蛹虫草人工培养条件的研究

蛹虫草人工培养条件的研究

谢春芹,赵桂华*,冯大俊,杨鹤同,史󰀁俊,宋子明,孙小慧,韩荣梅

(江苏农林职业技术学院,江苏句容

212400)

摘要:本实验通过对不同培养条件下蛹虫草的出草率及品质的对比,结果表明,菌丝长满料面后温度18󰀁,湿度90%,光照33%(󰀁)条件下出草快且产量高,品质好。关键词:蛹虫草;培养条件;出草率;品质

中图分类号:Q93󰀁󰀁文献标识码:A󰀁󰀁󰀁文章编号:1000-2324(2011)03-0345-04

STUDIESONARTIFICIALCULTURECONDITIONSOFCORDYCEPSMILITARISXIEChun-qin,ZHAOGui-hua*,FENGDa-jun,YANGHe-tong,SHIJun,

SONGZi-ming,SNUXiao-hui,HANRong-mei

(PolytechnicCollegeofAgricultureandForestry,JiangsuJurong212400,China)

Abstract:ThisexperimentunderdifferentcultureconditionsandqualityofCordycepsmilitarisinahastycomparison,theresultsshowthatthematerialsurfacecoveredwithmyceliumafterthetransfertemper-ature18󰀁,humidity90%,light33%(󰀁)fastundertheconditionsofthegrasshighyieldandgoodquality.

Keywords:Cordycepsmilitaris;cultureconditions;arash;quality

虫草是我国名贵的药用真菌,其中最著名的是冬虫夏草(Cordycepssinensis),其次是蛹虫草(Cordycepsmilitaris),又名北冬虫夏草。冬虫夏草因生境特殊、寄主专一,人工培养难度大。与冬虫夏草相比,蛹虫草对环境条件要求不严格,适应性较强,较易进行人工培养。

蛹虫草为子囊菌亚门,麦角菌目,麦角菌科、虫草属的模式种,它既能补肺阴,又能补肾阳,主治肾虚,阳痿遗精,腰膝酸痛,病后虚弱,久咳虚弱,劳咳痰血,自汗盗汗等,是一种能同时平衡、调节阴阳的中药[3]。由于虫草具有很好的医疗保健功能,目前国内外已开发出多种虫草产品(包括药品和保健食品),近年来市场对蛹虫草的需求逐渐增大,对其外观和品质要求也越来越高,但由于蛹虫草对环境的特殊性和敏感性,生产者对蛹虫草培养条件把握不准,蛹虫草的产量和品质已成为蛹虫草大面积生产的瓶颈[4-5]。为此,我们立题开展对蛹虫草培养条件的研究,旨在探索出蛹虫草最佳出草的培养条件,为蛹虫草的大规模生产提供依据。

[1-2]

1材料与方法

1.1󰀁试验材料及来源

蛹虫草菌种由江苏省农业科学院农产品加工研究所提供。1.2󰀁方法1.2.1

蛹虫草液体菌种的制备[6-7]󰀁󰀁蛹虫草液体菌种培养基的配方。葡萄糖20g,蛋白胨10g,KH2

PO40.5g,MgSO41g,VB1100󰀁g,水1000mL。󰀁蛹虫草液体菌种培养基的配制。用量筒量取1000mL

收稿日期:2010-12-23

基金项目:江苏省高等学校大学生实践创新训练项目󰀁蛹虫草新品种的引进及配套高产优质栽培技术󰀁项目基金作者简介:谢春芹(1976-),女,汉,江苏沐阳,硕士,讲师,主要从事食用菌新品种选育与病虫害研究工作。*通讯作者:Authorforcorrespondence.E-mail:zhao50050@sina.com

󰀁346󰀁

山东农业大学学报(自然科学版)第42卷

水倒入烧杯内,加热至沸腾,加入称量好的10g蛋白胨,边加边搅拌,直至完全溶化,再加入称量好的葡萄糖和其他营养成分(其中VB1需磨碎后再加入),完全溶解后,最后定容至1000mL。将培养基分装到容量为500mL的三角瓶内,每500mL三角瓶装培养基100mL,在121󰀁下高压蒸汽灭菌30~40min。󰀁蛹虫草液体菌种的接种。在超干净工作台内,按无菌操作要求,挑取少许带有培养基的母种菌饼1~2块接种至液体培养基中。󰀁液体菌种的培养。在19󰀁恒温振荡培养箱中,转速120r/h,培养2d后,再在19󰀁恒温培养箱中静止培养,摇瓶3~4次/d,培养2~3d后,当菌丝球布满液体培养基1/3~2/5时,拿出备用。

