缺氧诱导因子_1_在原发性肝癌血清中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系

551

󰀁论著󰀁文章编号:1007-8738(2011)05-0551-03

缺氧诱导因子󰀁1󰀁在原发性肝癌血清中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系

张大红,朱卫国,岳󰀁顺(南京医科大学附属淮安第一医院肿瘤科,江苏淮安223300)

ExpressionofHIF󰀁1󰀁inserumofpri󰀁maryhepatocellularcarcinomaandeffectsontumorinvasionandmetasta󰀁sis

ZHANGDa󰀁hong,ZHUWei󰀁guo,YUEShun

DepartmentofOncology,AffiliatedHuaianFirstHospitalofNan󰀁jingMedicalUniversity,Huaian223300,China

M:TostudytheexpressionofHIF󰀁1󰀁in[Abstract]󰀁AI

serumofprmiaryhepatocellularcarcinoma(PHC)

and

effectsontumorinvasionandmetastasis.METHODS:TheserumHIF󰀁1󰀁levelfrom60casesofPHCpatientsand60casesofnormalhealthyindividualsweredetectedbyELISA.RESULTS:TheserumHIF󰀁1󰀁levelofthePHCgroupwas(161.14󰀁80.79)pg/mL,thecontrolgroupwas(22.67󰀁8.47)pg/mL,comparedthedifferentwassignifi󰀁cant(P<0.05);TheserumHIF󰀁1󰀁levelofdistantmetasta󰀁sisoftumorgroupwas(225.15󰀁108.16)pg/mL,thenodistantmetastasisoftumorgroupwas(101.26󰀁55.18)pg/mL,comparedthedifferentwassignificant(P<0.05);TheserumHIF󰀁1󰀁levelofportalveintumorthrombusgroupwas(255.45󰀁122.23)pg/mL,Thenoportalveintumorthrombusgroupwas(139.97󰀁71.49)pg/mL,comparedthedifferentwassignificant(P<0.05);TheserumHIF󰀁1󰀁leveloftumorcapsulegroupwas(99.97󰀁55.75)pg/mL,Thenotumorcapsulegroupwas(187.36󰀁91.52)pg/mL,com󰀁paredthedifferentwassignificant(P<0.05);TheserumHIF󰀁1󰀁levelwasnosignificantlydifferentamongthediffer󰀁entage,gender,TNMstageandtumordiameter.CON󰀁CLUSION:TheserumHIF󰀁1󰀁hashighexpressioninPHC.TheserumHIF󰀁1󰀁expressionhascloserelationwiththewhetherdistantmetastasisoftumor,

portalveintumor

thrombusandtumorcapsule.TheserumHIF󰀁1󰀁levelcanpredicttheinvasionandmetastasisofPHC.[Keywords]

HIF󰀁1󰀁;

prmiaryhepatocellularcarcinoma;

tumor;invasionandmetastasis

[摘要]󰀁目的:探讨缺氧诱导因子󰀁1󰀁(HIF󰀁1󰀁)在原发性肝癌(PHC)血清中的表达及其与肝癌浸润转移的关系。方法:

收稿日期:2010-12-21;󰀁接受日期:2011-02-28

作者简介:张大红(1973-),男,江苏淮安人,主治医师,本科

Te:l0517󰀁84979545;E󰀁mai:lzhangdahong73@126.com采用双抗体夹心ELISA法检测60例PHC患者和60例健康查体者血清中HIF󰀁1󰀁水平。结果:PHC组的血清HIF󰀁1󰀁水平为(161.14󰀁80.79)ng/L,对照组为(22.67󰀁8.47)ng/L,相比较有显著性差异(P<0.05);肿瘤远处转移组血清HIF󰀁1󰀁水平为(225.15󰀁108.16)ng/L,无肿瘤远处转移组血清HIF󰀁1󰀁水平为(101.26󰀁55.18)ng/L,两组相比较有显著性差异(P<0.05);有门脉癌栓组血清HIF󰀁1󰀁水平为(255.45󰀁122.23)ng/L,无门脉癌栓组血清HIF󰀁1󰀁水平为(139.97󰀁71.49)ng/L,两组相比较有显著性差异(P<0.05);肿瘤包膜组血清HIF󰀁1󰀁水平为(99.97󰀁55.75)ng/L,无肿瘤包膜组血清HIF󰀁1󰀁水平为(187.36󰀁91.52)ng/L,两组相比较有显著性差异(P<0.05);HIF󰀁1󰀁在不同年龄、性别、TNM分期、肿瘤直径大小患者血清中的表达差异无统计学意义。结论:HIF󰀁1󰀁在PHC患者血清中呈高表达,HIF󰀁1󰀁的高表达与有无肿瘤转移、有无癌栓和包膜有关。血清HIF󰀁1󰀁水平可以为预测PHC的浸润和转移的指标。

