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both的时候search出来的引物时单个显示的,pairs的时候search出来的引物是成对出现的。你可以试着选择一下。你要克隆2.7kb的片段是吧?!一般search出来的结果都不理想,需要自己手动设计。具体设计方法对于新手来说有点复杂,你问下你们实验室的学长,同时在网上查下设计引物的一般原则。设计引物并不难,几分钟就学会了!告诉你个在线设计引物的网站:http://frodo.wi.mit.e/primer3/input.htm