疗提供参考。现报道　１．２．５菌株同源性分析菌株同源性检测采用脉冲场　电泳图谱条带的相似系数进行分析．相似比８５％及以　上为同一菌株的不同克隆亚型¨ｏ＿“］。　收集２０１４年１０月～２０１６年３月南昌仁爱妇产　２结果　医院、南昌大学第二附属医院、抚州市第一人民医院　２．１药敏试验结果　检验科分离出的６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌．剔　株。全部菌株中分离于痰液８例。尿液６例，血液标本　用法国梅里埃生物公司生产的ＶＩＴＥＫ一２型全自动　微生物分析鉴定菌株。质控菌株采用大肠埃希菌　ＡＴＣＣ２５９２２。　表１　２１株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌对抗菌药物的耐药率　６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌对抗菌药物的　（９０．０％）、氨曲南（９０．０％），多黏菌素Ｂ耐药率最低　除同一患者重复送检相同标本及同一部位的重复菌　耐药率前３位依次为：头孢西丁（１００．Ｏ％）、头孢他啶　５例，胸腔积液２例，脓液２５例，导管液１４例。采　（５．０％）（表１）。　１．２方法　１．２．１药敏实验药敏纸片包括头孢噻肟、头孢吡肟、　头孢曲松、头孢他啶、头孢西丁、头孢唑林、呋喃妥因、　环丙沙星、庆大霉素、美洛培南、氨曲南、复方新诺明、　左氧氟沙星、多黏菌素Ｂ、亚胺培南，由英国Ｏｘｏｉｄ公　司提供；厄他培南（ＥＴＰ）、亚胺培南（ＭＰ）Ｅ—ｔｅｓｔ条由　瑞典ＡＢ　ＢＩＯＤＩＳＫ公司提供。采用琼脂稀释法进行药　敏试验，测定抗菌药物对菌株的ＭＩＣ。参照美国临床　实验室标准化协会（ＣＬＳＩ）２０１２版【５］判定结果。　１．２．２改良Ｈ０ｄｇｅ试验采用直接菌落悬液法制备　０．５麦氏浊度单位的大肠埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２菌液．以　氯化钠溶液稀释１０倍后在ＭＨ琼脂平板上涂抹均　匀，晾干后将美罗培南纸片（１０　片）贴于中部，以　２．２改良Ｈｏｄｇｅ试验及ＥＤＴＡ协同试验结果　接种环挑取待测菌菌落，于平板边缘向外划直线，３７℃　６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌中改良Ｈｏｄｇｅ试　下培养过夜。ＭＨＴ阳性：美罗培南抑菌圈处出现向内　验阳性４６例，阳性率为７６．７％：ＥＤＴＡ协同试验发现　生长，表明该菌株产碳青霉烯酶　。　４９株（８１．７％）产ＥＳＢＬｓ。　１．２．３　ＥＤＴＡ协同试验采用Ｋ—Ｂ法将新鲜待测菌　０．５麦氏浊度均匀涂布于ＭＨ琼脂平板，亚胺培南纸片　２．３耐药基因检测结果　６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌中检出碳青霉烯　（３０　片）贴于中间，同时在纸旁张贴１张无菌白纸，　酶基因３９株，其中ＫＰＣ一２　３株，ＩＭＰ一４　２４株，ＩＭＰ一８　两纸片边缘间距需为１２～１５　ｍｍ．将１０　ｔｘｌ　０．５　ｍｏｌ／Ｌ　１２株，携带其他Ｂ一内酰胺酶基因４５株。　的ＥＤＴＡ溶液滴于白纸上，３７０（２下培养过夜。协同试　验阳性：含ＥＤＴＡ白纸方向亚胺培南抑菌圈扩大，表　２．４同源性分析　明该菌株产ＥＳＢＬｓｔ洲。　１．２．４耐药基因ＰＣＲ检测制备检测基因模板。以实　６０株耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌经ＰＦＧＥ分为Ａ—Ｏ　２０种不同的型别５９株，仅有１株多次分型均未成功。　