CD4^+CD25^+Foxp3^+Tregs在自身免疫性甲状腺疾病中的作用研究

论　著Ｌｕｎｚｈｕ　《中国医学创新》第１４卷第２３期（总第４１３期）２０１７年８月　ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ在自身免疫性甲状腺　疾病中的作用研究术　黄广英①榻文婷①何灵杰①　【摘要】目的：探讨ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ在自身免疫性甲状腺疾病（Ａ１ＴＤ）中的作用。方法：收　集２０１４年２月一２０１６年１１月在本院进行检查的ＡＩＴＤ患者８０例为治疗组，其中Ｇｒａｖｅｓ（ＧＤ）患者４｜Ｄ例，　为ＧＤ组；桥本甲状腺炎（ＨＴ）患者４０例，为ＨＴ组；选取健康体检人员２０例为对照组。采用流式细　胞术检测外周血ＣＤ４　Ｔ、．ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ细胞数量和比例，采用ＲＴ—ＰＣＲ检测外周血Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达　水平，采用化学发光法对血清中甲状腺素（ＴＳＨ）、总三碘甲状腺原氨酸（ＴＴ，）、总甲状腺素（　Ｉ　）、甲　状腺球蛋白抗体（ＴｇＡｂ）和甲状腺过氧化酶抗体（ＴＰＯＡｂ）的水平进行测定。结果：三组ＴＳＨ、ＴＴ，、　ＴＴ　、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ比较，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；三组外周血ＣＤ４　Ｔ细胞数量比较，差异无　统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）；ＧＤ组外周血ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率与对照组比较，差异无统计　学意义（Ｐ＞０．０５）；ＨＴ组外周血ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率明显低于对照组，差异有统计学　意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；ＧＤ组和ＨＴ组外周血Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达量均明显低于对照组，差异均有统计学意义　（Ｐ＜０．０５）；自身免疫性甲状腺疾病的ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ与ＴＳＨ、ｎ、　、ＴｇＡｂ和ＴＰＯＡｂ有明显　正相关性（Ｐ＜０．０５　ｏ结论：ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ可能在ＡＩＴＤ的发生发展进程中起着一定的作用，深人　研究ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ在ＡＩＴＤ中的作用将有助于建立新的预防和治疗策略。　【关键词】　自身免疫性甲状腺疾病；　Ｇｒａｖｅｓ；　桥本甲状腺炎；　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　基金项目：东莞市科技计划医疗卫生类科研一般项目　（２０１５１０５１５００００８４）　①广东省东莞市人民医院通信作者：黄广英　广东东莞５２３０００　ｉｎ　ａｎ　ａｎｔｉｃｉｐａｔｅｄ　ｄｉｉｃｕｌｔｆ　ａｉｒｗａｙ：Ｆｌｅｘｉｂｌｅ　ｆｉｂｅｒｏｐｔｉｃ　ｂｒｏｎｃｈｏｓｃｏｐｅ　症肺炎的临床分析ｆＪ］．浙江医学，２０１６，３８（７）：４９７—４９９．　【１　４］黄业清，甘斌，翁羡吾，等．内科机械通气患者肠内营养支　持时机的探讨　广西医科大学学报，２０１２，２９（４）：５７５—　５７６．　ａｓｓｉｓｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｔｕｂａｔｉｎｇ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｒ－ｇｕｉｄｅｄ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｃａｒｄ　Ａｎａｅｓｔｈ，２０１６，１９（１）：１４９—１５１．　【７］杨淑梅，关淑芬，吴杨，等．两种吸痰法预防呼吸机相关性　肺炎的效果研究ｆＪ】．中华医院感染学杂志，２０１６，２６（１５）：　３３９８－３３９９．　［１５】邱敏珊，尹海燕．支气管肺泡灌洗术对卒中并发重症肺炎患　者的作用『Ｊ１．中国脑血管病杂志，２０１６，１３（１１）：５６９～５７４．　［１６］曾以萍，汪翠玲．