1．构成蛋白质的氨基酸有 种，一般可根据氨基酸侧链（R）的 大小分为 侧链氨基酸和 侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有 性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有 性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是 氨基酸和 氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是 氨基酸和 氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含
有 氨基酸、 氨基酸或 氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是 ；半胱氨酸的侧链基团
是 ；组氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 、 、 、 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是 ，除脯氨酸以外反应产物的颜色
是 ；因为脯氨酸是a—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示 色。 5．蛋白质结构中主键称为 键，次级键有 、 、
、 、 ；次级键中属于共价键的是 键。
6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子b亚基的第六位
氨酸被 氨酸所替代，前一种氨基酸为 性侧链氨基酸，后者为 性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是 ；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是 。 8．蛋白质二级结构的基本类型
有 、 、
和 。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为
键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与 、 、
有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的a-螺旋往往会 。
9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是
和 。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征
是 、 。
11．在适当浓度的b-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的 被破坏造成的。其中b-巯基乙醇可使RNA酶分子中
的 键破坏。而8M脲可使 键破坏。当用透析方法去除b-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为 。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和，在的溶液中它们分别荷的电性
是 、 。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中 氨酸和 氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而 氨酸、 氨酸或 氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示
为 ，单个肽平面及包含的原子可表示为 。
15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以 离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸（主要）以 离子形式存在；当pH＜pI时，氨基酸（主要）以 离子形式存在。 16．侧链含—OH的氨基酸
有 、 和 三种。侧链含—SH的氨基酸是 氨基酸。
17．人体必需氨基酸是指人体自身不能合成的、必须靠食物提供的氨基酸。这些氨基酸包
括 、 、 、 、
、 、 、 等八种。
18．蛋白质变性的主要原因是 被破坏；蛋白质变性后的主要特征是 ；变性蛋白质在去除致变因素后仍能（部分）恢复原有生物活性，表明 没被破坏。这是因为一级结构含有 的结构信息，所以蛋白质分子构象恢复后仍能表现原有生物功能。 19．盐析作用是
指 ；盐溶作用是
指 。
20．当外界因素（介质的pH＞pI、电场电压、介质中离子强度、温度等）确定后，决定蛋白质在电场中泳动速度快慢的主要因素是 和 。 二、选择填空题
1．侧链含有咪唑基的氨基酸是（ ）
A、甲硫氨酸 B、半胱氨酸 C、精氨酸 D、组氨酸 2．PH为8时，荷正电的氨基酸为（ ）
A、Glu B、Lys C、Ser D、Asn 3．精氨酸的Pk1=、Pk2=（a-NH3）Pk3=（胍基）PI=（ ） A、1/2+ B、1/2+
C、1/2+12,48) D、1/3（+9。04+12。48） 4．谷氨酸的Pk1=(a-COOH)、pk2=(a-NH3)、pk3=(g-COOH) pl=（ ） A、1/2（+9。67） B、1/2（+） C、1/2+ D、1/3++ 5．氨基酸不具有的化学反应是（ ）