验菌株、受体菌株ＤＮＡ、接合菌株中提取的质粒、标　３讨论　近年来，随着广谱抗生素的普遍应用，细菌耐药　准菌株大肠埃希菌ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ反应。碳青　霉烯酶基因的检测采用ＰＣＲ扩增法，具体条件如下。　引起全球医学界的关注。阴沟肠杆菌是社区及医院感　可导致多部位及多器　模板：２　ｌ，体系：Ｆ　１　ｌ、Ｒ　１　ｌ，ｄｄＨ２Ｏ　９　Ｉｘｌ，ｄＮＴＰｓ　染的引起感染的革兰阴性杆菌。１１．５　ｌ，Ｔａｇ酶０．５　ｌ；循环参数设定如下：９４￣Ｃ预变　官感染。目前临床上出现越来越多的碳青霉烯类耐药　性５　ｍｉｎ，９４℃４５　Ｓ，５２℃４５　ｓ，７２℃４５　ｓ，循环３０次　阴沟肠杆菌，诱发难治性感染，因此，研究碳青霉烯类　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．６　Ｆｅｂｒｕａｒｙ　２０１　７　・检验医学・　６６７．　中国当代医药２０１７年２月第２４卷第６期　耐药阴沟肠杆菌的耐药机制以为阴沟肠杆菌感染的　临床治疗提供参考具有重要意义。　本研究得到大多数阴沟肠杆菌属于多重耐药菌．　且对抗生素的耐药水平很高。全部菌株对抗菌药物的　耐药率前３位依次为：头孢西丁（１００．０％）、头孢他啶　（９０．０％）、氨曲南（９０．０％），提示上述三种抗生素对阴　沟肠杆菌几乎无作用，其原因可能与过度使用有关，提　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ＵＫ［Ｊ］．Ｊ　Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２００９，６３（４）：６５９－　［３］林伯熹，李彬，刘秀琴，等．碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐　药机制研究ｆＪ１＿中国感染与化疗杂志，２０１６年，１６（２）：１９４—　１９９．　［４】李柯，赵克斌，李浩，等．产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的耐　药机制及治疗进展　中国药物与临床，２０１４，１４（６）：７７９—　７８１．　示临床上应酌情使用头孢西丁、头孢他啶及氨曲南。　另外，６Ｏ株阴沟肠杆菌对多黏菌素Ｂ耐药率仅为　５．０％。表明其对治疗阴沟肠杆菌有效，但多黏菌素Ｂ　具有高毒性，因而临床应用受限。与此同时，本研究结　果显示，阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药率（５６．７％）高　【５】蒲妹丽，徐绣宇，史静，等．碳青霉烯类非敏感阴沟肠杆菌　耐药基因检测及流行病学分析　第三军医大学学报，２０１５，　３７（１４）：１４４２－１４４８．　［６］夏菲，张青，李克诚，等．１例阴沟肠杆菌碳青霉烯类抗生　素耐药的机制研究［Ｊ１．疾病监测，２０１１，２６（７）：５８２—５８６．　于美罗培南（３６．７％），原因为亚胺培南的抗菌作用靶　［７］张筠，邓在春，马红映，等．耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的　位为ＰＢＰ２，而美罗培南的抗菌作用靶位包括ＰＢＰ３和　ＰＢＰ２ｔ　。改良Ｈｏｄｇｅ试验阳性率为７６．７％，出现假阳　耐药机制及同源性分析　中围现代医生，２０１５，５３（２７）：　１６—１９．　性的作用机制为细菌外膜蛋白、ＡｍｐＣ酶缺失或菌株　［８］蔡加昌，周宏伟，陈功祥，等．一株耐碳青霉烯类的阴沟肠　携带且高表达ＥＳＢＬＬ１３１。受试阴沟肠杆菌中检测出ＫＰＣ、　杆菌的ＫＰＣ酶检测［Ｊ］．中华医学杂志，２００８，８８（２）：１３５—　ＩＭＰ基因，提示阴沟肠杆菌耐药机制主要与ＫＰＣ、ＩＭＰ　１３８．　