纤维支气管镜肺泡灌洗治疗医院获得性重　症肺炎的疗效分析ｆＪ］．中国医学创新，２０１２，９（３５）：３６—　３７．　［８刘静，曾玉兰，邹潇，等．床边纤维支气管镜灌洗联合无创　８Ｊ通气治疗老年吸人性肺炎并低氧血症５４例ＩＪＪ．中国老年学杂　志，２０１３，３３（３）：６６１—６６２．　［９】韩秋，李靖，沈军，等．床旁纤维支气管镜辅助治疗卒中相　关性肺炎的疗效［Ｊ］．中华实验和临床感染病杂志（电子版），　２０１６，１０（３）：３２３—３２６．　［１０】Ｓｕｎ　Ｃ，Ｘｕｅ　Ｆ　Ｓ，Ｌｉ　Ｒ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇ　ｄｉｓｐｏｓａｂｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｕｓａｂｌｅ　ｆｉｂｒｅｏｐｔｉｃ　ｂｒｏｎｃｈｏｓｃ叩ｅｓ［　Ａｎａｅｓｔｈ　Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ　Ｃａｒｅ，　【ｌ７】丁硕，王以照，李梅，等．经导管外途径纤支镜支气管肺泡　灌洗术在重症肺炎中的应用【ＪＪ．中国医疗器械信息，２０１６，　２２（１４）：１２—１３．　【ｌ８】刘莉娟．机械通气下经纤支镜吸痰并肺段灌洗术配合静脉抗　生素治疗重症肺炎的临床观察ｆＪ】．中国医学创新，２０１３，１０　（３）：４ｌ一４２．　２０１５，４３（６）：７８６．　［１　１】彭伟，童洪杰，陈琨，等．床旁纤维支气管镜灌洗治疗重症　肺炎的疗效分析［ＪＪ．中国现代医生，２０１６，５４（３）：９Ｏ一９３．　【１２】王美礼，解颖，戴红，等．静脉注射大剂量免疫球蛋白在老　［１９】倪楠，林琳．支气管肺泡灌洗治疗老年重症肺炎的临床疗效　观察［Ｊ】．中华老年多器官疾病杂志，２０１６，１５（１）：３４～３７．　［２０】付文良，李春媛．支气管肺泡灌洗治疗老年重症肺炎合并　年患者长期机械通气肺部感染治疗中的作用［Ｊ］．　国医药导　刊，２０１５，１７（９）：９２６—９２７．　呼吸衰竭的临床效果评价【Ｊ］．中国现代药物应用，２０１６，１０　（２）：９６—９７．　［１３】王殷，陈晓飒，杨子浩，等．纤维支气管镜灌洗治疗儿童重　一（收稿日期：２０１７—０３—１５）（本文编辑：康珥）　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ，２０１７　１６一　《中国医学创新》第１４卷第２３期（总第４１３期）２０１７年８月　论　著Ｌｕｎｚｈｕ　Ｔｒｅｇｓ　Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ　ｉｎ　Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　Ｔｈｙｒｏｉｄ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ／ＨＵＡＮＧ　Ｇｕａｎｇ—ｙｉｎｇ。　ＸＵＡＮ　Ｗｅｎ－ｒｉｎｇ，ＨＥ　Ｌｉｎｇ－ｊｉｅＪ／Ｍｅｄｉｃａｉ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ，２０１７。１４（２３）：０１６—０２０　【Ａｂｓｔｒａｃｔ　ｌ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ　ｉｎ　ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ｔｈｙｒｏｉｄ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　（ＡＩＴＤ）．Ｍｅｔｈｏｄ：８０　ｃａｓｅｓ　ｏｆＡｒｒＤ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｆｅｂｒｕａｒｙ　２０１４　ｔｏ　Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１６　ｉｎ　ｏｕｒ　ｈｏｓｐｉｔａ１．Ｉｎｃｌｕｄｅｄ　４０　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｇｒａｖｅｓ（ＧＤ），ａｓ　ＧＤ　ｇｒｏｕｐ，４０　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ　ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ（ＨＴ），ａｓ　ＨＴ　ｇｒｏｕｐ，２０　