CK-19和Ki-67在甲状腺癌的表达和鉴别诊断意义

发表时间：2013-07-23T16:43:33.873Z 来源：《医药前沿》2013年第14期供稿 作者： 史琳 张安文 罗宇 赵时梅 任传伟 杨燕初[导读] 甲状腺癌的发病率约占全身恶性肿瘤的1%-2%，其类型多样，预后差异大，因此增强诊断的时效性和准确性显得尤为重要。史琳 张安文 罗宇 赵时梅 任传伟 杨燕初(通讯作者) （广西科技大学医学院病理教研室 广西柳州 545005）

【摘要】目的 探讨甲状腺癌组织中CK-19和Ki-67的表达及鉴别诊断意义。方法 应用免疫组化法对180例甲状腺癌、60例甲状腺良性病变及40例甲状腺正常组织进行CK-19与 Ki-67检测。结果 1.甲状腺乳头状癌组CK-19阳性表达率显著高于滤泡癌组、良性病变组、正常组

(P<0.05)；2.Ki-67在正常组无表达，余各组均阳性表达，但差异无统计学意义(P>0.05); 3.滤泡癌组Ki-67 LI显著高于乳头状癌组、良性病变组、正常组(P<0.05)；4.CK-19、Ki-67阳性表达率与性别、年龄无关，与肿瘤大小、进展分期正相关(P<0.05)。结论 CK-19、Ki-67的表达分别在乳头状癌、滤泡癌上调，随肿瘤进展而增高，可作为甲状腺癌鉴别诊断及预后评估的良好指标。【关键词】 甲状腺癌 良性病变 CK-19 Ki-67

【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）14-0029-02

甲状腺癌的发病率约占全身恶性肿瘤的1%-2%，其类型多样，预后差异大，因此增强诊断的时效性和准确性显得尤为重要。CK-19是一种低分子角蛋白，研究发现其在甲状腺癌等上皮性肿瘤组织中表达增高[1]；另有研究对小样本髓样癌患者长期随访发现，Ki-67高表达是独立于其他预后因素的敏感指标[2]。本研究采用免疫组织化学法联合检测大样本甲状腺病变组织中CK-19和Ki-67蛋白的表达，探讨两者与甲状腺癌的诊断及恶性分层的关系。 1 资料与方法

1.1 临床资料 收集广西科技大学医学院第二附属医院1997年至2009年间，经病理确诊的甲状腺癌患者的归档蜡块标本180例。符合下列条件：①行根治或改良根治术，术前无放、化疗；②蜡块保存完好；③患者临床资料完整。其中男女比为1:2.15，平均年龄(47.4±11.8)岁。分为乳头状癌、滤泡型乳头状癌、滤泡癌。另选择同期甲状腺良性病变60例，包括结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤患者蜡块标本；瘤旁正常甲状腺组织40例蜡块标本作为对照。

1.2 试剂及方法 试剂均购自福州迈新生物公司。采用Ensivion法免疫组化技术，操作步骤按照试剂盒说明书进行。用已知胃腺癌CK19和肺鳞癌Ki-67的阳性切片作阳性对照，用PBS液取代一抗作阴性对照。

1.3 结果判断 选染色阳性集中区域5个不重叠高倍视野（×400），观察1000个细胞，计数阳性细胞数, 计算阳性细胞百分率为阳性增殖指数（Lable Index,LI）[3]，并评定显色强度。按染色阳性细胞数量评分：全片未见着色或散在着色<10%为(-)，10%～25%为(+)，26%～50%为(++)，51%～75%为(+++)。 2 结果

2.1 CK-19和Ki-67在不同甲状腺病变的表达 CK-19阳性着色在细胞质和（或）细胞膜，Ki-67阳性着色在细胞核和（或）细胞质，均呈棕黄色或淡棕色颗粒。CK-19阳性表达率在正常组极低，在良性病变组、滤泡癌组增高，在乳头状癌、滤泡型乳头状癌组则最高，差异有统计学意义(P<0.05)；但乳头状癌、滤泡型乳头状癌组间差异无统计学意义(P>0.05)。Ki-67在正常组无阳性表达，在良性病变组、乳头状癌组、滤泡型乳头状癌组增高，在滤泡癌组则最高，差异有统计学意义(P<0.05)；但良性病变组、乳头状癌组、滤泡型乳头状癌组间差异无统计学意义(P>0.05) (表1)。