基因有关，与既往研究　５］一致。ＫＰＣ酶属于Ａｍｂｌｅｒ　［９】姚彬，习慧明．耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药机制及　分类的Ａ类丝氨酸Ｂ内酰胺酶，可在多数肠杆菌科细　同源性分析ｃＪ】．中华医院感染学杂志，２０１３，２３（１７）：４０８４—　菌中被发觋。其与ＳＭＥ碳青霉烯酶有４５％的氨基酸　同源性，可通过质粒介导产生耐药。ＩＭＰ酶多与ａａｃ、　ｑｎｒＳ、ＡｍｐＣ、ＥＳＢＬｓ及膜孔蛋白缺失共同作用导致耐　药。沟肠杆菌中主要的ＩＭＰ酶包括ＩＭＰ一８、ＩＭＰ一４、　４０８６．　【１０】黄婷婷，周志健，杨英为，等．耐碳青霉烯类鲍曼不动杆　菌耐药机制及同源性分析　中国消毒学杂志，２０１６，３３　（５）：４９９—５０１．　ＩＭＰ一１。耐药基因同源性分析得到６０株菌株经被分　［１１】宁长秀，胡龙华，汪红，等．南昌４家教学医院碳青霉烯　为２０种不同的型别，提示上述菌株来源于不同个体，　类耐药肺炎克雷伯菌耐药机制及同源性分析［Ｊ］．临床检　验杂志，２０１４，３２（４）：３０６—３１０．　抗生素耐药机制的研究ｌＪ『．中国抗生素杂志，２０１１，３６　（４）：３０３—３１４．　敏感性细菌可能接受耐药菌株水平传播的耐药基因。　复杂，主要与ＫＰＣ、ＩＭＰ基因有关，院内感染应多关注　该类菌株的传播。为避免阴沟肠杆菌的播散和耐药谱　制提供参考依据。　【参考文献】　［１］Ｙａｎｇ　ＦＣ，Ｙａｎ　ＪＪ，Ｈｕｎｇ　ＫＨ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｅｒ—　ｔａｐｅｎｅｍ——ｒｅｓｉｓｔａｎｔ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏｏｌｇａｅ　ｉｎ　ａ　Ｔａｉｗａｎｅｓｅ　Ｕ－－　１２】张肖，宋诗铎．２株阴沟肠杆菌临床分离株对碳青霉烯类　综上所述，碳青霉烯类耐药阴沟肠杆菌耐药机制　【莫春花，孙珊．阴沟肠杆菌耐碳青霉烯类抗生素的耐药　的扩大，应建立检测体系，为阴沟肠杆菌的预防和控　【１３］机制研究进展『Ｊ１．中国微生态学杂志，２０１３，２５（３）：３７１—　３７３．　【１４］庞峰，李艳华，贾秀芹，等．改良Ｈｏｄｇｅ试验检测肠杆菌　科ＩＭＰ型碳青霉烯酶的性能评价　国际实验诊断学，　２０１３，１７（１１）：１９８１—１９８４．　ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２０１２，５０（２）：２２３—　２２６．　［１５］张嵘，蔡加昌，周宏伟，等．对亚胺培南耐药粘质沙雷菌　中质粒介导ＫＰＣ一２型碳青霉烯酶的研究分析［Ｊ】．中华　微生物学和免疫学杂志，２００７，２７（８）：７３４—７３８．　［２］Ｄｏｕｍｉｔｈ　Ｍ，Ｅｌｌｉｎｇｔｏｎ　ＭＪ，Ｌｉｖｅｒｍｏｒｅ　ＤＭ，ｅｔ　．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ　ｐｏｒｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｅ￣ａｐｅｎｅｍ－ｒｅ・　ｓｉｓｔａｎｔ　Ｋｌｅｂｓ　ｉｅｌｌａ　ａｎｄ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｓｐｐ．ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　（收稿日期：２０１６—１１－１４本文编辑：许俊琴）　ＣＨＩＮＡ　ＭＯＤＥＲＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　Ｖｏ１．２４　Ｎｏ．６　Ｆｅｂｒｕａ￣２０１　７