ｃａｓｅｓ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｐｅｏｐｌｅ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｓ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｉｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ４￣Ｔ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ａｎｄ　ｐｒｏｐｏ￣ｉｏｎ　ｏｆ　ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ　ｃｅｌｌｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ／ｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅ时，ｔ｝ｌｅ　ｐｅ￣ｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　Ｆｏｘｐ３　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ＲＴ－ＰＣＲ，ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｔｏｔｌａ　ｔｈｙｒｏｘｉｎｅ（ＴＳＨ），ｔｏｔｌａ　ｈｔｒｅｅ　ｔｒｉｉｏｄｏｔｈｙｒｏｎｉｎｅ　（　Ｉｒｒ３），ｔｏｔａｌ　ｈｔｙｒｏｘｉｎｅ（　），ｔｈｙｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＴｇＡｂ）ａｎｄ　ｔｈｙｒｏｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＴＰＯＡｂ）ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴＳＨ，ＴＴ３，　ｎ，ＴｇＡｂ，ＴＰＯＡｂ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｈｔｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｏｆ　ＣＤ４￣Ｔ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５）．　Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ＣＤ４　ＣＤ２５￣Ｔｒｅｇｓ　ｃｅｌｌｓ　ｎａｄ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ＣＤ４￣Ｉ＇ｏｆ　ＧＤ　ｇｒｏｕｐ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ，ｈｔｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｎｏ　ｓｉｎｇｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ（Ｐ＞Ｏ．０５）．Ｐｅｒｉｐｈｅｒｌａ　ｂｌｏｏｄ　ＣＤ４　ＣＤ２５￣Ｔｒｅｇｓ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｔＩｌｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ＣＤ４＊ｒ　ｏｆ　ＨＴ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ　ｌｏｗｅｒ　ｈｔａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｒｇｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＧＤ　ｒｇｏｕｐ　ｎａｄ　ＨＴ　ｇｒｏｕｐ　ｗｅｅｒ　ｓｉｎｇｉｆｃａｎｄｙ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５）．ＣＤ４￣ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ　ｏｆ　ＡＩＴＤ　ｗａｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＴＳＨ，ＴＴ３，仉，ＴｇＡｂ　ａｎｄ　ＴＰＯＡｂ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３＋Ｔｒｅｇｓ　ｍａｙ　ｐｌａｙ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｒｏｌｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ＡＩＴＤ．