ABA对木樨科植物抗冻性影响的研究

维普资讯 http://www.cqvip.com 园艺博览　现代农业科技）２００７　手第　ＡＢＡ对木樨科植物抗冻性影响的研究　徐利利ｔ陈焱山ｔ张士权　路超　金晓洁　刘洋　（－北京林业大学生物科学与技术学院，北京１０００８３；　山西朔州林业局）　摘要通过电导法测定经不同浓度脱落酸（ＡＢＡ）水培的３种木樨科植物在３种低温条件下受伤害的程度，研究脱落酸对植物抗冻性　的影响。结果表明：在其他条件相同时，冰冻时间越长，植物受伤害程度越大；在适合范围内，脱落酸浓度越大，植物受伤害程度越小，抗逆　性越强：水培时间越长．伤害度越大。　关键词脱落酸；木樨科植物；低温；抗冻性　环境胁迫如低温是限制植物生长发育的重要因素。近　年来的研究表明，脱落酸（ＡＢＡ）作为一种胁迫激素的观点　已广被人们接受。脱落酸是一种具有倍半萜结构的植物激　素。在植物体内。ＡＢＡ不仅存在多种抑制效应，还有多种促　进效应，在各种试验系统中，它的最适浓度可跨４个数量　级，对于不同的组织，它可以产生相反的效应。本试验选取３　种木犀科的植物。水腊（Ｌ￣ｕｓｔｍｍ　ｏｂｔｕｓｆｉｏｌｉｕｍ　ｓｉｅｂ．ｅｔ　“　）、暴马　丁香（Ｓ．ａｍｕｒｅｎｓｉｓ）、雪柳（Ｆｏｎｔａｎｅｓｉａ）作为试验材料，研究其对　木樨科植物抗冻性的影响。　．　１材料与方法　１．１材料　水腊叶片，暴马丁香叶片，雪柳叶片。　１．２试剂　脱落酸。　１．３仪器　ＤＤＳ－３０７型电导仪，电炉，冰箱，移液管，量筒，培养皿，　烧杯，打孔器。　　．１．４方法　先将３种植物枝条浸泡在不同浓度的脱落酸中，水培　时间不同。再将植物叶片放在冰箱中冷冻不同的时间．最后　用电导法测出叶片受伤害程度，根据其受伤害程度的不同，　分析脱落酸对植物抗低温的影响。　２试验步骤　（１）配置５０￣ｍｏＬ／Ｌ、１５０￣ｍｏＬ／Ｌ、３００￣ｍｏＬ／Ｌ的脱落酸　溶液各１００ｍＬ于清洗干净的大矿泉水瓶中，将３种植物枝　条放入水培，水培时间为２ｈ、４ｈ、８ｈ。　（２）水培结束，取同一叶位的功能叶若干片，分成３份，　一份为对照，一份放入冰箱一４℃冰冻１ｈ，一份放入冰箱　一４℃冰冻３ｈ，具体操作见图１。　（３）从冰箱中取出后，将处理组叶片与对照组叶片用蒸　馏水冲洗２次，再用洁净滤纸吸净表面水分，用打孔器避开　主脉打取叶圆片放入烧杯中，每杯放２０片。　（４）将以上烧杯置室温下保持３０ｒａｉｎ，其间要多次摇动　烧杯。　（５）３０ｒａｉｎ后，用电导仪测其初电导值（Ｓ，）。　基金项目　北京林业大学生物科学与技术学院学生科技创新基金。　作者简介　徐利利（１９８５一），女．河南南阳人，北京林业大学植物生理　学在读硕士，从事植物抗性生理生化研究。　通讯作者　收藕日期　２００７－０５－２３　８　组　８ｈ一（同上）　图１　ＡＢＡ对木樨科植物抗性冻性研究的试验步骤　（６）测毕，将各烧杯放在电炉上加热，直至水沸腾３ｍｉｎ，　以杀死植物组织，然后放置冷却到室温。并在室温下平衡　ｌＯｍｉｎ，摇匀，测其电导值（Ｓ：）。　（７）在电导度测定中一般用普通蒸馏水．需要设一空白　试管（蒸馏水作空白），测定样品时同时测定空白电导值，按　下式计算相对电导度：　相对电导度（Ｌ）＝（Ｓ，－Ｓ　）・（Ｓ『＿Ｓ　）一１　（１）　ｓ『＿空白电导度，相对电导度的大小，表示细胞膜受伤　害的程度。　