表1 CK-19和Ki-67在不同甲状腺病变的阳性表达率、增殖指数的比较（%）

注：与乳头状癌组比较，aP<0.05; 与滤泡性乳头状癌组比较，bP<0.05; 与滤泡癌组比较，cP<0.05; 与良性甲状腺病变组比较，dP<0.05。

2.2 CK-19和Ki-67的阳性表达在鉴别甲状腺癌的比较

CK-19在乳头状癌组明显增高，其对乳头状癌的诊断敏感性为95.5%，特异性为83.0%；Ki-67增殖指数在滤泡癌组明显增高，以25%为Ki-67增殖指数截点，其对滤泡癌的诊断敏感性为97.1%，特异性为92.7%。 2.3 CK-19和Ki-67在甲状腺癌中临床病理参数间的表达率比较

癌组中CK-19和Ki-67表达率在不同性别、年龄的差异无统计学意义(P>0.05)；在肿瘤大小≥2CM组表达均高于<2CM组，在肿瘤分期Ⅲ-Ⅳ组表达均高于分期Ⅰ-Ⅱ组，差异均有统计学意义(P<0.05)。 3 讨论

甲状腺癌有较高的局部侵袭性和淋巴结转移率，确诊早晚及开始治疗所处病理分期是决定预后的重要因素。CK-19属于细胞膜角蛋白家族，有研究发现其强烈而弥漫的表达于乳头状癌，而在良性滤泡结节仅点灶状表达甚至不表达[4]。本研究中，CK-19在乳头状癌、滤泡型乳头状癌、滤泡癌、良性病变、正常甲状腺中阳性率呈递减趋势；在乳头状癌中有较高的敏感性和特异性，在乳头状癌、滤泡癌周围侵犯腺体或包膜也存在阳性表达。以上研究结果提示CK-19可作为鉴别乳头状癌和其他良恶性甲状腺肿瘤的重要指标，并能提示恶性增生浸润趋势，对诸如微小乳头状癌等容易漏诊的类型诊断亦有帮助。目前Ki-67被认为是评价细胞增殖活性最有用的指标之一，国外数个小样本研究应用Ki-67于甲状腺肿瘤诊断，但结论仍有争议，部分研究显示Ki-67仅在甲状腺恶性肿瘤中强烈表达[5]，而另有研究却发现Ki-67在甲状腺癌和甲状腺腺瘤中均高表达[6]。本研究显示，Ki-67在乳头状癌、滤泡型乳头状癌、滤泡癌、良性病变、正常甲状腺中阳性率分别为38.8%、41.8%、42.6%、36.7%、0%。Ki-67在甲状腺良恶性肿瘤的表达似乎不存在差异，这与国内研究类似[7、8]。但进一步做Ki-67增殖指数对比发现，滤泡癌增殖指数最高，与其余各组比较有统计学差异。提示Ki-67阳性表达在良恶性肿瘤中虽无差别，但Ki-67增殖指数却存在明显差异，设定增殖指数截点为25%时，其在滤泡癌有最高的敏感性和特异性，对鉴别滤泡癌与其他良恶性甲状腺肿瘤有重要价值。

而Ki-67增殖指数在乳头状癌、滤泡状腺瘤均较低，提示肿瘤虽有增殖，但增殖强度不大，恶性程度相对不高，这也与二者有较好的预后相符。本研究对CK-19、Ki-67与临床病理参数的关系做了对比，发现CK-19、Ki-67表达率与性别、年龄无关，但随肿瘤大小、肿瘤分期进展而增高。

综上所述，CK-19、Ki-67对甲状腺良恶性肿瘤或不同类型甲状腺癌的鉴别有重要意义，对肿瘤恶性程度及预后亦有提示作用。二者在临床联合应用中值得尝试！

参考文献

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[6] Cho Mar K, Eimoto T, Nagaya S, et al. Cell proliferation marker MCM2, but not Ki67, is helpful for distinguishing between minimallyinvasive follicular carcinoma and follicular adenoma of the thyroid. Histopathology. 2006;48(7):801-807.

[7] Song Q, Wang D, Lou Y, et al. Diagnostic significance of CK19, TG, Ki67 and galectin-3 expression for papillary thyroid carcinoma inthenortheastern region of China. Diagn Pathol. 2011;6:126-131.

[8] 王晓红, 刘雨飞, 鲍宇浓, 等. 甲状腺乳头状癌RET、CK19、Ki-67的表达. 临床与实验病理学杂志. 2006;6:692-695.基金项目：广西壮族自治区教育厅科研项目（200911MS287）