Ｆｕｒｔｈｅｒ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｏｌｌ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３￣Ｔｒｅｇｓ　ｉｎ　ＡＩＴＤ　ｉｗ１１　ｈｅｌｐ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｎｅｗ　ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｓｔｒａｔｅｇｙ．　【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｔｈｙｒｏｉｄｄｉｓｅａｓｅ；　Ｇｒａｖｅｓ；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓｔｈｙｒｏｉｄｉｉｆｓ；　ＣＤ４＋ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３＊Ｔｒｅｇｓ　Ｆｉｒｓｔ－ａｕｔｈｏｒ’ｓ　ａｄｄｒｅｓｓ：Ｄｏｎｇｇｕａｎ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ。Ｄｏｎｇｇｕａｎ　５２３０００，Ｃｈｉｎａ　ｄｏｉ：１０．３９６９６．ｉｓｓｎ．１６７４—　８５．２０１７．２３．００５　自身免疫性甲状腺疾病（Ａｕｔｏ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｔｈｙｒｏｉｄ　者４０例，男１７例，女２３例，年龄３６—５３岁，平均　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，ＡＩＴＤ）是人类最常见的器官特异性自身　（４ｏ．６±９．３）岁，作为ＧＤ组；桥本甲状腺炎（ＨＴ）　免疫性疾病，在人群中的发病率约为５％。随着现　患者４０例，男１６例，女２４例，年龄３７～５４岁，平　代饮食结构的改变和生活节奏的加快，ＡＩＴＤ的发　均（４１－３　４－１０．２）岁，作为ＨＴ组；另外选取２０例　病率呈现逐年增高的趋势［１－２］０　ＣＤ４　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ是　健康体检人员作为对照组，男７例，女１３例，年　近年研究发现的一类具有维持自身免疫稳定的Ｔ细　龄３５～５３岁，平均（３９．８　４－９．１）岁。三组基本资料　胞亚群，它能够识别自身抗原并抑制自身反应性Ｔ　比较，差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５），具有可比性。　细胞的免疫反应，在免疫自稳方面起着重要作用［３】。　１．２方法ＧＤ组、ＨＴ组及对照组患者分别在清晨　本研究通过患者检测外周血ＣＤ４　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ细胞数　采集空腹外周静脉血１５　ｍＬ作为标本，取２　ｍＬ静　量和比例的变化，以及Ｆｏｘｐ３基因表达情况，与患　脉血，２０００　ｒ／ｍｉｎ离心１２　ａｒｉｎ，分离血清，采用化　者体内相关激素和抗体水平等参数进行相关性分析，　学发光试剂盒对血清中的血清中甲状腺素（ＴＳＨ）、　探讨其在ＡＩＴＤ发病机制中的作用，并为免疫调控治　总三碘甲状腺原氨酸（　）、总甲状腺素（Ｔｒ４）、　疗的策略提供有价值的参考依据。现报道如下。　甲状腺球蛋白抗体（ＴｇＡｂ）和甲状腺过氧化酶抗体　１资料与方法　（ＴＰＯＡｂ）进行检测。主要试剂：抗人ＣＤ４一ＦＩＴＣ、　１．１一般资料收集２０１４年２月－２０１６年ｌ１月在本　ＣＤ２５一ＰＥ购买于美国贝克曼库尔特有限公司，人　院进行检查的Ａ１ＴＤ患者８０例，人选标准：（１）符合　淋巴细胞分离液购买于北京百奥莱博科技有限公　《内科学》相应诊断标准；（２）抗甲状腺球蛋白抗体　司。（Ｉ）取５ｍＬ静脉血，将单个核细胞（Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　和抗甲状腺过氧化酶抗体滴度均明显升高；（３）经　Ｂｌ０ｏｄ　Ｍｏｎｏｎｕｅｌｅａｒ　Ｃｅｌｌｓ。ＰＢＭＣ）快速进行分离，并　检查确诊为Ｇｒａｖｅｓ病及桥本甲状腺炎患者　】。排　取３　ｘ　１０　个ＰＢＭＣ加入抗人ＣＤ４一ＦＩＴＣ和ＣＤ２５一ＰＥ　除标准：（１）合并严重心、脑血管系统性疾病的患　ｍＡｂ放置于避光环境中进行室温孵育１５　ｍｉｎ，然后　者；（２）检查前进行药物治疗及有相关病史的患　２０００　ｄｍｉｎ离心１２　ｍｉｎ。分离血清，采用流式细胞　者；（３）妊娠期及哺乳期妇女患者【５卅。所有患者及　仪对ＣＤ４　、ＣＤ４　ＣＤ２５￣Ｔｒｅｇｓ进行检测　】。（２）取　其家属知情并签订同意书。其中Ｇｒａｖｅｓ　（ＧＤ）患　５　ｍＬ静脉血分离ＰＢＭＣ，根据试剂说明书的操作　Ｍｅｄｉｃ，ｅｌ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｖｏ１．