1.2.2蛹虫草的栽培󰀁󰀁蛹虫草栽培培养基配方。大米40g,营养液60mL,蚕蛹粉1g,也可以用小麦代替大米作培养基。营养液配方为蛋白胨8g,葡萄糖12g,MgSO41g,KH2PO41g,柠檬酸1g,VB1粒,水1000mL。󰀁培养基装瓶、灭菌。取50只500mL的广口瓶,在每个广口瓶内分别放入称量好的大米,营养液和蚕蛹粉,缓慢振荡,使培养液混合均匀后,用透气薄和皮筋将瓶口封好,在121󰀁下高压蒸汽灭菌30~40min。

󰀁接种。在超净工作台在常规消毒方法,采用无菌操作技术用移液枪将2~3mL液体菌种均匀的接入栽培瓶中。󰀁培养。将接种好的蛹虫草栽培瓶置于表1的五种条件下进行培养,通过观察比较各条件下的现蕾早迟,出草快慢和品质好坏。

表1

蛹虫草的不同培养条件

Table1󰀁ThedifferentcultureconditionsofCordycepsmilitaris

培养条件Cultureconditions

󰀁󰀁

开始16󰀁,待菌丝长满培养基后,调温度18󰀁,黑暗,湿度90%,培养至出草。

开始16󰀁,待菌丝布满培养基表面后,调温度18󰀁,当菌丝长至培养基2/3时,给予33%的散射光照射,湿度90%,培养至出草。

开始16󰀁,待菌丝布满培养基表面后,调温度18󰀁,当菌丝长满培养基后,给予33%的散射光照射,湿度90%,培养至出草。

开始16󰀁,待菌丝布满培养基表面后,调温度18󰀁,当菌丝长至培养基2/3时,给予33%的散射光照射,菌丝转淡黄色时,给予10󰀁温差刺激,湿度90%,子实体长2~3cm时,18󰀁出草。

开始16󰀁,待菌丝布满培养基表面后,调温度18󰀁,当菌丝长满培养基后,给予33%的散射光照射,菌丝转淡黄时,给予10󰀁温差刺激,湿度90%,子实体长2~3cm时,18󰀁出草

[8]

󰀁

󰀁

󰀁

1.2.3󰀁蛹虫草形态观察与计算󰀁现蕾,当培养基表面再现乳黄色针尖状小刺(1mm左右)时即为现蕾;现蕾密度,以培养基表面出现乳黄色针尖状小刺的多少来衡量,若现蕾面积占培养基料面4/5以上则现蕾密度较大,现蕾面积占培养基料面1/2~4/5则现蕾密度大,现蕾面积占培养基料面1/3~1/2则现蕾密度少,现蕾面积占培养基料面1/3以下则现蕾密度较少。

子实体粗度,以单个鲜子实体周长来表示,测量方法是用缝纫线沿子实体绕一圈,然后测量线的长度,即为子实体周长,单位以cm计算。

子实体的长度,即单个鲜子实体的高度,用直尺量子实体的高度,单位以cm计算。

2󰀁结果与分析

2.1

五种不同培养条件下蛹虫草子实体产量与品质差异明显

通过在不同的温度、湿度和光照条件下的培养,蛹虫草的产量和品质差异很大。在五种不同的培养条件下,蛹虫草的现蕾密度、产量,子实体色质、形态也不一样,如表2和图1。2.2五种不同培养条件下蛹虫草子实体现蕾历期与采草历期差异明显

通过在不同的温度、湿度和光照条件下的培养,蛹虫草从播种到现蕾所需的时间不同,且从现蕾到第一次采草、到第二次采草所需的时间也不同,如表3

第3期谢春芹等:蛹虫草人工培养条件的研究

表2

五种培养条件下蛹虫草子实体生长发育情况

󰀁347󰀁

Table2󰀁Thegrowthanddevelopmentoffruitingbodiesofcordycepsmilitarisunderfivecultureconditions

󰀁󰀁󰀁子实体󰀁󰀁󰀁Fruitingbody培养条件󰀁󰀁󰀁Cultureconditions󰀁󰀁󰀁󰀁

󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁

现蕾密度大,出现子实体个数较少,生长不良,子实体较细,形态较好,颜色呈乳白色现蕾密度较大,出现子实体个数较少,生长较好,粗细适中,形态较好,颜色呈黄色。

现蕾密度较大,出现子实体个数较多,生长较好,子实体粗细适中,形态最好,颜色呈桔黄色。没有现蕾

现蕾密度较小,零星出现几个子实体,子实体较细,形态较好,颜色呈淡黄色。

蛹虫草现蕾密度、子实体个数、形态和色质

Buddensity,thenumberoftruitingbodies,morphologyandchromatin

图1表3

五种培养条件下蛹虫草子实体差异五种培养条件下蛹虫草现蕾与出草历期

Fig.1󰀁FruitingbodiesdifferenceofcordycepsilitarisunderfivecultureconditionsTable3󰀁Timeofbuddingandthegrassforcordycepsmilitarisunderfivecultureconditions