[关键词]缺氧诱导因子󰀁1󰀁;原发性肝癌组织;肿瘤;浸润

和转移

[中图分类号]R392.11󰀁󰀁󰀁

[文献标识码]B

󰀁󰀁原发性肝癌(PHC)是临床最常见的消化系统恶性肿瘤,其发病率和死亡率均位居首位,成为严重威胁人类健康的重大疾病之一。根治性切除治疗肝癌的总体疗效虽然较好,但由于肝癌极易侵袭、转移,

根治性切除治疗后复发率高仍是临床治疗的难点。目前有关其病因和平发病、侵袭、转移的机制尚不清楚。缺氧诱导因子󰀁1󰀁(hypoxiainduciblefactor󰀁1󰀁,HIF󰀁1󰀁)在肿瘤血管生成过程中具有最重要的作[1]

用。因此,本研究通过检测PHC患者血清HIF󰀁1󰀁的含量,探讨HIF󰀁1󰀁在PHC形成和发展中的作用,进一步阐明PHC的形成机制,为PHC的早期诊断、治疗和预后判断提供理论依据。1󰀁资料和方法

1.1󰀁一般资料󰀁选择2004-10/2009-10在我院接受手术治疗的PHC患者为研究对象,其中资料完整并获成功随访者60例。所有患者均符合第8届全国肝癌防治研究会议通过的临床诊断标(2001)诊断标准[2],均经病理证实,术前未经任何治疗。60例PHC患者中,男47例,女13例;年龄36~69岁,平均年龄(58.35󰀁12.91)岁;TNM分期[5]:󰀁期21例,󰀁期19例,IV期20例;肿瘤直径󰀁5cm39例,<5cm21例;包膜完整18例,包膜不完整42例;远处转移29例。另552

ISSN1007-8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmunol)2011,27(5)

选择同期在我院检验的体验的健康查体者60例为对照组,男45例,女15例;年龄35~70岁,平均年龄(56.54󰀁10.35)岁。PHC组和对照组在性别和年龄构成上比较差异无统计学意义(P>0.05),具可比性。

1.2󰀁方法󰀁PHC患者于入院次日清晨以EDTA抗凝管抽取空腹肘静脉血2mL,对照组于体检当日抽取空腹静脉血2mL,不抗凝剂的试管中静置0.5~1.0h后以3000r/min离心5min,分离血清后置-80󰀁保存待测。HIF󰀁1󰀁采用双抗体夹心ELISA检测。所用试剂盒为人HIF󰀁1󰀁ELISAKit(上海西唐生物科技有限公司)的提供,严格按照仪器和试剂盒说明书进行操作。

1.3󰀁统计学方法󰀁所有计量资料采用x󰀁s表示,数据分析采用SPSS13.0统计分析软件,两组计数资料比较采用󰀁2检验,两组计量资料比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

元件(HRE)结合而引发下游促红细胞生长素、血管内皮生长因子(VEGF)等基因的转录,从而导致红细

[5]

胞生成和血管发生的生理和病理过程。VEGF是最主要的血管内皮生长因子之一,与肿瘤的复发、转移及预后密切相关

[6]

。而HIF󰀁1󰀁在调节VEGF的信

号传导过程中起着非常重要的作用,一方面HIF󰀁1󰀁

增加VEGFmRNA稳定性,另一方面具有增加VEGF的转录活性的作用

[7]

。目前在VEGF的启动子区内

发现存在HRE󰀁HIF󰀁1󰀁靶基因所共有的缺氧反应元件,并且有HIF󰀁1󰀁缺陷的肿瘤细胞异种移植,此时生成的肿瘤中VEGF表达和血管密度明显降低,推测HIF󰀁1󰀁可能诱导了VEGF的高表达,并且与肿瘤的浸润、转移有关

[8]

。因此,本研究检测HIF󰀁1󰀁的

2󰀁结果

2.1󰀁PHC组和对照组HIF󰀁1󰀁表达结果比较󰀁PHC组血清HIF󰀁1󰀁水平为(161.14󰀁80.79)ng/L,对照组为(22.67󰀁8.47)ng/L,相比较有显著性差异(󰀁2=8.89,P=0.000)。2.2󰀁HIF󰀁1󰀁水平与肝癌临床病理指标的关系󰀁HIF󰀁1󰀁在不同年龄、性别、TNM分期、肿瘤直径大小患者血清中的表达差异无统计学意义,而HIF󰀁1󰀁水平在肿瘤远处转移与否、是否有门脉癌栓和是否有肿瘤包膜之间比较有显著性差异(P<0.05,表1)。

表1󰀁HIF󰀁1󰀁水平与肝癌临床病理指标的关系

临床病理因素年龄(岁)性别TNM分期

<50󰀁50男

女󰀁期󰀁期󰀁期

远处转移门脉癌栓肿瘤包膜肿瘤直径(cm)