１４．Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ．２０１　７　一１７—　论　著Ｌｕｎｚｈｕ　《中国医学创新》第１４卷第２３期（总第４１３期）２０１７年８月　要求将提取细胞总的ｍＲＮＡ反转录为ｃＤＮＡ，采用　清，向每孔加人２０　Ｌ的ＭＭＴ（５　ｍｇ／ｍＬ）溶液　ＲＴ－ＰＣＲ检测外周血Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达水平网。ＰＣＲ　继续培养４　ｈ后结束。将ＤＭＳＯ加入各孑Ｌ并震荡使　。计　反应条件［８】：９５℃预变性５　ａｒｉｎ，９５℃变性反应４５　ｓ，　其充分溶解后，采用酶标仪测各孔的ＯＤ值　ｌ５２℃条件下退火４５　Ｓ，７２℃延伸反应１．５　ｍｉｎ，重　算ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ对ＣＤ４　Ｔ抑制率。　复３５个循环，７２℃延伸反应１５　ｍｉｎ，然后进行　１．３统计学处理采用ＳＰＳＳ　２６．０进行处理，所有　ＰＣＲ扩增，扩增后采用１．５％琼脂糖电泳检测扩增　数据均符合正态分布，计量资料用（　±　）表示，　产物。控制电泳电压１００　Ｖ，将电泳胶放人凝胶成　并进行ｔ或Ｆ检验；计数资料以率（％）表示，比　像系统观察结果并照相。（３）取５　ｍＬ静脉血分离　较采用　检验，采用线性回归系数法进行相关性分　ＰＢＭＣ，采用磁珠分选方法将ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ和　析。以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　ＣＤ４＋Ｔ进行分离，然后将ＣＤ４　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ和ＣＤ４＋Ｔ　２结果　按照１：１的比例混合并在９６孔培养板上接种，向　２．１三组ＴＳＨ、ＴＴ　、仉、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平比较　三组ＴＳＨ、ＴＴ３、ＴＴ４、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ比较，差异　其中加入经过灭活的自身抗原递呈细胞，经抗ＣＤ３　抗体（１００　ｎｇ／ｍＬ）刺激培养６８　ｈ后，吸去部分上　均有统计学意义（Ｐ＜０．０５），见表１。　表１　－－＇￣ＴＳＨ、ＴＬ、Ｔ－ｒ，、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平比较（ｉ±　）　注：一未统计　２．２　三组ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ和ＣＤ４　Ｔ水平及Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达水平比较三组外周血ＣＤ４　Ｔ的细胞数　量比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＧＤ组外周　血ＣＤ４　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率与对照组　比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＨＴ组外周血　表３　三组ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　ｒｅｇｓ与ＴＳＨ、ＴＴ３、ＴＴ４、ＴｇＡｂ、　ＴＰＯＡｂ的相关性（　±ｓ）　ＣＤ４　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率明显低于对照　组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＧＤ组和ＨＴ组　外周血Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达量均明显低于对照组，差　异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５　ｏ见表２。　表２　－－￣ＣＤ４　ＣＤ２５　ｒｅｇｓ和ＣＤ４＋１Ｉ水平及Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达水平　比较（　±ｓ）　２．３　三组ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ与ＴＳＨ、ＴＴ３、　ＴＴ４、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ的相关性ＡＩＴＤ的　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ与ＴＳＨ、ＴＴ３、１Ｔｒ４、ＴｇＡｂ和　ＴＰＯＡｂ具有明显的正相关性（Ｐ＜０．