反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中8种水溶性维生素

第卷年月分析化学址【研究简报而匀第《召,期如日灿反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中成志强种水溶性维生素’孙成均黎源倩华西医科大学公共卫生学院成都摘要生素以只建立了以几叽甲醇为流动相的梯度洗脱反相高效液相色谱同时测定水溶性维残残烟酸烟酞胺和叶酸的分析方法方法检出限为一一用该法测定了奶粉玉米粉饮料及复合维生素片中水溶性维生素相对标准偏差为、加标回收率为关键词高效液相色谱法水溶性维生素食品引的作用言水溶性维生素与人体的生长发育和健康有着密切关系它们在生物体的生命活动中具有十分重要水溶性维生素的测定方法主要有光度法〔〕气相色谱法‘高效液相色谱法刀等应用于水溶性维生素的分析已有较多报道但目前多为纯方法,研究或仅应用于药物如复合维生素片剂和一些基本简单的样品如饮料闭口服液阁等的分析而应用于实际食品样品能同时测定多种水溶性维生素的方法还很少且报道的害较大的离子对试剂种水溶性维生素在。本文采用梯度洗脱的柱上的色谱行为优化了优法较多地采用了价格较高对色谱柱柱效及泵损,残烟酸烟酞胺和叶酸氏研究了分离测定条件应用该法同时测定了部分食品和复合维生素片中水溶性维生素实验部分仪器和试荆高效液相色谱仪几谱柱后使用公司含,比泵公司。脚检测器数据处理器色紫外可见分光光度计日本岛津公司本实验所用水均为石英亚沸蒸馏水所用试剂除指明外均为分析纯维生素标准贮备液,甲醇几经重蒸馏过滤氏烟酸烟酞胺标准贮备液留留中几标准贮备液定容岁中℃冰箱中叶酸标准贮备液临用新配泛以少量稀溶解后再用贮备液均贮于流动相。将标准贮备液稀释成不同浓度的混合标准应用流动相甲醇液临用新配耐叽缓冲液均经玻砂漏斗过滤超声波脱气后使用样品处理多维片数片碾匀准确称取于容量瓶内加人几超声振荡加水至刻度混匀静置片刻取上清液经饮料脚微孔滤膜过滤后进样准确吸取一定量经脚微孔滤膜过滤后进样分析强化奶粉准确称取加人于超声波浴拌加三氯乙酸超声混匀后于超声混匀用水定容至玉米粉再混匀后离心一取上清液经几微孔滤膜过滤后进样分析准确称取仍视接受锥形瓶中加人℃拼收稿第期成志强等反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中种水溶性维生素高压水解冷却后用水定容至,充分混匀后静置片刻取上清液经脚微孔膜过滤后进样分析以上操作均在避光或低温条件下进行色谱测定采用线性梯度洗脱。流动相从进样时的二线性变化为而时的二仇然后流动相变为纯甲醇至时再还原为流速而检测波长,氏几烟酸和烟酚胺叶酸波长切换时间一而为为一而为和一而为。柱温室温。标准曲线法定量。图为标准品与某维生素强化奶粉样品的色谱图结果与讨论色谱条件的优化流动相本研究采用甲醇缓冲溶液体系在此基础上试验了庚烷基磺酸钠和氢氧化四丁基钱等离子对试剂对该种水溶性维生素的分离效果但不理想且氏的保留时间较长而色谱柱柱效也有降低的趋势故不考虑用离子对试剂有人〔’曾用流速梯度分离出种水溶性维生素但流速梯度分离的重现性常受流速稳定性的影响而阶梯性的流速变化造成的柱压阶梯性变化也可能会对色谱柱造成一定的影响故综合考虑采用流动相梯度洗脱梯度洗脱条件测试了争李流动相和在梯度起始和结束时不同组成比例下的洗脱状况根据种维生素色谱峰的峰形。。。、’。。州。万一「一劝分离度和色谱分析时间确定流名丽口加动相在梯度起始和结束时的组成比例以及线性梯度洗脱程图水溶性维生素标准与维生素强化奶粉样品色谱图序叨加而。孚班朋朗山月蒯日日访加川公朋阴讨山川流动相中缓冲液州值的肠币记而玫详刚翻影响结果表明当时对标准品抽朋耐奶粉而止即喇烟酸。氏的峰面积影响最大且和烟酞胺二叶酸。二场烟酸的色谱峰分离度变差。在二时种水溶性维生素的色谱峰面积基本上均达最大值。