第25卷第3期 2006年8月 河南大学学报(医学版) Journal of Henan University(Medical Science) Vol_25 No.3 Aug.2006 茜草抗氧化成分研究 康文艺,臧鑫炎,李黎 (河南大学天然药物研究所,河南开封475004) 摘一要:目的:对有活性的茜草氯仿提取部位进行化学成分的分离筛选。方法:首次利用DPPH(1,l—diphenyl一2 picrylhydrazy)方法,对茜草提取部位进行抗氧化筛选。结果:从有活性的氯仿部位分离得到l1个化合物,经波谱 分析鉴定为Mollugin(1),Furomollugin(2),6一hydroxyrubiadin(3),Alizarin(4),6一methxylquiniza n(5),l—hy・ droxy一2一methylanthraquinone(6),Xanthopurpurin(7),Anthragallol(8),Rubiadin(9),Ursolic acid(1O),卢一sitos・ terol(11)。结论:其中化合物3,4,8具有抗氧化活性,化合物lO为首次从该属中分离得到。 关键词:茜草;DPPH;抗氧化活性 中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1672—7606(2006}03-0006—03 Antioxidants from Rubia cordifolia KANG Wen—yi,ZANG Xin—yan,LI Li (h ̄stitute of Natural Products,Henan University,Kaifeng 475004,Henan,China) Abstract:Objective:The active chlorofrom extract from rubic cordifolia was isolated.Methods"The extracts of Rubia cord@lia were tested by the method of DPPH scavenging free radical for the first time.Results: From the active chloroform extract,eleven compounds,Mollugin(1),Furomollugin(2),6一hydroxyrubiadin(3),Alizarin(4),6一 methxylquiniza“n(5),1一hydroxy一2一methylanthraquinone(6),Xanthopurpurin(7),Anthragallol(8),Rubiadin(9), Ursolic acid(10),卢一sitosterol(11),were isolated.Conclusion: Compound 3,4 and 8 had antioxidant activity,EC5o was 14.7,2.8,13、3 g/ml respectively,compound 10 was isolated for the first time from the genus、 Key WOrds:Rubia cord@lia;DPPH;Antioxidants 茜草Rubia cordifolia L.又名蓓草、牛蔓、红蓝、 西天王草、五叶藤、八仙草、破血丹和小女儿红等。是 茜草科茜草属多年生攀援草本,主产于陕西渭南、河 1仪器与材料 显微熔点测定仪,温度未校正;Bruker Am一400 南嵩县、安徽、河北、山东、湖北、江苏、浙江、江西、甘 超导核磁共振仪;Fonnegan一45 10质谱仪;722一分光 肃、辽宁、广东、广西和四川等地,其中以陕西渭南、河 光度计;DPPH购自Sigma公司,柱层析所用的硅胶 南嵩县产量大而且品质优良¨ 。茜草属约有60多种 为青岛海洋化工厂生产;中药茜草购自北京同仁堂药 植物,广泛地分布在非洲、亚洲中部和美洲等地。由 店。于茜草长期作为天然染料和药用植物使用,它的化学 成分被深入系统的研究,各种类型的化合物相继被分 离鉴定 。我们在寻找天然抗氧化剂的研究中,对 2提取与分离 茜草根茎1kg,用体积分数为95%的乙醇在室温 有活性的茜草氯仿提取部位进行了化学成分的分离, 下渗漉提取,回收乙醇,得到浸膏70g。将浸膏溶于 得到l1个已知化合物,并利用DPPH方法,对所分离 水中,加热使其完全溶解。分别用氯仿和正丁醇进行 化合物进行了抗氧化活性筛选。 收稿Et期:2006—04—18 萃取,浓缩得到氯仿部分和正丁醇部分。其中氯仿部 基金项目:国家自然基金项目(30500646);中国博士后科学基金(20040352254)。 作者简介:康文艺(1971一),男,黑龙江尚志市人,医学博士后,副教授,从事天然活性成分研究工作。 维普资讯 http://www.cqvip.com
