生化仪直接测定G6PD活性的临床应用

维普资讯 http://www.cqvip.com 检验医学与临床２００７年８月第４卷第８期Ｌａｂ　Ｍｅｄ　Ｃｌｉｎ，Ａｕｇｕｓｔ　２００７，Ｖｏｌ　４，Ｎｏ　８　７０９　生化仪直接测定Ｇ６ＰＤ活性的临床应用　梁栋伟　，区丽群。　（１．广东省佛山市南海平洲医院检验科５２８２５１；２．广东省佛山市第一人民医院研究所）　【摘要】　目的　探讨在全自动生化仪上直接测定葡萄糖六磷酸盐脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）活性对检测Ｇ６ＰＤ缺乏的可　靠性。方法　同时用生化仪上直接测定Ｇ６ＰＤ活性、Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法及高铁血红蛋白还原率法（ＭＨＢ－ＲＴ）对　２４６例成人标本进行检测分析。结果　ＭＨＢ－ＲＴ阳性检出率最高为８．１３　，直接酶活性法与Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法　有较好的符合率，二者对Ｇ６ＰＤ缺乏的检出率同为６．１　，但２例用比值法测定结果为可疑的女性样本（高度怀疑　为杂合子），直接酶活性法测定结果分别为１　６１３、１　６６９　ｐ／Ｌ，在正常参考范围的低值。结论　在全自动生化仪上直　接测定Ｇ６ＰＤ活性，可用于临床Ｇ６ＰＤ缺乏的筛查，对于女性样本酶活性在１　３００～２　０００　ｔｚ／Ｌ者，建议同时用　Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法检测，以提高杂合子的检出率。　【关键词】葡萄糖六磷酸盐脱氢酶；　Ｇ６ＰＤ缺乏；　检测　中图分类号：Ｒ４４６．１　文献标志码：Ａ　文章编号：１６７２—９４５５（２００７）０８—７０９—０２　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇ６ＰＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ　ＬＩＡＮＧ　Ｄｏｎｇ－ｗｅｉ　，ＯＵ　Ｌｉ—ｑｕｎ　．１．Ｄｅｐａｒｔ—　ｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｐｉｎｇｚｈｏｕ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｎａｎｈａｉ，Ｆｏｓｈａｎ　５２８２５１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌａｂｏｒａｔｏ—　ｒｙ，ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ｐｅｏｐｌｅ　Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｆｏｓｈａｎ，Ｆｏｓｈａｎ　５２８２００，Ｃｈｉｎａ　［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｄｅｐｅｎｄａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｇｌｕｃｏｓｅ－６一ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｇ６ＰＤ）ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｂｙ　ｂｉｏ—　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ　ｆｏｒ　ｅｘａｍｉｎｉｎｇ　Ｇ６ＰＤ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　２４６　ａｄｕｌｔ　ｂｌｏｏｄ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ，Ｇ６ＰＤ／６ＧＰＤ　ｒａｔｉｏ　ｔｅｓｔ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ　ｔｅｓｔ（ＭＨＢ－ＲＴ）ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｈｉｇｈ—　ｅｓｔ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　８．１３　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ＭＨ　ＲＴ．Ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ　ａ　ｈｉｇｈ　ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ　ｒａｔｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｇ６ＰＤ／６ＧＰＤ　ｒａｔｉｏ　ｔｅｓｔ．Ｂｏｔｈ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅｓ　ｗｅｒｅ　６．１　．Ｂｕｔ　ｔｗｏ　ｆｅｍａｌｅ　ｃａｓｅｓ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｄｅｔｅｃ－　ｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｇ６ＰＤ／６ＧＰＤ　ｒａｔｉｏ　ｔｅｓｔ　ｗｅｒｅ　ｄｏｕｂｔｆｕ１．Ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｓｕｓｐｉｃｉｏｕｓ　ｏｆ　ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，　ｔｈｅｉｒ　Ｇ６ＰＤ　ｌｅｖｅｌ　ｗａｓ　１　６１３　ｔｚ／ｌ　ａｎｄ　１　６６９　ｔｚ／Ｌ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ，ｌｙｉｎｇ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｒ　ｌｉｍ—　ｉｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｒａｎｇｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　Ｇ６ＰＤ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｂｙ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎａｌｙｚｅｒ　ｃａｎ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎ—　ｉｃａｌ　ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇ６ＰＤ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｔｈｅ　ｆｅｍａｌｅ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｈｏｓｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１　３００—２　０００　／Ｌ　ａｒｅ　ｓｕｇｇｅｓ—　ｔｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｇ６ＰＤ／６ＧＰＤ　ｒａｔｉｏ　ｔｅｓｔ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ　ＳＯ　ａｓ　ｔｏ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｈｅｔｅｒｏｚｙｇ０ｓｉｔｙ．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］　Ｇ６ＰＤ，　Ｇ６ＰＤ　ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ；ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　葡萄糖六磷酸盐脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏，是一种常见的遗传　１．２．２　Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法采用广州米基科技有限公司生　性代谢性疾病，呈ｘ染色体联锁的不完全显性遗传。临床上　产的试剂盒。批号：０７０１１８—０１。仪器：ＶＩＳ７２３分光光度计。　主要依靠临床表现及实验室检查加以诊断。故临床上寻求一　取比值＜０．９５为缺乏，比值在０．９５～１．０５为可疑，比值＞　种快速有效的检验手段显得十分必要。本文使用国产Ｇ６ＰＤ　１．０５为正常。　酶法试剂盒，在全自动生化仪上直接测定Ｇ６ＰＤ活性，与高铁　１．２．３　Ｇ６ＰＤ活性测定　采用广州科方医疗器械有限公司生　血红蛋白还原率（ＭＢＨ－ＲＴ）法及Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法相比较，　产的Ｇ６ＰＤ试剂盒。批号｛２００７０３０５。仪器：雅培Ｃ８０００全自　对直接酶活性法检出Ｇ６ＰＤ缺乏的可靠性进行探讨。现将结　动生化仪。按说明书提供的参数进行操作。正常参考范围为　果报道如下。　１　３００～３　６００“／Ｌ。　１材料与方法　２结　果　１．１临床资料　所有样本均为佛山市第一人民医院２００７年　同时用３种方法对２４６例标本进行检测，结果见表１、表　５月份门诊及住院的产检或婚检的标本，年龄２Ｏ～４８岁，共　２　２４６例，男性１３０例，女性１１６例。采用ＡＣＤ抗凝，４℃保存。　表１　３种方法对２例可疑标本的检测值　１．２方法　１．２．１　ＭＨＢ－ＲＴ法按《全国临床检验操作规程》（第３版）　进行试剂配制及操作。仪器：ＶＩＳ７２３分光光度计。取还原率　小于７５　为缺乏，７５　～８Ｏ　为可疑，大于８Ｏ　为正常。　维普资讯 http://www.cqvip.com ７１０　检验医学与临床２００７年８月第４卷第８期表２　３种方法对２４６例标本的检测结果　Ｌａｂ　Ｍｅｄ　Ｃｌｉｎ，Ａｕｇｕｓｔ　２００７，Ｖｏｌ　４，Ｎｏ　８　３讨　论　Ｇ６ＰＤ缺乏的筛查　］。但建议对于女性标本酶活性在１　３００　～广东地区是Ｇ６ＰＤ缺乏高发区，由于该病无法根治，只能　２　０００／ｚ／Ｌ者，用Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法加以复查，以提高杂合　对症治疗及预防发病，故在人群中特别是产检及婚检中进行快　速有效的筛查显然必要。本文采用的３种方法各有优缺点。　子的检出率。　参考文献　从本次实验结果看，ＭＨＢ－ＲＴ法阳性率最高达８．１３　，但该法　存在２Ｏ　以上的假阳性率　］，且操作烦琐。直接酶活性法与　Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法阳性率一致，均为此６．