由于对照（在室温下）也有少量电解质外渗，故可按下　式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗，称为伤害度（或　伤害性外渗）。　伤害度（％）＝（Ｌｔ－Ｌ　）・（１一Ｌ　）×１００　（２）　Ｌ　一处理叶片的相对电导度．　ｈ一对照叶片的相对电导度。　３结果与分析　３．１冰冻时间的影响　理论上，在其他条件相同时，冰冻时间越长，植物受伤　害程度越大。但从我们的实验来讲，却有部分与之不符之处　【见表１），这说明我们实验的部分数据测量出现了较大的误　差，这也导致我们很难从庞杂的实验数据中获取正确的规　律与结论。经分析我认为存在以下原因：　（１）材料之间存在差异。在采材料的时候，要尽量做到　采集一致的枝条，取叶片时尽量保证取同一叶位，也尽量保　证叶片的大小相同，同时还要保证叶片都是新生的、比较幼　嫩的。但因实验耗费大量叶片，这点在实施过程中存在困　维普资讯 http://www.cqvip.com 些型垫　ＱＱＺ生笙　墨塑——————旦苎　表１不同浓度脱落酸溶液、不同冷冻时间下３种植物枝条的伤害度表现　难。枝条粗细稍有不同。直接影响其吸收ＡＢＡ的能力。　（２）实验仪器存在误差。有时工作量相当大．就要采用　度越小．抗逆性越强。通过雪柳得出的数据证明了这一点　（见表２、表３）。　３－３水培时间对植物抗逆性的影响　多台电导率仪同时测量，仪器之间存在误差。有的仪器读数　不准，很难稳定下来．加大了误差。　以暴马丁香为例研究水培时间对植物抗逆性的影响。　（３）不同操作人员之间的操作习惯会导致误差。小组５　个组员，在实验过程中各测了一部分数据．所有数据再整合　结果表明：水培时间越长，伤害度越大。我们认为这可能是　因为离体时间太长导致的结果。　表４暴马丁香不同水培时间的伤害度均值　到一起，会加大误差。此外，实验从早晨持续到晚上１１时。　组员比较疲劳，但在操作上却更熟练。这样也会导致前后数　据会产生误差。　（４）实验过程中存在失误。比如未严格控制煮沸或摇晃　振荡的时间，没有严格计时。左右相差３０ｓ。也影响了实验结　果。　４注意事项　植物组织受到逆境伤害时，由于膜的功能受损或结构　３．２脱落酸浓度对植物抗逆的影响　破坏，其透性增大，细胞内各种水溶性物质包括电解质将有　不同程度的外渗，将植物组织浸入无离子水中．水的电导度　理论上在适合范围内。脱落酸浓度越大。植物受伤害程　表２每一种脱落酸浓度的所有情况（包括不同植物材料、　不同水培时间、冰冻时间）的伤害度均值　将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导度的　增加也愈大。此方法十分便捷而有效，但需要注意的事项较　多：①取材。材料新鲜、健康，并且生理生态状况相近。②仪　器。最好固定，避免测量仪器间存在的差别而干扰实验的结　果。③操作人员。细致耐心，且要对实验流程十分清楚。操作　要遵从实验规则。④实验过程。单因子分析时．要尽量使其　表３雷柳在不同脱落酸浓度下的所有情况（包括不同水培　时间、冰冻时间）的伤害度均值　他因素保持一致；比如，实验步骤（６）中杀死植物组织这一　步，加热煮沸时间要一致，我们就是因为这一步没有把握　好，所以给实验的结果带来了负面的影响。　本实验较为复杂且环环相扣，每一步的操作都有可能　对实验的结果产生重要的影响。因此，在做此实验中应注意　每一细节，尽量避免因一步的失误而造成整个实验的失败。　９