有无有无有无<5󰀁5

n144647132119202931114918422139

HIF󰀁1󰀁(ng/L)171.02󰀁85.69158.13󰀁79.3159.80󰀁79.91166.00󰀁83.96152.15󰀁78.21161.24󰀁80.12170.47󰀁84.14225.15󰀁108.16101.26󰀁55.18255.45󰀁122.23139.97󰀁71.4999.97󰀁55.75187.36󰀁91.52159.11󰀁80.48162.23󰀁80.95

0.7030.0000.0010.0000.6120.245

表达水平具有重要的现实意义。我们通过检测60例

肝癌患者血清中HIF󰀁1󰀁的表达水平,并与健康检查者为对照,结果表明:PHC组的血清HIF󰀁1󰀁水平为(161.14󰀁80.79)ng/L,对照组为(22.67󰀁8.47)ng/L,相比较有显著性差异(P<0.05)。本研究进一步对HIF󰀁1󰀁表达水平与PHC的临床病理指标之间关系进行研究,结果表明:HIF󰀁1󰀁在不同年龄、性别、TNM分期、肿瘤直径大小患者血清中的表达差异无统计学意义(P>0.05),而HIF󰀁1󰀁水平在肿瘤远处转移与否、是否有门脉癌栓和是否有肿瘤包膜之间比较有显著性差异。说明PHC患者血清HIF󰀁1󰀁含量与有无肿瘤转移、有无癌栓和包膜有关。分析其原因可以在于:肿瘤有无转移、有无癌栓和包膜等因素决定了肿瘤的生长方式与速度,它们使癌细胞呈快速侵袭性生长,致使肿瘤组织局部缺血、缺氧

[9]

(x󰀁s)󰀁

P值0.586

,

导致肿瘤细胞血清HIF󰀁1󰀁呈高表达,此时HIF󰀁1󰀁进一步刺激VEGF的表达而加速异常血管的生

[10]

成,导致肿瘤细胞更易侵入血管,发生浸润和转移。

综上所述,HIF󰀁1󰀁在PHC患者血清中呈高表达,HIF󰀁1󰀁的高表达与有无肿瘤转移、有无癌栓和包膜有关。通过检测PHC患者血清HIF󰀁1󰀁水平可以为预测PHC的浸润和转移提供重要的参考依据。参考文献:

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3󰀁讨论

恶性肿瘤的侵袭、转移和复发的过程十分复杂,是一个多步骤、多基因及多产物共同参与的复杂过

程。恶性肿瘤的侵袭和转移包括细胞黏附、细胞运动、细胞增生、细胞外基质降解、肿瘤血管生成、机体免疫等多个环节

[3]

。HIF󰀁1󰀁是一种广泛存在于人

和哺乳动物体内的转录因子,是细胞在缺氧应答反[4]

应中最重要的调节因子。HIF󰀁1󰀁通过与低氧反应(下转554页)

5543󰀁讨论

ISSN1007-8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmunol)2011,27(5)

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andalveolar

目前,国内外关于细胞因子及COX󰀁2和肝病之

间的关系的研究以动物试验及离体细胞、组织试验为多。LPS可刺激大鼠Kupffer细胞合成COX󰀁2,从而促进PGs释放。曾有作者发现PGE2合成抑制是

[8]

通过抑制COX󰀁2起作用的,并确定血中内毒素诱生的PGE2可作为测定COX󰀁2活性的指标。由于多数情况下,COX󰀁1不被诱导性表达,故TXA2、PGI2的增加主要是由COX󰀁2引起的。COX󰀁2在肝病的发生发展中可能起到重要的作用。以COX󰀁2为中心

[9]

[7]

,前瞻性登记第四军医大学西京医院消化科连

续性入院的重症肝炎患者,检测患者血清中的血栓素(TXA2)、前列腺环素(PGI2)的稳定代谢产物血栓素B2(TXB2)及6󰀁酮󰀁前列腺素F1󰀁(6󰀁keto󰀁PGF1󰀁)含量,并对其他重要因素进行了控制,旨对细胞因子COX󰀁2与重症肝炎的关系得出一个客观的结论,进一步指导临床对重症肝炎的预测及治疗。结果显示各组重症肝炎患者血清中TXB2和6󰀁keto󰀁PGF1󰀁的表达水平均明显高于普通乙肝相关性肝病患者,急、亚急、慢性重症组间细胞因子水平与病情的程度相关,但并无统计学差异;随着病情的好归,T/6󰀁K比值明显下降,有统计学意义。表明COX󰀁2在重症肝炎的发生发展中起着一定的作用。提示检测重症肝炎患者血清TXB2、6󰀁keto󰀁PGF1󰀁的水平和T/6󰀁K比值不仅对揭示肝病发生发展过程有一定的实用价值,而且对监测重症肝炎患者病情转归和预后有重要临床意义。

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(上接552页)

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