１　。，均为男性１３　例，女性２例。仅男性１３０例标本来看，直接酶活性法与　Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法二者对Ｇ６ＰＤ缺乏的检出能力无差异。　但对于２例比值法检测结果为可疑的女性标本，直接酶活性法　１罗桂英，李招金，毛江洪．Ｇ６ＰＤ酶定量比值法的临床应用　［Ｊ］．江西医学检验，２００３，２１（２）：９７—９８．　２蔡燕芬，蒋迎佳，杨涛．Ｇ６ＰＤ试纸法与Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值　法的对照研究ｉ－Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２００３，１１（６）：４６．　３　区丽群，崔金环，林蔚，等．应用Ｇ６ＰＤ／６ＰＧＤ比值法检测育　龄夫妇６一磷酸葡萄糖脱氢酶ｉ－Ｊ］．现代检验医学杂志，２００４，　１９（４）：３１．　测得值为１　６１３、１　６６９　／Ｌ，即在正常参考范围的低值区。由　于Ｇ６ＰＤ缺乏为呈ｘ联锁不完全显性遗传，故怀疑该２例标本　极有可能为杂合子（未能证实），认为酶活性法对杂合子有一定　的漏检率。但直接酶活性法，由于可在自动生化仪上检测，其　结果的可重复性及检测速度是其他方法无法比拟的＿２　］。本文　４裴新燕，蔡宗友，曹小英，等．广东湛江新生儿Ｇ６ＰＤ缺乏症　的筛查报告ｉ－Ｊ］．中国优生与遗传杂志，２００２，１０（３）：８６—８７．　５　叶应妩，王毓三．全国临床检验操作规程［Ｍ］．第３版．南　京：东南大学出版社，２００６．１７３．　认为直接酶活性法虽然存在对杂合子有较大漏检的局限性，但　作为临床上大批量标本的筛查，却有方便、快捷，可批量检测，　以及对男性标本有高度的敏感性等特点，可应用于临床上　（上接第７０８页）　对ｐ．内酰胺类和非ｐ．内酰胺类抗生素常常同时耐药，这与携带　编码ＥＳＢＬｓ基因的质粒同时带有其他抗生素（如喹诺酮类、氨　基糖甙类）的耐药基因有关。产ＥＳＢＬｓ菌株对碳青酶烯类药　（收稿日期：２００７－０５－２０）　对１９种抗生素的耐药性［Ｊ］．中华医学检验杂志，２０００，２３　（１）：４４．　２　Ｓａｎｄｅｒｓ　ＣＣ，Ｂａｒｒｙ　ＡＣ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ　ＴＡ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｃｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｘｔｅｎｄｅｄ　ｓｐｅｃｔｒｕｍ　ｂｅｔａ－ｌａｃｔａｍａｓｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ｍｅｍｂｅｒｓ　ｏｆ　物（ＩＭＩ／ＭＥＭ）仍十分敏感，ＩＭＩ作为首选治疗产ＥＳＢＬｓ菌株　已被普遍接受，但目前临床使用碳青酶烯类药物较为广泛，应　严密监视，警惕碳青酶烯类药物耐药株的出现。　ＶＩＴＥＫ一３２是一种快速细菌鉴定和药敏试验自动化仪器，　ｆａｍｉｌｙ　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ　ｗｉｔｈ　ＶＩＴＥＫ　ＥＳＢＬ　ｔｅｓｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９６，３４（１２）：２９９７－３０００．　３刘文恩，王兰鸽，唐银，等．超广谱　内酰胺酶的产生与临　床抗生素应用的相关性研究［Ｊ］．湖南医科大学学报，２００２，　２７（４）：３５４－３５６．　能够快速完成大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的鉴定、药敏、ＥＳ－　ＢＬｓ检测。该系统中药敏结果有专家系统提示并修正，一旦大　肠埃希菌和肺炎克雷伯菌被检出是ＥＳＢＬｓ阳性菌株，如果对　４　Ｓｔｅｗａｒｄ　ＣＤ，Ｒａｓｈｅｅｄ　ＪＫ，Ｈｕｂｅｒｔ　ＳＫ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｆｒｏｍ　１　９　ｌａｂｏｒａ—　ｔｏｒｉｅｓ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ　ｆｏｒ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　青霉素，１～４代头孢菌素和安曲南中任何一种显示敏感，则系　统自动发出“专家系统”警报，提示这些药物对ＥＳＢＬｓ菌株活　性下降。由于ＥＳＢＬｓ主要由质粒介导，具有可传播性，容易引　起严重的医院感染和社区获得性感染，且表现为多重耐药性，　给临床抗感染治疗带来很大的困难，医务人员应对其有充分的　Ｓｔａｎｄｏｒｄｓ　ｅｘｔｅｎｄｅｄ－’ｓｐｅｃｔｒｕｍ￣－ｌａｅｔａｍａｓｅｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈ－＿　ｏｄｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００１，３９（８）：２８６４—２８７２．　５熊自忠，朱德妹，张婴元，等．临床分离的肺炎克雷伯菌和大　肠埃希菌中超广谱　内酰胺酶的的检测［Ｊ］．中华医学杂　志，２００２，８２（２１）：１４７６－１４７９．　认识，提高临床标本的送检率，避免用第３代头孢菌素做经验　性治疗，严格按照药敏结果合理用药，这对控制产ＥＳＢＬｓ菌株　的播散有十分重要的意义。　参考文献‘　（收稿日期：２００７一Ｏ１—２３）　１孙长贵，舒建，张丽君，等．超广谱口＿内酰胺酶大肠埃希氏菌