０５），见表３。　一１８一　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｖｏ１．１４，Ｎｏ　２３　Ａｕｇｕｓｔ２０１７　，《中国医学创新》第１４４第２３期（总第４１３期）２０１７年８月　论　著Ｌｕｎｚｈｕ　续表３　续表３　ＧＤ组（ｎ＝４０）０．５９±Ｏ．１１　１５２．２±５２．３　０．４０３　０．００６　ＨＴ组（ｎ＝４０）　０．４３±０．１２　５２１．３±１０２．３　Ｏ．４１２　０．００５　对照组（ｎ＝２０）Ｏ．９７±Ｏ．１６　一　一　一　注：一未统计　３讨论　自身免疫性甲状腺疾病（Ａｕｔｏ　Ｉｍｍｕｎｅ　Ｔｈｙｒｏｉｄ　ＧＤ组（ｎ：４０）３５．２±１０．２　２１２．３±４３．７　０．４０１　Ｏ．００５　Ｄｉｓｅａｓｅｓ，ＡＩＴＤ）主要包括Ｇｒａｖｅｓ病和桥本甲状腺　ＨＴ组（ｎ＝４０）３４．１±１０．１　１０３．４±２０．４　０．４１１　０．００５　炎，两者均可产生针对甲状腺的自身抗体，是临床　对照组（ｎ＝２０）３１．９－Ｉ－９．９　１１３．５±２１．７　Ｏ．２１４　０．３２１　上引起甲状腺功能亢进或减退的最常见原因之一，　可导致多器官、多系统损害，或合并其他自身免疫　性疾病，严重影响患者的心身健康［１０－１２］ｏ大多数研　究认为，ＡＩＴＤ是在遗传和环境等因素的相互作用　下，诱发机体免疫系统机能失衡，从而产生针对自　身抗原的免疫细胞和或自身抗体，导致器官损伤和　功能障碍ｔ１３－１５Ｊｏ　免疫学研究表明，ＣＤ４＊Ｔ细胞是机体免疫系统　组别　ｃ　ＴＣＤ４　（％）　ｇａｂ（ＩＵ，ｍＬ）ＯＲＥ　Ｐ值　的主要效应细胞，通过对抗原识别、处理、提呈等　作用，在稳定机体的免疫平衡、维持机体免疫耐受　等过程中起着至关重要的作用［Ｊ　。ＣＤ４　ＣＤ２５￣ｌ＇ｒｅｇｓ　是近年研究发现的一类具有维持自身免疫稳定的Ｔ　细胞亚群，它能够识别自身抗原并抑制自身反应　性Ｔ细胞的免疫反应，在免疫自稳方面起着重要　作用ｎ　。转录因子Ｆｏｘｐ３对Ｔｒｅｇ细胞的分化成熟　和功能维持都起着重要作用，研究证实，人体内的　ＣＤ４　ＣＤ２５￣ｒｅｇｓ部分表达Ｆｏｘｐ３，并且Ｆｏｘｐ３　的这　群细胞具有免疫抑制功能［Ｉ　。　研究发现，ＦＯＸＰ３的基因多态性与儿童／青春　期ＡＩＴＤ的发生风险具有正相关，因此ＦＯＸＰ３的基　因在ＡＩＴＤ存在高表达，而且对ＡＩＴＤ的发生发展起　到重要作用［１９］０据研究报道，ＣＤ４　ＣＤ２５＊Ｔｒｅｇｓ细胞　亚群数量比正常儿童明显减少，这也说明ＡＩＴＤ患　Ｍ￣ｌｌｅａｌ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　０ｆ　Ｃｈｉｎａ、，ｏＩ．１４，Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ。２０１　７　一１９—　论　著Ｌｕｎｚｈｕ　《中国医学创新》第１４卷第２３期（总第４１３期）２０１７年８月　［５】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ　Ｓ　Ａ，Ｒｅｓｔｉｆｏ　Ｎ　Ｐ．Ａｄｏｐｔｉｖｅ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ａｓ　ｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄ　者血液中存在明显的ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ细胞亚群数量　的降低　捌。本研究结果显示，三组外周血ＣＤ４＋Ｔ的　细胞数量比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＧＤ　ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ　ｏｆｒ　ｈｕｍａｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１５，３４８（６２３０）：　６２－６８．　组外周血ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率与　【６］Ｓｈａｒｍａ　Ｐ，Ａｌｌｉｓｏｎ　Ｊ　Ｐ．Ｔｈｅ　ｆｕｔｕｒｅ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｅ　ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ　ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１５，３４８【６２３０）：５６—６１．　