A、肼反应 B、异硫氰酸苯酯反应 C、茚三酮反应 D、双缩脲反应
6．当层析系统为正丁醇∶冰醋酸∶水=4∶1∶5时，用纸层析法分离苯丙氨酸（F）、丙氨酸（A）和苏氨酸（T）时则它们的Rf值之间关系应为：（ ）
A、F＞A＞T B、F＞T＞A C、A＞F＞T D、T＞A＞F 7．氨基酸与亚硝酸反应所释放的N2气中，氨基酸的贡献是（ ）
A、25% B、50% C、80% D、100% 8．寡肽或多肽测序时下列试剂中最好的是（ ）
A、2，4-二硝基氟苯 B、肼 C、异硫氰酸苯酸 D、丹酰氯 9．下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容的是（ ） A、多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序 B、多肽链中氨基酸残基的键链方式 C、多肽链中主肽链的空间走向，如a-螺旋
D、胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键，分别是A7-S-S-B7，A20-S-S-B19 10．下列叙述中哪项有误（ ）
A、蛋白质多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序在决定它的二级结构、三级结构乃至四级结构中起重要作用
B、主肽链的折叠单位～肽平面之间相关一个Ca碳原子
C、蛋白质变性过程中空间结构和一级结构被破坏，因而丧失了原有生物活性 D、维持蛋白质三维结构的次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力和范德华力 11．蛋白质变性过程中与下列哪项无关（ ）
A、理化因素致使氢键破坏 B、疏水作用破坏
C、蛋白质空间结构破坏 D、蛋白质一级结构破坏，分子量变小 12．加入下列试剂不会导致蛋白质变性的是（ ）
A、尿素（脲） B、盐酸胍 C、十二烷基磺酸SDS D、硫酸铵 13．血红蛋白的氧合动力学曲线呈S形，这是由于（ ） A、氧可氧化Fe（Ⅱ），使之变为Fe（Ⅲ）
B、第一个亚基氧合后构象变化，引起其余亚基氧合能力增强
C、这是变构效应的显著特点，它有利于血红蛋白质执行输氧功能的发挥 D、亚基空间构象靠次级键维持，而亚基之间靠次级键缔合，构象易变 14．下列因素中主要影响蛋白质a-螺旋形成的是（ ）
A、碱性氨基酸的相近排列 B、酸性氨基酸的相近排列
C、脯氨酸的存在 D、甘氨酸的存在 15．蛋白质中多肽链形成a-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（ ）
A、疏水键 B、肽键 C、氢键 D、二硫键 16．关于蛋白质结构的叙述，哪项不恰当（ ）
A、胰岛素分子是由两条肽链构成，所以它是多亚基蛋白，具有四级结构 B、蛋白质基本结构（一级结构）中本身包含有高级结构的信息，所以在生物 体系中，它具有特定的三维结构
C、非级性氨基酸侧链的疏水性基团，避开水相，相互聚集的倾向，对多肽链 在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用
D、亚基间的空间排布是四级结构的内容，亚基间是非共价缔合的 17．有关亚基的描述，哪一项不恰当（ ） A、每种亚基都有各自的三维结构
B、亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在 C、一个亚基（单位）只含有一条多肽链 D、亚基单位独立存在时具备原有生物活性
18．关于可溶性蛋白质三级结构的叙述，哪一项不恰当（ ） A、疏水性氨基酸残基尽可能包裹在分子内部 B、亲水性氨基酸残基尽可能位于分子内部 C、羧基、氨基、胍基等可解离基团多位于分子表面 D、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等残基尽可能位于分子内部 19．蛋白质三级结构形成的驱动力是（ ）
A、范德华力 B、疏水作用力 C、氢键 D、离子键 20．引起蛋白质变性原因主要是（ ）
A、三维结构破坏 B、肽键破坏 C、胶体稳定性因素被破坏 D、亚基的解聚 21．以下蛋白质中属寡聚蛋白的是（ ）
A、胰岛素 B、Rnase C、血红蛋白 D、肌红蛋白 22．下列测定蛋白质分子量的方法中，哪一种不常用（ ）
A、SDS-PAGE法 B、渗透压法 C、超离心法 D、凝胶过滤（分子筛）法 23．分子结构式为HS－CH2－CH－COO的氨基酸为（ ）
A、丝氨酸 B、苏氨酸 C、半胱氨酸 D、赖氨酸 24．下列氨基酸中为酪氨酸的是（ ）
25．变构效应是多亚基功能蛋白、寡聚酶及多酶复合体的作用特征，下列动力学曲线中哪种一般是别构酶（蛋白质）所表现的：（ ）
－
26．关于二级结构叙述哪一项不正确（ ）
A、右手a-螺旋比左手a-螺旋稳定，因为左手a-螺旋中L-构型氨基酸残基侧链 空间位阻大，不稳定；
B、一条多肽链或某多肽片断能否形成a-螺旋，以及形成的螺旋是否稳定与它 的氨基酸组成和排列顺序有极大关系；
C、多聚的异亮氨基酸R基空间位阻大，因而不能形成a-螺旋；
D、b-折叠在蛋白质中反平行式较平行式稳定，所以蛋白质中只有反平行式。 27．根据下表选出正确答案：
