PCR 实战宝典 No.1 :技术发展历程
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发布时间：2024-10-24 09:37
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时间：2024-11-08 10:13
PCR，即聚合酶链式反应，自1971年诞生以来，已在医学、微生物学等领域扮演关键角色，尤其在2020年新冠疫情中，大规模筛查与快速确诊都离不开这一技术。PCR不仅是分子生物学技术基石，更是生命科学的催化剂。DNA双螺旋结构的发现开启分子生物学研究新纪元，随后的遗传信息传递和基因工程建立在这一基础上。
1971年，科拉纳设想的DNA体外合成未获广泛应用，直到1976年，科学家钱嘉韵发现耐高温的Taq DNA聚合酶，这一发现为PCR技术的普及铺平道路。1983年，穆利斯的创新灵感催生了PCR技术，通过模拟细胞内DNA复制过程，实现基因片段扩增。1988年，自动化循环仪的出现大大简化了PCR实验，1993年，穆利斯因PCR技术荣获诺贝尔化学奖。
随着技术发展，定量PCR（qPCR）和实时荧光定量PCR（RT-PCR）诞生，前者通过荧光物质监测扩增产物，后者如SYBR GREEN染料，提高了灵敏度和速度。2000年，环介导等温扩增（LAMP）技术的出现，为病毒、细菌检测提供快速、简便的手段。
21世纪初，数字PCR（dPCR）技术提出，通过绝对定量和稀有等位基因检测，为肿瘤基因组学研究提供了新工具。微流控芯片和纳米制造技术的发展推动了dPCR技术的多样化，如微反应室/孔板dPCR、微流体dPCR和微滴式dPCR等。如Fluidigm的IFC平台和Life technologies的QuantStudio 3D系统，它们在PCR技术的发展中占据了重要地位。