康文艺,等:茜草抗氧化成分研究 7 分30g,经硅胶柱色谱,以石油醚:丙酮(100:1~ 6),121.4(C一7),129.6(C一8),124.9(C一 9:1)、石油醚:乙酸乙酯(20:1—8:2)梯度洗脱,分离 8a),108.7(C一8b),185.9(C一9),182.1(C一 纯化后得到11个化合物。 10),8.3(2一CH )。以上数据与文献报道一致 。 Alizarin(4,C H8 O ),红褐色针状结晶,mp 3 结构鉴定 288—289℃,EIMS m/z(%):240[M] (100), Mollugin(1,Cl6 Hl2 05),无色柱状晶体,mp 212(20),184(12),155(10),138(10),128 132—134℃,EIMS m/z(%):284[M] (60),269 (10). H NMR(400 MHz,DMSO)6:7.62(1H,d, (28),252(50),237(100),224(10),209(10), J=8.3 Hz,H一3),7.20(1 H,d,J=8.3 Hz,H一 152(20). H NMR(400 MHz,CDC1 )6:8.37 4),8.19—8.12(2H,ITI,H一5,8),7.92—7.86 (1H,d,J=8。9 Hz,H一5),8.18(1H,d,J= (2H,in,H一6,7).”C NMR(100 MHz,DMSO)6: 8.5 Hz,H一8),7.61(1H,in,H一6),7.51(1H, 150.7(C一1),152.7(C一2),121.1(C一3), in,H一7),7.11(1 H,d,J=10 Hz,H一1),5.67 120.8(C一4),121.0(C一4a),132.8(C一4b), (1H,d,J=10 Hz,H一2),3.99(3H,s,OCH3), 126.7(C一5),135.0(C一6),133.9(C一7), 1.48(6H,s,H一4,5). C NMR(100 MHz, 133.5(C一8),188.7(C一9),180.4(C一10), CDC1 )6:156.4(C一1),102.1(C一2),112.5(C l33.4(C一8a),I 16.I(C一8b)。波谱数据与文献 一3),141.5(C一4),128.9(C一4a),124.0(C一 一致 。 5),129.3(C一6),126.2(C一7),121.8(C一8), 6一methxylquinizarjn(5,CI5Hl004),黄色针状 125.0(C一8a),172.4(C=O),52.2(OCH ), 晶体,ESIMS m/z:254.与标准品对照,TLC在各种 122.2(C一1),128.8(C一2),74.6(C一3),26.9 展开剂下均一致。 (C一4 ,5 )。以上数据与文献一致 。 1一hydroxy一2一methylanthraquin0ne(6,C l5 Hl0 Furomollugin(2,Cl4Hl004),灰色晶体,EIMS O ),黄色针晶,mp 184—185℃,EIMS m/z(%): m/z(%):242[M] (38),210(100),182(19), 238[M] ,209(10),181(18),152(10). H 154(32),126(42). H NMR(400 MHz,CDC13)6: NMR(400 MHz,CDC1 )6:12.96(1H,s,1一OH), 8.45(1H,d,J=8.3 Hz,H一5),8.18(I H,d,J 8.31(2H,in,H一6,7),7.80(2H,nl,H一5,8), =8.3 Hz,H一5),7.70(2H,in,H一7,4),7.51 7.76(1H,d,J=7.6 Hz,H一3),7.53,(1H,d,J (1H,ddd,J=1.1,1.1,1.3 Hz,H一6),7.17 =7.6 Hz,H一4),2.38(3H,s,2一CH ) 。 (1 H,d,J=2.0 Hz,H一8),4.07(3H,s,OCH3), Xanthopurpurin(7,cl4H804),黄色针晶,mp 1.48(6H,s,H一4,5). C NMR(100 MHz, 268—270℃,EIMS m/z(%):240[M] (100), CDC1 )6:144.4(C一1),119.6(C一2),99.2(C 212(20),184(12),155(10),138(10),128 一3),159.2(C一4),125.1(C一5),124.9(C一 0). H NMR(400 MHz,CD3COCD3)6:12.84 6),130.0(C一7),1 19.7(C一8),124.8(C一 H,s,1一OH),10.0l(I H,brs,3一OH),8.28 9),122.9(C一10),109.4(C一4),144.2(C一 H,in,H一8),8.22(1 H,in,H一5),7.91(2H, 5)。波谱数据与文献吻合 。 m,H一6,7),7。25(1H,d,J=2。4 Hz,H一2), 6一hydroxyrubiadin(3,Cl5 Hl005),黄色晶体, 6.67(1H,d,J=2.3 Hz,H一4),波谱数据与文献 mp 236—238℃,EIMS m/z (%):270[M] 报道一致 。 (100),242(18),215(15),196(10),121(15). Anthragallol(8,Cl4H805),褐色针晶,mp 312— H NMR(400 MHz,CD COCD )6:8.16(1H,d,J 313℃,EIMS m/z(%):254[M] ,(100),226 =8.5 Hz,H一8),7.29(1H,dd,J=8.4,2.6 Hz, (18),199(10),152(12),115(11). H NMR H一7),7.58(1H,d,J=2.6 Hz,H一5),7.30 (400 MHz,CD COCD )6:13.39(1 H,s,1一OH), (IH,s,H一4),13.38(I H,s,I—OH),9.16 13.12(1H,s,2一OH),10.01(1 H,brs,3一OH), (1H,s,3一OH),2.20(3H,s,2一CH ).”C NMR 8.35(2H,in,H一5,8),7.96(2H,in,H一6,7), (100 MHz,CD COCD ) :162。4(C一1),1 17.6(C 6.77(1H,s,H一4),波谱数据与文献报道一致 j。 一2),163.6(C一3),107.2(C一4),135.3(C一 Rubiadin(9,Ci5Hl004),黄色针晶,mp 302℃, 4a),131.9(C一4b),112.6(C一5),162.3(C—EIMS m/z(%):254[M] (100),238(19),226 维普资讯 http://www.cqvip.com