样品液中蛋白质的组分 蛋白质的pI 蛋白质分子量MW(KD) A 40 B 30 C 60 D 80 ①条件下电泳一定时间，最靠近阳极的组分一般是（ ）； ②SephadexG100柱层析时，最先洗脱出来的组分应该是（ ）。 28．前胰岛素原信号肽的主要特征是富含下列哪类氨基酸残基（ ） A、碱性氨基酸残基 B、酸性氨基酸残基 C、羟基氨基酸残基 D、亲水性氨基酸残基 29．蛋白质三维结构的构象特征主要取决于（ ）
A、氨基酸的组成、顺序和数目 B、氢键、盐键、范德华力和疏水力 C、温度、pH和离子强度等环境条件 D、肽链间或肽链内的二硫键
30．双缩脲法测定禾谷类作物样品中的蛋白质含量时，加入少量的四氯化碳（CCl4)其主要作用是（ A、促进双缩脲反应 B、消除色素类对比色的干扰 C、促进难溶性物质沉淀 D、保持反应物颜色的稳定 31．醋酸纤维薄膜电泳时，下列说法不正确的一项是（ ）
A、点样前醋酸纤维薄膜必须用纯水浸泡一定的时间，使处于湿润状态 B、以血清为样品，条件下，点样的一端应置于电泳槽的阴极一端 C、电泳过程中保持恒定的电压（90～110V）可使蛋白质组分有效分离 D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾，结果不易分析 三、是非判断（用“对”、“错”表示，并填入括号中）
1．胰岛素分子中含有两条多肽链，所以每个胰岛素分子是由两个亚基构成（ ）
）2．蛋白质多肽链中氨基酸的种类数目、排列次序决定它的二级、三级结构，即一级结构含有高级结构的结构信息。（ ）
3．肽键中相关的六个原子无论在二级或三级结构中，一般都处在一个刚性平面内。（ ） 4．构成天然蛋白质的氨基酸，其D－构型和L－型普遍存在。（ ）
5．变构效应是蛋白质及生物大分子普遍的性质，它有利于这些生物大分子功能的调节。（ ） 6．功能蛋白质分子中，只要个别氨基酸残基发生改变都会引起生物功能的丧失。（ ） 7．具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质有的生物活性。（ ） 8．胰岛素分子中含有A7-S-S-B7，A20-S-S-B19和A6-S-S-A11三个二硫键，这些属于二级结构的内容。（ ） 9．b-折叠是主肽链相当伸展的结构，因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。（ ）
10．在RNase（核糖核酸酶）分子中存在His12、His119侧链的咪唑基及Lys41-NH3由于多肽链是按特定方式折叠成一定空间结构，这三个在一级结构上相距甚远的氨基酸残基才彼此靠近构成RNase的催化中心。（ ）
11．变性后的蛋白质电泳行为不会改变（ ）
12．沉降系数S是蛋白质以及核酸分子量大小常用的表示单位。（ ） 13．调节溶液的pH值对盐析分离蛋白质影响不大。（ ）
14．Folin-酚试剂法测定蛋白质的灵敏度较高，但由于不同蛋白质含有酪氨酸的量不尽相同，会使测定结果往往带来较大偏差。（ ）
15．重金属盐对人畜的毒性，主要是重金属离子会在人体内与功能蛋白质结合引起蛋白质变性所致。（ ）
16．利用蛋白质系数计算粗蛋白含量时对不同的生物样品都一样（即为）。（ ）
17．胰蛋白酶作用时对肽键N-端氨基酸残基的要求是赖氨酸或精氨酸，这种专一性可称为基团专一性。（ ）
18．同源蛋白质中，保守性较强的氨基酸残基在决定蛋白质三维结构与功能方面起重要作用，因此致死性突变常常与它们的密码子突变有关。（ ） O
19．肽平面或酰胺平面是因为－C－NH－结构中 C=0的p电子离域或说是sp杂化N的孤对电子与 C=0 P-p共轭后引起的。（ ）
20．有两种蛋白质A和B的等电点分别是和，在pH为的条件下同一静电场中A一定比B向异极泳动速度快。（ ）
21．多肽链出现180°回折的地方会形成转角，其中甘氨酸和脯氨酸常出现在b-转角处，因为其侧链较短，对4→1氢键形成空间位阻小。（ ） 22．苯丙氨酸疏水性比缬氨酸强（ ）
23．由于静电作用，在等电点时氨基酸的溶解度最小（ ）
24．渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及PAGE（聚丙稀酰胺凝胶电泳）法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质的分子量的（ ）
25．当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为（ ） 26．蛋白质的亚基（或称为亚单位）和肽是同义词（ ） 四、解释下列名词
1．二面角 2．蛋白质一级结构 3．蛋白质二级结构
2
4．蛋白质三级结构 5．蛋白质四级结构 6．超二级结构
7．别构效应 8．同源蛋白质 9．简单蛋白质 10．结合蛋白质 11．蛋白质变性作用 12．蛋白质盐析作用 13．蛋白质分段盐析 14．结构域 15．寡聚蛋白
16．构象 17．构型 18．肽单位 19．肽平面 20．a—螺旋 21．b—折叠或b—折叠片 22．超二级结构 23．b—转角 24．蛋白质的变性作用 25．蛋白质的复性作用 26．亚基 五、问答题
1．组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类？各类氨基酸的共同特性是什么？这种分类在生物学上有何重要意义？