而当时峰面积又开始变小尤其对叶酸和的影响较大当〕时种水溶性维生素的色谱峰保留时间基本不随流动相值的改变而改变且色谱峰均达较好分离故确定流动相缓冲液的值为柱温的影响当柱温在℃一℃时对种维生素色谱峰的分离度和峰形无明显影响但相对色谱峰保留时间有微小的变化检测波长的确定将种维生素标准分别扫描礴的的吸收光谱结果烟酸烟酞胺和巩的最大吸收波长均为叶酸为二氏为为由于,氏和烟酞胺的保留时间相差小难以进行波长切换又在氏前后的几种水溶性维生素的最大吸收波长均为故也将氏的测定波长设置在分析化学第刀卷维生素标准溶液的稳定性实验大多数水溶性维生素对光热氧酶和溶液声等较敏感易被氧化分解故应尽量避光并低温操作作者试验了乙酸草酸偏磷酸重蒸馏水等作为配制标准溶液的溶剂结果均不理想或稳定时间太短或对色谱峰有干扰或抑制作用后参考文献川采用耐作溶剂结果表明于℃冰箱中种水溶性维生素标准使用液除能稳定至少外其余种都至少可稳定而标准储备液除至少可稳定天方法考察及性能指标标准曲线、线性范围及检出限种维生素标准曲线线性范围至少分别是为。一留其余为。一岁。线性相关系数为一姗。以倍基线噪声作为方法的检出限。检出限分别为烟酸飞,氏烟酞胺“雌叶酸,几精密度与准确度分别称取份奶粉样品按操作方法进行样品处理色谱分离测定由它们的结果计算方法精密度。本法样品测定结果相对标准偏差为一采用加标回收率评价方法的准确度。结果表明所试种样品中种水溶性维生素的加标回收率范围为一样品测定表列出了类食品样品和种多维片中水溶性维生素的测定结果表样品测定结果叭阎概怕讨朋云少。样品物即黑。烟酸胺叶酸越圈万多维片而呵的·、璐器尹呷黔腮黔一、、朋刃玉米粉祀目一一砂肠表示未检出阁样品中的未检出耐闭。。咧即伪】结论本文建立的用于食品中多种水溶性维生素同时测定的法具有简单快速准确分离效果好和一次处理同时分析多种水溶性维生素的特点。适合于饮料奶粉玉米粉和复合维生素片中水溶性维生素的测定淤挽洲心留脚丹山侧目公卿,诚苟加吹以川恻吻『失妙月肠扣】肠犯电及加心价汇寿甩凡月亡几免理朋哪黄红心蝴‘张玉奎田场王磊服盘川恻吻『色讲哭趁“李碧琳肠兀闭。宋晓东阴耐以砚分析化学柳的一柳,”毛舜元曰杨观兆兀施辛鲁爱娣加龙伪丹翻以山耐通邢加‘药物分析杂志哭巧一伪飞几膝兜场一卯儿妞州泪印旧及姗味￡儿锣山‘臾招一记。如山认儿矛如止男月闷礴一第期成志强等反相高效液相色谱法同时测定食品和多维片中种水溶性维生素茵吴红京汤川卿唐根源朋加王勇以。留。。卯冲曰娜梦色语兜场朋韩雅珊场戴青阮芜画宋小清姆赵金城注油从山如咫细她肋‘冷管养学报臾乃月一几留〔洁彻创呀卯一兑血刃峨刘加幼卜细耐过柱切耐】比别犯现们团加沙昭加中川叼助呼无阅之乃站玩山肠以肠“浇”妙几伦成欢迎反记砚曰以‘嗯血《兀阵加。,司户伴吹卯卜的】曲,几残记刃阳仆漏笋。,叨脚印。助山户脚耐几嗯户田而而以留以姗卯肠诫朗。陀吻一一二戏饱伴仆由飞,飞鸣几仆诩仆服山记耐的切七吸详刚悦碘曲。为护肋曲记脚卜触喇浅兑以”絮呷日助山中国无机分析化学文摘》年征仃启事《中国无机分析化学文摘》经国家科委批准翻年创刊公开发行刊号一公诊一本刊以文摘简介及题录形式报道国内公开发行的有关无机分析化学的期刊的余种及各种会议论文集新标准新书目等年收录文献篇左右栏目分为一般问题重量法与滴定法光度法电化学分析光谱分析色谱分析物相分析气体分析活化分析质谱分析分离方法贵金属分析专栏等十二大类为便于读者检索每期附有按被测元素及阴离子编排的索引读者对象冶金有色金属地质机械半导体材料宇航核技术化工建材环保食品工业药物医学商品检验等部门分析工作者及有关院校师生在每次全国科技文献检索期刊评比中本刊均获奖本刊是了解国内无机分析动态的窗口是检索国内文献的理想工具是普及推广新技术的阵地是分析工作者的得力助手本刊犯年出版四期季刊及犯年年度主题与作者索引一本激光照排胶版印刷大开定价元全年订费为印元包括邮费在内年仍由编辑部发行欲订阅者请向编辑部索取订单并汇款至北京西直门外文兴街号北京矿冶研究总院《中国无机分析化学文摘》编辑部邮政编码。“电话肠一巧