菌种的活化过程中接种完需要震荡均匀么
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发布时间：2022-04-23 16:45
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时间：2023-10-09 16:26
菌种活化就是逐级扩大培养,是为了得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境。（菌种查询：北纳生物www.bnbio.com）
人们采取无菌操作的方法，把某种食用菌从混杂的微生物中，单独地分离开来，这个过程叫做菌种分离。从分离过程中得到的菌丝体纯化后，就是纯菌种。在实验室条件下，以人工使纯菌种大量生长和繁殖的方法，叫做培养。
菌种的活化与种子扩大培养的区别
菌种活化通常是指保藏的菌种从冰箱中取出后，使用正常的培养基及培养条件帮助菌种恢复正常生长状态，而种子扩培除了有帮助种子进一步稳定生长以外，还会扩大细胞浓度，帮助缩短种子在发酵阶段的延滞期。
菌种的复苏和传代在生物安全柜及无菌条件下操作。打开菌种西林瓶胶塞，加入0.3ml液体培养基后，用无菌滴管反复吹吸溶解为悬液，移至斜面、平板或液体培养基后，连同剩余菌悬液的西林瓶一起培养。次日观察菌种的生长情况，如未生长，应继续培养24小时，或取培养之后的菌悬液再次接种培养基，培养24小时.复苏后的菌种在传1-2代后使用，使用代数不超过5代，5代后应销毁。
方法一
用无菌吸管往金*葡萄球菌、大肠埃希菌、大肠埃希氏菌O157、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、小肠结肠炎耶耳森氏菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、藤黄微球菌、蜡样芽胞杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂斜面上划线，36℃培养24-48小时。斜面放于4℃冰箱保存，每个月转接一次，代数以此类推。
方法二
用无菌吸管往铜绿假单胞菌西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于营养琼脂斜面上划线，36℃培养24-48小时。斜面放于25℃保存，每个月转接一次，代数以此类推。传代时，铜绿假单胞菌的绿色若变淡或无绿色，可用溴化十六烷基三甲铵琼脂替换营养琼脂。
方法三
用无菌吸管往粪链球菌、乙型溶血性链球菌西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于血平板后涂布，36℃培养24-48小时。血平板用封口膜密封，放于4℃冰箱保存，每半个月转接一次，代数以此类推。
方法四
用无菌吸管往单核细胞增生李斯特菌西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏琼脂斜面上，36℃培养24-48小时。斜面放于4℃冰箱保存，每个月转接一次，代数以此类推。
方法五
用无菌吸管往生孢梭菌、产气荚膜梭菌西林瓶冻干菌粉中加入脑心浸液培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于疱肉牛肉粒肉汤加液体石蜡1cm，36℃培养48-72小时。肉汤放于4℃冰箱保存，每半个月转接一次，代数以此类推。
方法六
用无菌吸管往副溶血性弧菌西林瓶冻干菌粉中加入3％氯化钠碱性蛋白胨水，充分悬浮后放置于36℃下复苏8-12小时。取适量的菌悬液于3％氯化钠营养琼脂斜面上，36℃培养24-48小时。斜面放于25℃保存，每个月转接一次，代数以此类推。
方法七
用无菌吸管往白色念珠菌、黑曲霉西林瓶冻干菌粉中加入沙氏液体培养基，充分悬浮后取适量的菌悬液于马铃薯葡萄糖琼脂斜面，25℃培养2-5天。斜面放于4℃保存，每两个月转接一次，代数以此类推。