2．蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何？ 3．Edman反应所有的试剂和反应的特点如何？
4．何谓蛋白质等电点？等电点时蛋白质的存在特点是什么？ 5．何谓盐析？分段盐析粗分蛋白质的原理是什么？
6．哪些因素可引起蛋白质变性？变性后蛋白质的性质有哪些改变？ 7．蛋白质分离分析技术常用的有哪几种，简述凝胶过滤、电泳基本原理。 8．有哪些沉淀蛋白质的方法？其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点？ 9．溴化氰在多肽裂解中的作用部位，和裂解产物的末端氨酸残基为何物？ 10．举例说明蛋白质一级结构与功能关系。 11．举例说明蛋白质变构效应与意义。
12．一样品液中蛋白质组分为A（30KD）、B（20KD）、C（60KD），分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时，各组分被洗脱出来的先后次序。
13．多聚赖氨酸（poly－Lys）在pH7时呈无规线团，在pH10时则呈a－螺旋；而多聚的谷氨酸酸（poly－Glu）在pH7时也呈无规线团，而在pH4时则呈a－螺旋，为什么？ 14．简述胰蛋白酶原激活过程。
15．a－螺旋的特征是什么？如何以通式表示？
16．高浓度的硫酸铵（pH5时）可使麦清蛋白沉淀析出，并用于初步分离该种蛋白的早期步，简要说明其原理。
17．用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液（洗脱剂：，柠檬酸钠），其结果如下：①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义？②Asp比Glu先洗脱出来的原因？ 18．为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？ 六、计算题
1．测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp的分子量为204Da）。 2．一种蛋白质按其重量含有%亮氨酸和%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注：两种氨基酸的分子量都是131Da）。
3．某种氨基酸a－COOHpK＝，a－NH3pK＝，w－NH3pK＝，计算该种氨基酸的等电点（pI）。
＋
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4．某种四肽a－COOHpK＝，a－NH3pK＝，侧链－NH3pK＝侧链－COOHpK＝，试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？
5．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝），嘧唑基有10个（pK＝7），e－N＋H3（pK＝10），设C末端a－羧基pK＝，N－末端氨基pK＝，计算此多肽的pI。
6．已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da，如果此多肽完全以a－螺旋形式存在，试计算此a－螺旋的长度和圈数。 答 案：
一、填空 1. 20 非极性 极性 疏水 亲水 赖 精 天 冬 2.色 苯丙 酪 3. －OH －SH －COOH N NH 4.氨基 紫红 亮黄 5.肽 氢键 二硫键 疏水作用（键） 范德华力 二硫键 6. 谷 缬 极 非极 7.异硫氰酸苯酯 从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定 8. a-螺旋 b-折叠 b转角 无规卷曲 氢 氨基酸种类 数目排列次序 中断 9. 分子表面的水化膜 同性电荷斥力 10.溶解度最低 电场中无电泳行为 11.空间结构 二硫 氢 复性 12.正电 负电 13.谷 天冬 赖 精 细 15. b a c
二、选择填空 三、判断
题 1.× 2.√ 3.√ 4.× 5.√ 6.× 7.× 8.× 9.× 10.√ 11.× 12.√ 13.× 14.√ 15.√ 16.× 17.√ 18.√ 19.√ 20.× 21.× 22.√ 六、计算题
1.解：Trp残基MW/蛋白质MW＝%，蛋白质MW＝64138Da。 2.解：异亮氨酸/亮氨酸＝%/%＝1＝3/2
所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个。由此推理出： %＝2×（131－18）/蛋白质MW 答案：蛋白质MW＝13697Da。
3.答案：pI＝ 4.答案：pI＝
5.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝）少带5个负电荷（a－COOHpK＝，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。因此： pH＝pKa＋lg（[碱]/[酸]）＝＋lg（25/5）＝。
6.解：答案：肽链长度＝(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量＝14640Da
＋＋
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