󰀁

现蕾历期第一次采草历期第二次采草历期

30d35d53d

󰀂22d27d35d

22d13d27d

!未现蕾无子实体无子实体

∀22d

子实体仅有1cm长

55d

表4五种培养条件下第一次采收蛹虫草子实体的周长、长短与采草数

ofC.militarisunderfivecultureconditions

󰀁

󰀂2402406

4314207

!无无无无无无

∀无1无无1无

Table4󰀁Fruitingbodyperimeter,sizeandnumberofcollectedgrassforfirstharvest

周长(cm)长度(cm)采收子实体总数(个)

1cm以上1cm以下5cm以上3cm-5cm1cm-3cm1cm以下长度1cm以上

3404307

󰀁󰀁注:周长与长度:为单个鲜蛹虫草子实体的周长与长度

Note:circumferenceandlegthwasthatofsingleC.militaris󰀁348󰀁

山东农业大学学报(自然科学版)第42卷

表2、表3结果表明,󰀁环境下子实体历期时间最短,第一次采草的历期也远远短于其他培养条件,且现蕾密度较大,成形的子实体个数较多,子实体粗度适中,色质桔黄,为优质蛹虫草。2.3󰀁五种不同培养条件下蛹虫草子实体的粗细及长短差异

实验中对不同培养条件下两次采收的蛹虫草子实体粗细及长短做了比较,五种培养条件下蛹虫草的粗细及长短存在着一定的差异,如表4-5

表5

五种培养条件下第二次采收虫草的周长、长短与采草数ofC.militarisunderfivecultureconditions

󰀁

周长(cm)

1cm以上1cm以下5cm以上

长度(cm)

3cm-5cm1cm-3cm1cm以下

采草总数(根)

长度1cm以上

10167154026

󰀂110074011

72413171031

!无无无无无无

∀无4无无无4

Table5󰀁Fruitingbodyperimeter,sizeandnumberofcollectedgrassforsecondharrest

󰀁󰀁表4中结果表明,不同培养条件下第一次采收蛹虫草子实体时其粗细、长短有明显差异,在󰀁培养条

件下蛹虫草周长在1cm以上的占57%,长度在3~5cm的百分率也占57%,而在󰀁培养长条件下虫草周长在1cm以上的占42%,长度在3~5cm的占57%,在󰀁环境下虫草周长在1cm以上的占33%,长度在3~5cm的占33%;󰀁培养条件下采草数为7根,󰀁培养条件下采草数为6根,󰀁培养条件下采草数为7根,󰀁培养条件下采草数为1根。󰀁培养条件与󰀁培养条件下采收的子实体数相同,但󰀁培养条件比󰀁培养条件下子实体粗度与长度个数多。

表5中结果表明,在第二次采收中󰀁培养条件下,采收的蛹虫草周长在1cm以上的比󰀁培养条件稍低,但子实体总数与长度个数远超过󰀁培养条件,因此󰀁培养条件下培养的蛹虫草产量与品质均最为理想。

3

3.13.2

小结与讨论

经过以上五种培养条件下蛹虫草的出草与品质的比较,在󰀁培养条件下,蛹虫草出草快,品质好,产󰀁培养条件下始终未见现蕾,菌丝体层乳白中带有淡黄,与其他条件相比是菌丝长至2/3时进行温

量高,为蛹虫草最佳的培养条件。

差刺激;󰀁培养条件仅长出少许几根子实体,与其他条件相比是菌丝长满培养基时进行温差刺激;由此推断温差刺激可能不利于该菌株子实体的形成。参考文献

[1]李丽珍,杨海如,刘贵巧.蛹虫草高产栽培技术[J].现代农村科技,2010(07):125-128[2]闫󰀁静,周祖法,袁卫东,等.蛹虫草优质高产栽培技术[J].杭州农业与科技,2010(02):72-78[3]尹导群,陈󰀁丽,张󰀁松.蛹虫草抗肿瘤活性物质研究[J].中药材,2010(07):163-168[4]宋金俤,刘󰀁超,华秀红,等.蛹虫草产业化栽培瓶颈及其对策[J].中国食用菌,2009(01):23-29[5]孟繁宇蛹虫草高产菌株人工栽培条件的优化[J].食用菌,2009(04):673-677

[6]韦󰀁强,黄漫青.培养基营养成分对蛹虫草生长的影响[J].北京农业,2009(27):1153-1158[7]顾寅钰,张亚平,施新琴,等.蛹虫草液体培养基的研究[J].山东蚕业,2009(02):72-79[8]张秀波,刘玉升.大米培养基培养泰山蛹虫草子实体技术[J].农业知识,2009(21):110-114