对照组比较，差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．０５）；ＨＴ组　［７１罗丽景，刘翠娥，焦艳梅，等．ＣＤ４　ＣＤ２５　调节性Ｔ细胞与　外周血ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇｓ占ＣＤ４　Ｔ细胞的比率明显　艾滋病疾病进展的关系概论［Ｊ］．现代生物医学进展，２０１５，　低于对照组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），这说明　１５（１５）：２９７１—２９７４．　８］李世平，刘露，张美月，等．Ｆｏｘｐ３和ＨＯ－１在实验性自身　了桥本甲状腺炎患者存在明显的免疫反应，而且这　［种反应明显比Ｇｒａｖｅｓ病患者数量低。进一步研究显　示，ＧＤ组和ＨＴ组外周血Ｆｏｘｐ３　ｍＲＮＡ表达量均明　免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的相关性表达及依达拉奉保护　作用的研究【Ｊ］．中风与神经疾病杂志，２０１５，３２（２）：１４４－　１４７．　显低于对照组，差异均有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）这　【９］孙来龙，张松林．Ｔｒｅｇｓ免疫治疗策略的研究进展【Ｊ】．海南医　也表明ＡＩＴＤ发生后就会导致Ｆｏｘｐ３的表达。　学，２０１６，２７（１６）：２６７７－２６７９．　ＡＩＴＤ患者中的Ｇｒａｖｅｓ病和桥本甲状腺炎血　【１０】Ｚｈｕ　Ｊ，Ｇａｏ　Ｂ．Ｓｉｍｖａｓｔａｔｉｎ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ａｓｐｉｒｉｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ　ｔｈｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｈｅａｒｔ　ａｌｌｏｇｒａｆｔ　ｂｙ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｔｒｅｇ　ｃｅｌｌｓ　液中存在ＴＳＨ、ＴＴ　、ＴＴ４、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平的　差异，而且Ｇｒａｖｅｓ病和桥本甲状腺炎２种疾病中　ａｎｄ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ　ＴＳＨ、ＴＴ　、ＴＴ４、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平也存在一定的　差异，本研究结果显示，ＴＳＨ、ＴＴ　、ＴＴ４、ＴｇＡｂ、　ＴＰＯＡｂ水平与健康人存在差异，而且Ｇｒａｖｅｓ病　Ｐａｔｈｏｌ，２０１５，２４（３）：１７３—１７８．　【１１］李晓‘红，朱慧慧，李永红，等．尖锐湿疣患者外周血　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔ细胞的检测及义［Ｊ］．甘肃医药，２０１５，３４　（９）：６８６—６８８．　血液中的１ｖｒ　、ＴＴ　水平高于桥本甲状腺炎患者，　【１２Ｊ买文丽，韩清娟，曹文轩，等．人源化ＮＯＤ小鼠中　而ＴＳＨ、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平明显低于桥本甲状　ＣＤ８　ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇｓ的频率和功能研究［Ｊ］．免疫学杂志，２０１６，　腺炎患者，这也表明ＡＩＴＤ患者的两种类型的疾　３２（１）：７—１２．　病存在明显不同，而且ＡＩＴＤ患者的两种类型的　疾病中的ＴＳＨ、　、　、ＴｇＡｂ、ＴＰＯＡｂ水平与　示ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ与ＡＩＴＤ的发生发展有明　显关系。　综上所述，ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ可能在ＡＩＴＤ　【１　３］Ｅｌｅｓｓａｗｙ　Ｂ，Ｌｉ　Ｘ　Ｃ．Ｔｙｐｅ　１　ｄｉａｂｅｔｅｓ　ａｎｄ　Ｔ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｒｅｓ，２０１５，９８：２２—３０．　１４］郭彬彬，张梦军，任小珊，等．ＮＯＤ小鼠人源化后ＣＤ４￣Ｔ和　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ的相关性进行分析，可以显　［ＣＤＳ＋Ｔ细胞及其分泌ＩＦＮ一－，／与ＩＩ，１７的频率变化及意义ｆＪ１＿　免疫学杂志，２０１５，３１（２）：９３—９９．　