8 河南大学学报(医学版),2006年,第25卷第3期 (18),197(12),152(22),115(16). H NMR 定浓度的待测样品对半稀释,取各浓度下样品0.1 ml (400 MHz,CD3 COCD3)6:8.29(1H,m,H一8), 加人到3.5ml DPPH溶液中,充分混匀,在室温下静 8.22(1H,m,H一5),7.90(2H,m,H一6,7), 置30rnin后,在515nm波长下检}贝0吸光度值,同时设 与阴性对照并平行三份 J。 7.37(1H,S,H一4),2.27(3H,S,2一CH ),数据 置阳性:与文献报道一致 J。 按照上述操作对茜草氯仿和正丁醇部位进行筛 g/m1)。根据这一结果对该部位进行分离,并对所 Ursolic acid(1O,C30H勰O3),白色粉末,mp 305 选,发现氯仿部位具有明显抗氧化活性(EC蜘3.2 —308 oC,[Ot]20 D一8.8(C,0.25,CH3 C1). 发现化合物3,4,8具 EIMS m/z(%):456(M ,20),410(8),248 得到的11个化合物进行筛选,2.8、13.3 g/m1), (100),233(30),213(75),175(33),131(30). 有抗氧化活性(EC如分别为14.7、 H NMR(400 MHz,C5D5N)6:3.38(1H,dd,J= 其他化合物均不显示抗氧化活性。1 1.3,3.4 Hz,H一3),5.57(1H,brs,H一12), 2.42(1H,d,J=11.32 Hz,H一18),0.67(3H,s, H一23),0.63(3H,S,H一24),0.84(3H,S,H一 5 讨论 应用DPPH检测天然产物抗氧化活性是一种操 25),0.81(3H,S,H一26),1.03(3H,d,J=5.9 作简单,快速、灵敏、直接的可行方法 J。根据这一 Hz,H一29,1.01(3H,d,J=6.1 Hz,H一30)。与 方法从有活性的茜草氯仿部位得到三个活性化合物,标准品对照,TLC在各种展开剂下均一致。 一其中化合物4是该部位的主要成分,并且其活性 2.8 g/m1)与氯仿部位活性(EC 。3.2 g/m1) sitosterol(11,C29H50 O),mp 135—137 oC, (EC 。致谢:本项目由国家自然科学基金(30500646) 说明该化合物是氯仿部位的主要活性成分。 EIMS m/z(%):414(M ,100),369(41),329 接近,(24),300(64),271(68),255(83),231(56), 145(76),95(93)。与标准品对照,TLC在各种展 与中国博士后科学基金(2004035254)资助。开剂下均一致。 4 抗氧化活性测定 精密称取DPPH配制成0.06raM乙醇溶液,将一 参考文献: [1]方晓艳,孙艳红,杨林莎.茜草的研究进展[J].河南中医药学刊,2002,17(5):78—80. [2]Singh,R.,Geetanjlai,Chauhan,S.M.S.9,10一Anthraquinones and other biologically active compounds from the genus Rubia [J].Chemistry&biodiversity,2004,(1):1241—1261. [3]华会明,王素贤,吴立军,等.茜草中萘醌酯类成分的研究[J].药学学报,1992,27(4):279—282. [4]王素贤,华会明,吴立军,等.茜草中蒽醌类成分研究[J].药学学报,1992,27(10):743—747. [5]Itokawa,H.et a1.Anthraquinonesfrom Rubia eordifolia[J].Chem.Pharm.Bull,1983,31(7):2353—2358. [6]Sehripsema,J.,Dagnino,D.Elucidation of the substitution patern of 9,1 0一anthraquinones through the chemical shitfs of peri —hydroxyl protons[J].Phytochemistry,1996,42(1):177—184. [7]Courehesne,M.,Brassard,P.Identification and characterization of natural occurring Rubiadins[J].J.Nat.Prod,1993,56 (5):722—730. [8]Liu,J.K.,Hu,L.,Dong,z.J.,Hu,Q.DPPH radical scavenging activity of ten natural P—terphenyl derivatives obtained rfom three edible mushroom indigenous to China[J].Chemisty&birodi ̄rersity,2004,(1):601—605. [9]彭长连,陈少薇,林植芳,等.用清除自由基DPPH法评价植物抗氧化能力[J].生物化学与生物物理进展,2000,27 (6):660—661. [责任编辑段金卯】
因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容