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PH0405 BCIP-NBT即用型显色试剂盒实验操作手册

2020-01-17 来源:好走旅游网
PH0405|BCIP/NBT即用型显色试剂盒

Ready-to-useBCIP/NBTSolution,Premixed

CatalogNo:PH0405Size:100mLStoreat2~8℃简介

(5-Bromo-4-chloro-3-indolylphosphate)5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐+NBT(四唑硝基蓝)是碱性磷酸酶(AP)BCIP最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶的催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC和WesternBlot实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。本染色液为即用型工作液,可以直接使用,不用稀释。使用参考

1.印迹膜显色:将本品滴加在待检测的印迹膜上(或将印迹膜浸入到BCIP/NBT显色液中),室温避光孵育10-20分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。注:印迹膜显色前要用1×TBST漂洗3次,每次10分钟。不要用1×PBST漂洗,因为无机磷是AP的强烈抑制剂。2.组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育10-20分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。注意事项

1)BCIP对人体有刺激性,NBT对人体有害,请注意适当防护。2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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