［１５］谭燕，王晨虹．糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体在　Ｔｒｅｇｓ介导下的免疫耐受作用的研究进展［ＪＪ＿国际妇产科学　杂志，２０１６，４３（３）：２８２—２８６．　［１６］Ｐｅｔｒｉｌｌｏ　Ｍ　Ｇ，Ｒｏｎｃｈｅｔｔｉ　Ｓ，Ｒｉｃｃｉ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．ＧＩＴＲ＋ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ　Ｒｅｖ，　的发生发展进程中起着一定的作用，深入研究　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　Ｔｒｅｇｓ在ＡＩＴＤ中的作用将有助于　建立新的预防和治疗策略。　参考文献　【１］李秀玉，胡波，李忠新．ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　调节性Ｔ细胞和　２０１５，１４（２）：１１７—１２６．　［　１７】Ｐｒｚｙｂｙｌ　Ｌ，Ｉｂｒａｈｉｍ　Ｔ，Ｈａａｓｅ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　Ｔ　ｃｅｌｌｓ　ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ　ｉｎｔｒａｕｔｅｒｉｎｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ　ｒａｔ　ＰＤ—Ｉ　ＣＤ４＊Ｔ细胞对官颈内皮细胞瘤预后的作用『Ｊ】．重庆医学，　２０１５，４４（１８）：２４７７—２４７９．　【２】Ｃｈａｕｄｈａｒｙ　Ｂ，　Ｅｌｋｏｒｄ　Ｅ．Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ＨＢＶ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　ｏｎ　ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｐｒｅｅｃ１ａｍｐｓｉａ［Ｊ］．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，２０１５，６５（６）：　１２９８—１３０６．　［１８］Ｓａｉｉｆ　Ｂ，Ａｆｌａｔｏｏｎｉａｎ　Ｒ，Ｔａｊｉｋ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｕｎｅｘｐｌａｉｎｅｄ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　ａｂｏｒｔｉｏｎ［Ｊ］．　Ｊ　Ｍａｔｅｒｎ　Ｆｅｔａｌ　Ｎｅｏｎａｔａｌ　Ｍｅｄ，２０１６，２９（７）：ｔ１７５—１１８０．　ｒｅｍｉｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｆｒｏｎｔ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１５，６（３）：４８—５２．　【３】Ｌｉｎｄｓａｙ　Ｃ　Ｒ，Ｓｐｉｌｉｎｏｐｕｌｏｕ　Ｐ，Ｗａｔｅｒｓｔｏｎ　Ａ．Ｂｌｉｎｄｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｌｉｇｈｔ：　ｗｈｙ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ　ｍｅｌａｎｏｍａ　ｈａｓ　ｃｒｅａｔｅｄ　ａ　ｎｅｗ　【１９】莫俊銮，周继昌，张丽君，等．硒对特应性皮炎小鼠　ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　调节性Ｔ细胞的影响［Ｊ］．中国热带医学，　２０１６，１６（８）：７４３—７４７．　ｐａｒａｄｉｇｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｔｈｅｒ　Ａｄｖ　Ｍｅｄ　Ｏｎｃｏｌ，　２０１５，７（２）：１０７—１２１．　ｆ２ｏ］方周宾，林兵英，伍昌林，等．ＩＣＯＳ＋Ｔｒｅｇ与Ｂ１０细胞在ＡＤ　患者发病机制中的作用【Ｊ】．中国热带医学，２０１５，１５（４）：　４１２－４１４．　［４］邓海峰，许文荣，蒋敬庭．ＣＤ４　ＣＤ２５　Ｆｏｘｐ３　调节性Ｔ细胞　在ＣＩＫ细胞诱导中的表达及其功能［Ｊ］．临床检验杂志，２０１６，　３４（７）：５５５—５５８．　一・　（收稿日期：２０１７—０４—１２）（本文编辑：程旭然）　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．２３　Ａｕｇｕｓｔ，２０１７　２０一